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PRRSV nsp11抑制Ⅰ型干扰素信号通路的机制研究

摘要第6-8页
Abstract第8-10页
缩略语表(Abbreviation)第11-14页
第1章 文献综述第14-25页
    1.1 抗病毒天然免疫概述第14-19页
        1.1.1 病毒诱导Ⅰ型干扰素产生信号通路第15-16页
        1.1.2 干扰素诱导的信号转导第16-17页
        1.1.3 经典的Ⅰ型干扰素信号通路与ISGs作用第17-18页
        1.1.4 干扰素应答的负调控机制第18页
        1.1.5 病毒拮抗Ⅰ型干扰素信号转导的策略第18-19页
    1.2 猪繁殖与呼吸综合征研究进展第19-25页
        1.2.1 猪繁殖与呼吸综合征病毒基因组结构及其编码蛋白第20-23页
        1.2.2 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)与天然免疫第23-25页
第2章 研究目的和意义第25-26页
第3章 材料与方法第26-38页
    3.1 实验材料第26-30页
        3.1.1 细胞、毒株与菌株第26页
        3.1.2 载体与质粒第26-27页
        3.1.3 工具酶及主要试剂第27页
        3.1.4 Western Blot及Co-IP实验所需材料第27-28页
        3.1.5 培养基及其配制第28页
        3.1.6 主要缓冲液与相关试剂及其配制第28-30页
        3.1.7 主要实验仪器及设备第30页
        3.1.8 分子生物学分析软件第30页
    3.2 实验方法第30-38页
        3.2.1 细胞样品总RNA的提取、反转录及实时荧光定量PCR第30-32页
        3.2.2 限制性内切酶酶切反应第32页
        3.2.3 PCR产物或酶切产物的电泳检测第32页
        3.2.4 PCR产物或酶切产物的回收与纯化第32页
        3.2.5 外源DNA片段与质粒载体的连接反应第32-33页
        3.2.6 大肠杆菌感受态细胞的制备(氯化钙法)第33页
        3.2.7 连接产物的转化第33页
        3.2.8 重组质粒的制备与鉴定第33-34页
        3.2.9 质粒的转染(脂质体介导的瞬时转染法)第34-35页
        3.2.10 双荧光素酶报告基因检测第35页
        3.2.11 Western Blot检测目的基因在真核细胞中的表达第35-36页
        3.2.12 免疫共沉淀(Co-IP)实验第36-37页
        3.2.13 细胞核和细胞质蛋白抽提实验第37页
        3.2.14 统计学方法第37-38页
第4章 结果与分析第38-47页
    4.1 PRRSV nsp11及其酶活缺失突变体抑制ISRE启动子活化和ISGS的表达第38-41页
    4.2 PRRSV nsp11及其酶活缺失突变体抑制p-STAT1、p-STAT2和IRF9的转核第41-43页
    4.3 PRRSV nsp11及其酶活缺失突变体与IRF9存在相互作用第43-45页
    4.4 PRRSV nsp11及其酶活缺失突变体抑制IFN-α 诱导的ISGF3形成第45-46页
    4.5 PRRSV nsp11及其酶活缺失突变体抑制ISGF3诱导的ISRE启动子活化第46-47页
第5章 讨论与结论第47-50页
    5.1 讨论第47-49页
        5.1.1 PRRSV nsp11通过多种机制调控宿主的天然免疫应答第47-48页
        5.1.2 PRRSV nsp11拮抗Ⅰ型干扰素信号通路的分子机制第48-49页
    5.2 结论第49-50页
参考文献第50-61页
致谢第61页

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