| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-14页 |
| 1 引言 | 第14-44页 |
| ·哺乳动物皮肤及被毛进化 | 第14-17页 |
| ·脊椎动物皮肤及附属物的形态 | 第14页 |
| ·脊椎动物皮肤附属物的蛋白组成 | 第14-15页 |
| ·脊椎动物皮肤附属物的调控及重塑 | 第15页 |
| ·脊椎动物皮肤及附属物的进化 | 第15-16页 |
| ·哺乳动物被毛起源进化的假说 | 第16-17页 |
| ·毛囊及皮肤的结构组成 | 第17-21页 |
| ·构成毛囊的重要细胞 | 第17-18页 |
| ·毛发各结构的功能划分 | 第18-20页 |
| ·皮肤结构 | 第20-21页 |
| ·毛囊形态发生及周期性生长 | 第21-23页 |
| ·毛囊形态发生 | 第21-22页 |
| ·毛囊生长周期 | 第22-23页 |
| ·参与毛囊调控的信号分子 | 第23-39页 |
| ·BMP 信号分子 | 第24-25页 |
| ·β连环蛋白（β-catenin） | 第25页 |
| ·成纤维生长因子（Fibroblast growth factor, FGF） | 第25-27页 |
| ·转化生长因子（Transforming growth factor, TGF) | 第27-28页 |
| ·甾体激素受体超家族 | 第28-30页 |
| ·无毛基因（Hairless, Hr） | 第30-31页 |
| ·多肽类激素：甲状旁腺激素相关多肽，IGF-1 和催乳素 | 第31-33页 |
| ·同源异型框基因（Homobox，Hox） | 第33-39页 |
| ·绒山羊绒毛发育的机理研究 | 第39-42页 |
| ·绒山羊毛囊形态发生 | 第39-40页 |
| ·绒山羊毛囊周期变化 | 第40-41页 |
| ·绒山羊毛囊分子机理研究进展 | 第41-42页 |
| ·毛囊发育相关基因的网络构建及系统生物学分析 | 第42-44页 |
| ·转录网络的构建 | 第42-43页 |
| ·皮肤毛囊转录网络的构建 | 第43-44页 |
| 2 本研究的整体框架 | 第44-48页 |
| ·技术路线 | 第44-46页 |
| ·Hoxc13 基因序列获取及进化分析 | 第44-45页 |
| ·绒山羊皮肤 Hoxc13 基因的表达研究 | 第45-46页 |
| ·拟解决问题 | 第46-47页 |
| ·研究意义 | 第47-48页 |
| 3 绒山羊 Hoxc13 基因的克隆及 Hoxc13 在哺乳动物被毛进化中的作用 | 第48-69页 |
| ·材料 | 第48-49页 |
| ·试验动物 | 第48页 |
| ·仪器和试剂 | 第48-49页 |
| ·试验方法 | 第49-54页 |
| ·DNA 提取 | 第49页 |
| ·Hoxc13 序列的获取 | 第49-50页 |
| ·Hoxc13 序列分析 | 第50-52页 |
| ·长链 PCR | 第52页 |
| ·克隆测序 | 第52-54页 |
| ·PCR 产物纯化 | 第52-53页 |
| ·目的片段的连接 | 第53页 |
| ·转化 | 第53页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第53-54页 |
| ·绒山羊 Hoxc13 基因结构分析 | 第54页 |
| ·绒山羊 Hoxc13 推定氨基酸的结构预测 | 第54页 |
| ·结果与分析 | 第54-66页 |
| ·基因组 DNA 的提取与检测 | 第54页 |
| ·PCR 扩增结果 | 第54-55页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第55-56页 |
| ·Kieser 法鉴定重组质粒 | 第55-56页 |
| ·PCR 鉴定重组质粒 | 第56页 |
| ·绒山羊 Hoxc13 基因序列分析 | 第56-57页 |
| ·绒山羊 Hoxc13 内含子结构分析 | 第57-58页 |
| ·绒山羊 Hoxc13 氨基酸序列分析及结构预测 | 第58-60页 |
| ·Hoxc13 基因的进化及氨基酸比对分析 | 第60-66页 |
| ·Hoxc13 基因在哺乳动物出现时发生了加速进化 | 第60-61页 |
| ·哺乳动物 Hoxc13 蛋白中存在一段富含甘氨酸的序列 | 第61-64页 |
| ·各动物 Hoxc13 蛋白的三级结构 | 第64-66页 |
| ·讨论 | 第66-69页 |
