| 摘要 | 第7-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 缩略语表 | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第11-20页 |
| 1.1 植物油脂代谢研究进展 | 第11-16页 |
| 1.1.1 油菜发展现状 | 第11页 |
| 1.1.2 菜籽油的脂肪酸组分及作用 | 第11页 |
| 1.1.3 植物中三酰甘油的合成 | 第11-16页 |
| 1.2 GDSL家族基因概述 | 第16-18页 |
| 1.2.1 GDSL型酶的分类 | 第16-17页 |
| 1.2.2 GDSL酶结构的特征 | 第17页 |
| 1.2.3 GDSL型脂肪酶对植物的意义 | 第17-18页 |
| 1.3 基因功能分析相关的技术与方法概述 | 第18-19页 |
| 1.3.1 基因的突变和过表达 | 第18-19页 |
| 1.3.2 气相色谱法 | 第19页 |
| 1.4 本研究的目的及意义 | 第19-20页 |
| 2 材料和方法 | 第20-32页 |
| 2.1 实验材料 | 第20-22页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第20页 |
| 2.1.2 载体和菌株 | 第20页 |
| 2.1.3 酶类 | 第20页 |
| 2.1.4 生化试剂与耗材 | 第20-21页 |
| 2.1.5 引物合成与测序分析 | 第21页 |
| 2.1.6 软件与数据分析 | 第21页 |
| 2.1.7 主要试剂的配制 | 第21-22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-32页 |
| 2.2.1 拟南芥生长条件 | 第22-23页 |
| 2.2.2 植物总DNA提取 | 第23页 |
| 2.2.3 植物总RNA提取及反转录cDNA | 第23-25页 |
| 2.2.4 甘蓝型油菜同源基因的克隆与表达载体的构建 | 第25-28页 |
| 2.2.5 表达载体转化农杆菌 | 第28页 |
| 2.2.6 拟南芥的转化及阳性种子的筛选 | 第28-29页 |
| 2.2.7 脂肪酸组成的气相色谱分析 | 第29页 |
| 2.2.8 阳性苗的GUS染色及拍照 | 第29-30页 |
| 2.2.9 qRT-PCR | 第30-32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-42页 |
| 3.1 突变体的鉴定及拟南芥基因表达模式测定 | 第32-34页 |
| 3.1.1 突变体的纯合性鉴定 | 第32页 |
| 3.1.2 T-DNA插入位点检测 | 第32-33页 |
| 3.1.3 T-DNA插入对GLIPL表达的影响 | 第33页 |
| 3.1.4 拟南芥GLIPL基因表达模式 | 第33-34页 |
| 3.2 油菜中目的片段的克隆和载体构建 | 第34-37页 |
| 3.2.1 目的基因扩增及过表达载体构建 | 第34-35页 |
| 3.2.2 序列比对分析 | 第35-36页 |
| 3.2.3 油菜启动子GUS染色载体构建 | 第36-37页 |
| 3.3 拟南芥遗传转化 | 第37-38页 |
| 3.3.1 农杆菌介导的拟南芥转化 | 第37页 |
| 3.3.2 拟南芥转基因阳性单株的鉴定 | 第37-38页 |
| 3.4 BnGLIPL和BnGLIP7启动子表达模式 | 第38-40页 |
| 3.5 拟南芥种子含油量的测定和分析 | 第40-42页 |
| 3.5.1 GLIPL突变体和过表达含油量表型 | 第40-41页 |
| 3.5.2 BnGLIP7含油量表型 | 第41-42页 |
| 4 讨论 | 第42-46页 |
| 4.1 种子发育过程中油脂的积累 | 第42-43页 |
| 4.2 GLIPL和GLIP7对含油量的影响 | 第43页 |
| 4.3 表达模式的分析 | 第43-46页 |
| 5 前景展望 | 第46-48页 |
| 参考文献 | 第48-55页 |
| 附录 | 第55-58页 |
| 致谢 | 第58页 |