中文摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7页 |
前言 | 第8-12页 |
材料与方法 | 第12-21页 |
1.材料 | 第12-13页 |
1.1 质粒 | 第12页 |
1.2 菌株与细胞株 | 第12页 |
1.3 常用分子生物学试剂盒 | 第12页 |
1.4 细胞培养试剂 | 第12页 |
1.5 其它分子生物学试剂和化学试剂 | 第12-13页 |
1.6 抗体 | 第13页 |
1.7 主要实验仪器 | 第13页 |
2. 方法 | 第13-21页 |
2.1 重组质粒构建与鉴定 | 第13-14页 |
2.2 哺乳动物细胞的转染 | 第14-15页 |
2.3 Western blot | 第15页 |
2.4 实时荧光定量(Real-timePCR) | 第15-16页 |
2.5 转录激活活性测定 | 第16-17页 |
2.6 流式细胞仪检测细胞周期 | 第17页 |
2.7 慢病毒包装 | 第17-18页 |
2.8 哺乳动物细胞稳定克隆的制备 | 第18页 |
2.9 细胞生长分析 | 第18-19页 |
2.10 克隆形成实验 | 第19页 |
2.11 划痕实验 | 第19-20页 |
2.12 免疫组织化学 | 第20页 |
2.13 统计方法 | 第20-21页 |
结果 | 第21-30页 |
1.Eya2 是 miR-30a 的直接靶基因 | 第21-23页 |
1.1 验证 miR-30a 在蛋白水平调控 Eya2 | 第21-22页 |
1.2 mRNA 水平检测 miR-30a 对 Eya2 基因的调控 | 第22页 |
1.3 荧光素酶活性检测 miR-30a 负调控 Eya2 基因表达 | 第22-23页 |
2.miR-30a 的功能研究 | 第23-26页 |
2.1 生长曲线实验表明 miR-30a 通过抑制 Eya2 抑制乳腺癌细胞的增殖 | 第23-24页 |
2.2 克隆形成实验表明 miR- 30a 能抑制乳腺癌细胞的增殖 | 第24-25页 |
2.3 划痕实验表明 miR-30a 通过抑制 Eya2 表达而抑制乳腺癌细胞的迁移 | 第25-26页 |
3.miR-30a 调控乳腺癌细胞的细胞周期 | 第26-28页 |
3.1 miR-30a 诱导乳腺癌细胞的 G1 期阻滞 | 第26-27页 |
3.2 miR-30 影响乳腺癌细胞 G1 期调控蛋白的表达 | 第27-28页 |
4.miR-30a 及其靶基因 Eya2 在乳腺癌组织中的表达 | 第28-30页 |
讨论 | 第30-34页 |
结论 | 第34-35页 |
参考文献 | 第35-42页 |
文献综述 | 第42-56页 |
参考文献 | 第48-56页 |
缩略词表 | 第56-59页 |
发表文章 | 第59-61页 |
致谢 | 第61-63页 |