摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
缩略语表(Abbreviation) | 第11-14页 |
第1章 文献综述 | 第14-25页 |
1.1 抗病毒天然免疫概述 | 第14-19页 |
1.1.1 病毒诱导Ⅰ型干扰素产生信号通路 | 第15-16页 |
1.1.2 干扰素诱导的信号转导 | 第16-17页 |
1.1.3 经典的Ⅰ型干扰素信号通路与ISGs作用 | 第17-18页 |
1.1.4 干扰素应答的负调控机制 | 第18页 |
1.1.5 病毒拮抗Ⅰ型干扰素信号转导的策略 | 第18-19页 |
1.2 猪繁殖与呼吸综合征研究进展 | 第19-25页 |
1.2.1 猪繁殖与呼吸综合征病毒基因组结构及其编码蛋白 | 第20-23页 |
1.2.2 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)与天然免疫 | 第23-25页 |
第2章 研究目的和意义 | 第25-26页 |
第3章 材料与方法 | 第26-38页 |
3.1 实验材料 | 第26-30页 |
3.1.1 细胞、毒株与菌株 | 第26页 |
3.1.2 载体与质粒 | 第26-27页 |
3.1.3 工具酶及主要试剂 | 第27页 |
3.1.4 Western Blot及Co-IP实验所需材料 | 第27-28页 |
3.1.5 培养基及其配制 | 第28页 |
3.1.6 主要缓冲液与相关试剂及其配制 | 第28-30页 |
3.1.7 主要实验仪器及设备 | 第30页 |
3.1.8 分子生物学分析软件 | 第30页 |
3.2 实验方法 | 第30-38页 |
3.2.1 细胞样品总RNA的提取、反转录及实时荧光定量PCR | 第30-32页 |
3.2.2 限制性内切酶酶切反应 | 第32页 |
3.2.3 PCR产物或酶切产物的电泳检测 | 第32页 |
3.2.4 PCR产物或酶切产物的回收与纯化 | 第32页 |
3.2.5 外源DNA片段与质粒载体的连接反应 | 第32-33页 |
3.2.6 大肠杆菌感受态细胞的制备(氯化钙法) | 第33页 |
3.2.7 连接产物的转化 | 第33页 |
3.2.8 重组质粒的制备与鉴定 | 第33-34页 |
3.2.9 质粒的转染(脂质体介导的瞬时转染法) | 第34-35页 |
3.2.10 双荧光素酶报告基因检测 | 第35页 |
3.2.11 Western Blot检测目的基因在真核细胞中的表达 | 第35-36页 |
3.2.12 免疫共沉淀(Co-IP)实验 | 第36-37页 |
3.2.13 细胞核和细胞质蛋白抽提实验 | 第37页 |
3.2.14 统计学方法 | 第37-38页 |
第4章 结果与分析 | 第38-47页 |
4.1 PRRSV nsp11及其酶活缺失突变体抑制ISRE启动子活化和ISGS的表达 | 第38-41页 |
4.2 PRRSV nsp11及其酶活缺失突变体抑制p-STAT1、p-STAT2和IRF9的转核 | 第41-43页 |
4.3 PRRSV nsp11及其酶活缺失突变体与IRF9存在相互作用 | 第43-45页 |
4.4 PRRSV nsp11及其酶活缺失突变体抑制IFN-α 诱导的ISGF3形成 | 第45-46页 |
4.5 PRRSV nsp11及其酶活缺失突变体抑制ISGF3诱导的ISRE启动子活化 | 第46-47页 |
第5章 讨论与结论 | 第47-50页 |
5.1 讨论 | 第47-49页 |
5.1.1 PRRSV nsp11通过多种机制调控宿主的天然免疫应答 | 第47-48页 |
5.1.2 PRRSV nsp11拮抗Ⅰ型干扰素信号通路的分子机制 | 第48-49页 |
5.2 结论 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-61页 |
致谢 | 第61页 |