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miR-30a通过调控Eya2抑制乳腺癌细胞的增殖和迁移

中文摘要第6-7页
Abstract第7页
前言第8-12页
材料与方法第12-21页
    1.材料第12-13页
        1.1 质粒第12页
        1.2 菌株与细胞株第12页
        1.3 常用分子生物学试剂盒第12页
        1.4 细胞培养试剂第12页
        1.5 其它分子生物学试剂和化学试剂第12-13页
        1.6 抗体第13页
        1.7 主要实验仪器第13页
    2. 方法第13-21页
        2.1 重组质粒构建与鉴定第13-14页
        2.2 哺乳动物细胞的转染第14-15页
        2.3 Western blot第15页
        2.4 实时荧光定量(Real-timePCR)第15-16页
        2.5 转录激活活性测定第16-17页
        2.6 流式细胞仪检测细胞周期第17页
        2.7 慢病毒包装第17-18页
        2.8 哺乳动物细胞稳定克隆的制备第18页
        2.9 细胞生长分析第18-19页
        2.10 克隆形成实验第19页
        2.11 划痕实验第19-20页
        2.12 免疫组织化学第20页
        2.13 统计方法第20-21页
结果第21-30页
    1.Eya2 是 miR-30a 的直接靶基因第21-23页
        1.1 验证 miR-30a 在蛋白水平调控 Eya2第21-22页
        1.2 mRNA 水平检测 miR-30a 对 Eya2 基因的调控第22页
        1.3 荧光素酶活性检测 miR-30a 负调控 Eya2 基因表达第22-23页
    2.miR-30a 的功能研究第23-26页
        2.1 生长曲线实验表明 miR-30a 通过抑制 Eya2 抑制乳腺癌细胞的增殖第23-24页
        2.2 克隆形成实验表明 miR- 30a 能抑制乳腺癌细胞的增殖第24-25页
        2.3 划痕实验表明 miR-30a 通过抑制 Eya2 表达而抑制乳腺癌细胞的迁移第25-26页
    3.miR-30a 调控乳腺癌细胞的细胞周期第26-28页
        3.1 miR-30a 诱导乳腺癌细胞的 G1 期阻滞第26-27页
        3.2 miR-30 影响乳腺癌细胞 G1 期调控蛋白的表达第27-28页
    4.miR-30a 及其靶基因 Eya2 在乳腺癌组织中的表达第28-30页
讨论第30-34页
结论第34-35页
参考文献第35-42页
文献综述第42-56页
    参考文献第48-56页
缩略词表第56-59页
发表文章第59-61页
致谢第61-63页

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