| 英文符号表 | 第5-6页 |
| 中文摘要 | 第6-8页 |
| 英文摘要 | 第8-9页 |
| 前言 | 第10-18页 |
| 材料和方法 | 第18-33页 |
| 1 材料 | 第18-21页 |
| 1.1 细胞和病毒株 | 第18页 |
| 1.2 质粒和菌株 | 第18页 |
| 1.3 工具酶和试剂 | 第18-19页 |
| 1.4 主要仪器 | 第19页 |
| 1.5 主要溶液配制 | 第19-21页 |
| 2 方法 | 第21-33页 |
| 2.1 稳定细胞系构建的方法 | 第21-22页 |
| 2.2 引物设计 | 第22页 |
| 2.3 MDCK细胞的复苏培养 | 第22页 |
| 2.4 乙型流感病毒的扩大培养 | 第22-23页 |
| 2.5 乙型流感病毒RNA提取（EasyPure RNA Kit试剂盒） | 第23页 |
| 2.6 RT-PCR和PCR扩增HA基因 | 第23-25页 |
| 2.7 重组真核表达载体的构建 | 第25-27页 |
| 2.8 重组真核载体质粒和辅助质粒的大量提取（QIAGEN大提试剂盒） | 第27页 |
| 2.9 嘌呤霉素杀伤实验确定最适筛选浓度 | 第27-28页 |
| 2.10 细胞转染 | 第28页 |
| 2.11 血凝素蛋白表达的鉴定 | 第28-30页 |
| 2.12 血凝试验 | 第30-31页 |
| 2.13 血凝素蛋白HA的基因与蛋白的稳定性检测 | 第31-32页 |
| 2.14 细胞株筛选人血清中的乙型流感抗体实验 | 第32-33页 |
| 结果 | 第33-42页 |
| 1 重组真核表达载体构建 | 第33-36页 |
| 1.1 HA基因片段的扩增 | 第33-34页 |
| 1.2 重组真核载体的鉴定 | 第34-36页 |
| 2 嘌呤霉素筛选的最适浓度 | 第36页 |
| 3 血凝素蛋白表达的检测 | 第36-39页 |
| 3.1 流式细胞术实验检测HA蛋白 | 第36-37页 |
| 3.2 间接免疫荧光实验鉴定HA蛋白的表达情况 | 第37-38页 |
| 3.3 Western Blot检测HA蛋白在细胞株的表达情况 | 第38-39页 |
| 4 血凝实验结果 | 第39页 |
| 5 单克隆细胞经连续传代后基因组PCR鉴定及IFA鉴定 | 第39-41页 |
| 6 细胞株筛选人血清的乙型流感抗体结果 | 第41-42页 |
| 讨论 | 第42-46页 |
| 结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-51页 |
| 综述 | 第51-65页 |
| 参考文献 | 第59-65页 |
| 附录 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