| 4 Hoxc13 在绒山羊皮肤中的表达特征 | 第69-76页 |
| ·材料 | 第69-70页 |
| ·试验动物 | 第69页 |
| ·仪器试剂 | 第69-70页 |
| ·引物信息 | 第70页 |
| ·试验方法 | 第70-71页 |
| ·总 RNA 提取及纯化 | 第70页 |
| ·cDNA 合成 | 第70-71页 |
| ·基因克隆测序 | 第71页 |
| ·实时定量 PCR 检测 | 第71页 |
| ·结果与分析 | 第71-74页 |
| ·总 RNA 提取 | 第71-72页 |
| ·测序结果分析 | 第72页 |
| ·Hoxc13 基因实时定量结果 | 第72页 |
| ·Hoxc13 和毛囊活性变化规律相一致 | 第72-74页 |
| ·Hoxc13 基因在胎儿时期的表达量与皮肤厚度变化趋势相一致 | 第74页 |
| ·讨论 | 第74-76页 |
| 5 绒山羊皮肤成纤维细胞过表达 Hoxc13 对其他 HFDRGs 的影响 | 第76-100页 |
| ·真核过表达载体pECFP-Hoxc13 的构建 | 第76-80页 |
| ·材料 | 第76-77页 |
| ·主要仪器设备 | 第76页 |
| ·试剂耗材 | 第76-77页 |
| ·组织材料 | 第77页 |
| ·方法 | 第77-79页 |
| ·绒山羊皮肤总 RNA 提取 | 第77页 |
| ·cDNA 第一条链的合成 | 第77页 |
| ·内蒙古白绒山羊 Hoxc13 基因 CDS 区序列克隆 | 第77-78页 |
| ·过表达载体pECFP-Hoxc13 的构建 | 第78-79页 |
| ·结果 | 第79-80页 |
| ·Hoxc13 基因CDS 区序列获得 | 第79页 |
| ·过表达载体pECFP-Hoxc13 的构建 | 第79-80页 |
| ·讨论 | 第80页 |
| ·绒山羊皮肤成纤维细胞和皮肤角质化细胞的分离与体外培养 | 第80-88页 |
| ·材料 | 第81-82页 |
| ·主要仪器设备 | 第81页 |
| ·活体材料 | 第81页 |
| ·试剂及耗材 | 第81-82页 |
| ·溶液配方 | 第82页 |
| ·方法 | 第82-84页 |
| ·绒山羊皮肤成纤维细胞的分离与体外培养 | 第82-83页 |
| ·绒山羊皮肤角质化细胞的分离与体外培养 | 第83页 |
| ·绒山羊皮肤细胞生长曲线的测定 | 第83页 |
| ·绒山羊皮肤成纤维细胞中期染色体数目分析 | 第83-84页 |
| ·绒山羊皮肤成纤维细胞对 G418 耐受性的检测 | 第84页 |
| ·结果 | 第84-86页 |
| ·组织块贴附法分离培养绒山羊皮肤成纤维细胞 | 第84页 |
| ·组织块贴附法分离培养绒山羊皮肤角质化细胞 | 第84-85页 |
| ·皮肤细胞生长曲线的测定 | 第85-86页 |
| ·细胞的染色体数目分析 | 第86页 |
| ·绒山羊皮肤成纤维细胞对 G418 的耐受性检测 | 第86页 |
| ·讨论 | 第86-88页 |
| ·绒山羊皮肤成纤维细胞过表达 Hoxc13 对毛囊发育相关基因的体外作用 | 第88-100页 |
| ·材料 | 第88页 |
| ·主要仪器设备 | 第88页 |
| ·试剂及耗材 | 第88页 |
| ·溶液配方 | 第88页 |
| ·方法 | 第88-91页 |
| ·绒山羊皮肤成纤维细胞的外源基因转染 | 第88-89页 |
| ·单细胞克隆的筛选 | 第89页 |
| ·RT-PCR 法检测Hoxc13 mRNA 的表达 | 第89-90页 |
| ·稳定整合细胞克隆的鉴定 | 第90页 |
| ·实时定量 PCR 检测 HFDRGs 在 FT 中的表达情况 | 第90-91页 |
| ·体外 HFDRGs 相互调控网络的构建 | 第91页 |
| ·结果 | 第91-97页 |
| ·褪黑激素对皮肤中两类细胞的不同影响 | 第91-92页 |
| ·脂质体转染绒山羊皮肤细胞及筛选 | 第92-93页 |
| ·RT-PCR 法检测pECFP-Hoxc13 载体过表达情况 | 第93-94页 |
| ·单细胞克隆的鉴定与分析 | 第94页 |
| ·各种细胞中的毛囊发育相关基因的检测 | 第94-96页 |
| ·基因调控网络的构建 | 第96-97页 |
| ·讨论 | 第97-100页 |
| 6 结论 | 第100-101页 |
| 致谢 | 第101-102页 |
| 参考文献 | 第102-118页 |
| 附录 | 第118-123页 |
| 作者简介 | 第123页 |
