摘要 | 第3-12页 |
ABSTRACT | 第12-21页 |
前言 | 第24-29页 |
材料与方法 | 第29-58页 |
1 材料 | 第29-36页 |
1.1 临床样品来源 | 第29页 |
1.2 细胞、菌株及质粒 | 第29-30页 |
1.3 实验动物 | 第30页 |
1.4 主要试剂 | 第30-32页 |
1.5 主要仪器 | 第32-34页 |
1.6 主要试剂配制 | 第34-36页 |
2 方法 | 第36-58页 |
2.1 SET蛋白在临床乳腺癌组织样品中的表达 | 第36-41页 |
2.2 SET稳定缺陷乳腺癌细胞株的构建 | 第41-52页 |
2.3 RNA干扰抑制SET表达对人乳腺癌细胞株生物学行为的影响 | 第52-55页 |
2.4 RNAi沉默SET基因对人乳腺癌细胞株裸鼠皮下移植瘤的影响 | 第55-57页 |
2.5 统计学分析 | 第57-58页 |
结果 | 第58-84页 |
1 SET蛋白在乳腺癌组织中表达的情况 | 第58-60页 |
1.1 Western-blot检测SET蛋白在乳腺癌组织中表达的情况 | 第58-59页 |
1.2 免疫组化检测SET蛋白在乳腺癌组织中表达的情况 | 第59-60页 |
2 SET稳定缺陷乳腺癌细胞株的构建 | 第60-68页 |
2.1 psiRNA重组质粒的测序鉴定 | 第60-61页 |
2.2 病毒滴度检测 | 第61-62页 |
2.3 puromycin最佳浓度的确定及细胞筛选 | 第62页 |
2.4 实时荧光定量检测SET基因表达 | 第62-67页 |
2.5 Western-blot分析SET蛋白表达 | 第67-68页 |
3 RNA干扰抑制SET表达对乳腺癌细胞株生物学行为的影响 | 第68-77页 |
3.1 MTT法检测细胞生长 | 第68-72页 |
3.2 流式细胞仪检测肿瘤细胞凋亡 | 第72-73页 |
3.3 划痕实验检测肿瘤细胞迁移 | 第73-75页 |
3.4 Transwell侵袭小室检测细胞侵袭能力 | 第75-77页 |
4 RNAi沉默SET基因对人乳腺癌细胞株裸鼠皮下移植瘤的影响 | 第77-84页 |
4.1 psiRNA-SET对裸鼠成瘤的影响 | 第77-81页 |
4.2 免疫印迹结果 | 第81-82页 |
4.3 免疫组化结果 | 第82-84页 |
讨论 | 第84-93页 |
全文结论 | 第93-94页 |
综述 | 第94-107页 |
参考文献 | 第107-120页 |
攻读学位期间成果 | 第120-121页 |
致谢 | 第121-124页 |
统计学证明 | 第124页 |