摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
缩略语 | 第11-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-22页 |
1 植物SNARE蛋白基因的研究进展 | 第12-13页 |
1.1 植物SNARE蛋白的分类 | 第12-13页 |
1.2 SNARE蛋白参与的抗病性研究 | 第13页 |
2 水稻抗稻瘟病研究进展 | 第13-22页 |
2.1 稻瘟病抗性类型和遗传方式的多样性 | 第14页 |
2.2 稻瘟病抗性及相关机理的研究 | 第14-17页 |
2.3 抗病相关蛋白的研究 | 第17-22页 |
第二章 OsNPSN11过量表达转基因水稻农艺性状调查及抗病性鉴定 | 第22-32页 |
摘要 | 第22页 |
1 材料与方法 | 第22-24页 |
1.1 植物材料 | 第22页 |
1.2 植物材料的处理 | 第22-23页 |
1.3 总RNA提取和cDNA第一链的合成 | 第23页 |
1.4 转基因水稻阳性植株的PCR和RT-PCR检测 | 第23-24页 |
1.5 T_3代转基因植株农艺性状调查 | 第24页 |
1.6 OsNPSN11过量表达转基因植株的稻瘟病菌抗性鉴定 | 第24页 |
2 结果分析 | 第24-30页 |
2.1 T_3代水稻转基因植株的PCR检测 | 第24-25页 |
2.2 T_3代水稻转基因植株的RT-PCR检测 | 第25-26页 |
2.3 T_3代水稻转基因植株农艺性状考察 | 第26-28页 |
2.4 T_3代转基因植株对稻瘟病菌的抗性鉴定 | 第28-30页 |
3 讨论 | 第30-32页 |
第三章 OsNPSN11过量表达转基因水稻的抗病蛋白组学分析 | 第32-54页 |
摘要 | 第32页 |
1 材料与方法 | 第32-35页 |
1.1 植物材料 | 第32-33页 |
1.2 植物材料的处理 | 第33页 |
1.3 样品制备及SDS-PAGE电泳检测 | 第33页 |
1.4 FASP酶解 | 第33页 |
1.5 iTRAQ标记 | 第33-34页 |
1.6 Strong Cation Exchange(SCX)chromatography分级方法 | 第34页 |
1.7 毛细管高效液相色谱 | 第34-35页 |
1.8 ESI质谱鉴定 | 第35页 |
1.9 ESI质谱数据分析 | 第35页 |
2 结果分析 | 第35-50页 |
2.1 蛋白质组学结果 | 第35-38页 |
2.2 差异表达蛋白图谱 | 第38-50页 |
3 讨论 | 第50-54页 |
第四章 酵母双杂交筛选OsNPSN11-13互作蛋白 | 第54-80页 |
摘要 | 第54页 |
1 材料与方法 | 第54-60页 |
1.1 植物材料 | 第54页 |
1.2 植物材料的处理 | 第54页 |
1.3 cDNA文库的构建 | 第54页 |
1.4 菌株、质粒和试剂盒 | 第54-55页 |
1.5 pBT3-N-OsNPSN11诱饵载体的构建 | 第55页 |
1.6 酵母感受态细胞的制备和转化 | 第55-56页 |
1.7 转录自激活活性检测 | 第56页 |
1.8 阳性克隆的初步筛选 | 第56-59页 |
1.9 回转酵母验证 | 第59-60页 |
1.10 β-半乳糖苷酶活性分析 | 第60页 |
1.11 阳性克隆的测序分析 | 第60页 |
1.12 OsNPSN12和OsNPSN13互作蛋白的筛选 | 第60页 |
2 结果分析 | 第60-76页 |
2.1 诱饵载体的构建 | 第60-62页 |
2.2 诱饵蛋白OsNPSNl1-13的转录自激活检测 | 第62-63页 |
2.3 阳性克隆的初步筛选 | 第63-65页 |
2.4 回转验证和β-半乳糖苷酶活性分析 | 第65-67页 |
2.5 诱饵蛋白互作能力强弱鉴定 | 第67-70页 |
2.6 阳性克隆的测序分析 | 第70-75页 |
2.7 交叉互作验证 | 第75-76页 |
3 讨论 | 第76-80页 |
全文结论 | 第80-82页 |
附录 | 第82-86页 |
参考文献 | 第86-94页 |
致谢 | 第94页 |