| 摘要 | 第2-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 符号说明 | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-23页 |
| 1 新城疫病毒概述 | 第11-12页 |
| 1.1 新城疫病毒的结构 | 第11页 |
| 1.2 新城疫病毒的分类 | 第11-12页 |
| 1.3 新城疫病毒的溶瘤性 | 第12页 |
| 2 细胞周期调控的概述 | 第12-23页 |
| 2.1 细胞周期调控的基本原理 | 第13-19页 |
| 2.2 病毒复制与宿主细胞周期的相互作用 | 第19-20页 |
| 2.3 PI3K/AKT/β-catenin信号途径 | 第20-23页 |
| 第二章 新城疫病毒诱导细胞周期停滞 | 第23-36页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-24页 |
| 2.1.1 毒株、细胞与鸡胚 | 第23页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第23页 |
| 2.1.3 主要试剂及配置 | 第23-24页 |
| 2.2 方法 | 第24-26页 |
| 2.2.1 紫外线灭活NDV | 第24页 |
| 2.2.2 NDV感染细胞 | 第24页 |
| 2.2.3 CEF细胞的制备 | 第24-25页 |
| 2.2.4 细胞周期同步化 | 第25页 |
| 2.2.5 流式细胞术检测细胞周期 | 第25-26页 |
| 2.2.6 Western Blot检测新城疫病毒NP蛋白 | 第26页 |
| 2.3 实验结果 | 第26-34页 |
| 2.3.1 复制期NDV感染HeLa细胞能够诱导细胞周期发生改变 | 第26-28页 |
| 2.3.2 NDV所诱导的细胞G0/G1期的停滞是由于G1期向S期转换出现了障碍 | 第28-29页 |
| 2.3.3 NDV感染导致细胞周期发生改变的时间点 | 第29-31页 |
| 2.3.4 NDV介导细胞周期停滞的时间点与病毒滴度的关系 | 第31-32页 |
| 2.3.5 NDV感染鸡源细胞导致细胞周期变化 | 第32-34页 |
| 2.4 讨论 | 第34-36页 |
| 第三章 新城疫病毒诱导细胞细胞周期停滞的机制 | 第36-43页 |
| 3.1 实验材料 | 第36-37页 |
| 3.1.1 毒株、细胞 | 第36页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第36页 |
| 3.1.3 主要试剂及配置 | 第36-37页 |
| 3.2 方法 | 第37-39页 |
| 3.2.1 细胞样品制备 | 第37页 |
| 3.2.2 Western Blot检测细胞周期相关蛋白 | 第37-38页 |
| 3.2.3 提取RNA | 第38页 |
| 3.2.4 荧光定量检测细胞周期蛋白的mRNA水平 | 第38-39页 |
| 3.3 实验结果 | 第39-42页 |
| 3.3.1 NDV感染下调cyclin E1,cyclinD1的表达,抑制细胞周期调控重要靶蛋白Rb的磷酸化 | 第39-41页 |
| 3.3.3 β-catenin通过泛素-蛋白酶体途径降解 | 第41-42页 |
| 3.4 讨论 | 第42-43页 |
| 第四章 新城疫病毒诱导细胞细胞周期停滞对病毒复制的影响 | 第43-50页 |
| 4.1 材料 | 第43-44页 |
| 4.1.1 毒株、细胞 | 第43页 |
| 4.1.2 主要仪器 | 第43页 |
| 4.1.3 主要试剂及配置 | 第43-44页 |
| 4.2 方法 | 第44-46页 |
| 4.2.1 细胞同步化方法 | 第44页 |
| 4.2.2 流式细胞术检测同步化后细胞周期 | 第44-45页 |
| 4.2.3 Western Blot检测NDV的NP核蛋白 | 第45-46页 |
| 4.2.4 TCID50检测同步化细胞上清病毒滴度 | 第46页 |
| 4.3 实验结果 | 第46-48页 |
| 4.3.1 NDV感染细胞导致细胞周期G0/G1期阻滞,上清中的病毒复制增加 | 第46-47页 |
| 4.3.2 NDV感染细胞导致细胞周期G0/G1期阻滞,细胞中的病毒复制增加 | 第47-48页 |
| 4.4 讨论 | 第48-50页 |
| 全文总结 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
