| 摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 1 引言 | 第11-13页 |
| 2 实验材料 | 第13-17页 |
| 2.1 质粒细胞系 | 第13页 |
| 2.2 实验试剂 | 第13页 |
| 2.3 主要实验仪器 | 第13-14页 |
| 2.4 主要实验溶液的配制 | 第14-17页 |
| 3 实验方法 | 第17-33页 |
| 3.1 稳定表达细胞系的建立 | 第17-18页 |
| 3.1.1 P19CL6细胞的培养 | 第17页 |
| 3.1.2 脂质体转染 | 第17-18页 |
| 3.1.3 G418筛选稳定表达细胞系 | 第18页 |
| 3.2 细胞诱导分化 | 第18-19页 |
| 3.3 细胞核蛋白提取 | 第19页 |
| 3.4 蛋白定量(Braford法) | 第19-20页 |
| 3.5 蛋白免疫印迹实验(Western Blot) | 第20-22页 |
| 3.6 蛋白质免疫共沉淀实验(CO-IP) | 第22-31页 |
| 3.6.1 PPAR δ加Flag标签 | 第22-29页 |
| 3.6.1.1 双酶切 | 第22-23页 |
| 3.6.1.2 胶回收 | 第23-24页 |
| 3.6.1.3 连接 | 第24页 |
| 3.6.1.4 制备感受态细胞 | 第24-25页 |
| 3.6.1.5 转化 | 第25-26页 |
| 3.6.1.6 挑单克隆 | 第26页 |
| 3.6.1.7 小提质粒 | 第26-27页 |
| 3.6.1.8 酶切鉴定 | 第27-29页 |
| 3.6.2 磷酸钙转染 | 第29-30页 |
| 3.6.3 蛋白免疫共沉淀 | 第30-31页 |
| 3.7 瞬时转染实验 | 第31-33页 |
| 3.7.1 磷酸钙转染 | 第31-32页 |
| 3.7.2 荧光素酶活性测定 | 第32-33页 |
| 4 实验结果 | 第33-44页 |
| 4.1 PPARδ和GATA4、GATA6相互作用影响心肌细胞标志基因α-MHC的表达 | 第33-37页 |
| 4.1.1 P19CL6-control诱导分化实验 | 第33-34页 |
| 4.1.2 PPARδ促进P19CL6细胞向心肌细胞的分化 | 第34页 |
| 4.1.3 GATA4促进P19CL6细胞向心肌细胞的分化 | 第34-35页 |
| 4.1.4 GATA6促进P19CL6细胞向心肌细胞的分化 | 第35页 |
| 4.1.5 PPARδ和GATA4共同作用影响P19CL6细胞向心肌细胞的分化 | 第35-36页 |
| 4.1.6 PPARδ和GATA6共同作用影响P19CL6细胞向心肌细胞的分化 | 第36-37页 |
| 4.2 PPARδ和GATA4、GATA6在细胞内的相互结合 | 第37-38页 |
| 4.2.1 PPARδ与GATA4在体内相互作用 | 第37页 |
| 4.2.2 PPARδ与GATA6在体内相互作用 | 第37-38页 |
| 4.3 PPARδ与GATA4、GATA6相互作用对心肌标志基因α-MHC启动子活性的影响 | 第38-44页 |
| 4.3.1 GATA4对心肌标志基因α-MHC启动子活性的影响 | 第39页 |
| 4.3.2 PPARδ对心肌标志基因α-MHC启动子活性的影响 | 第39-40页 |
| 4.3.3 GATA6对心肌标志基因α-MHC启动子活性的影响 | 第40-41页 |
| 4.3.4 PPARδ和GATA4协同激活心肌标志基因α-MHC启动子 | 第41-42页 |
| 4.3.5 PPARδ和GATA6协同激活心肌标志基因α-MHC启动子 | 第42-44页 |
| 5 讨论 | 第44-47页 |
| 6 结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-51页 |
| 7 综述 P19细胞诱导分化研究进展 | 第51-63页 |
| 7.1 P19细胞的来源 | 第51-52页 |
| 7.2 诱导剂DMSO的作用 | 第52-53页 |
| 7.3 用P19细胞破译的心肌细胞分化的信号途径 | 第53-57页 |
| 7.3.1 分化过程中相关转录因子 | 第53-56页 |
| 7.3.2 细胞分化相关信号通路 | 第56-57页 |
| 7.4 胰岛素对心肌分化的影响 | 第57页 |
| 7.5 结论和展望 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-63页 |
| 个人简历及在学期间发表的学术论文 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
