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miR-130a敲除小鼠模型的建立及其对脂肪发育的影响

摘要第3-4页
Abstract第4-5页
1 前言第9-14页
    1.1 促进脂肪生成的miRNA第10页
    1.2 抑制脂肪生成的miRNA第10-12页
    1.3 参与脂肪代谢的miRNA第12页
    1.4 与胰岛素抵抗和糖尿病有关的miRNAs第12-13页
    1.5 CRISPR/Cas9技术第13-14页
    1.6 本研究的目的及意义第14页
2 材料与方法第14-26页
    2.1 实验材料第14-17页
        2.1.1 实验动物第14页
        2.1.2 小鼠饲料第14页
        2.1.3 主要仪器第14-15页
        2.1.4 主要试剂第15页
        2.1.5 试剂的配置第15-17页
    2.2 实验方法第17-26页
        2.2.1 技术路线第17页
        2.2.2 取材第17页
        2.2.3 DNA抽提第17-18页
        2.2.4 PCR扩增第18页
        2.2.5 RNA抽提及mRNA、miRNA反转录第18-21页
        2.2.6 总蛋白提取及Western Blot检测第21-23页
        2.2.7 葡萄糖耐受试验(GTT)第23-24页
        2.2.8 胰岛素耐受试验(ITT)第24-25页
        2.2.9 石蜡切片第25页
        2.2.10 冰冻切片第25-26页
        2.2.11 油红O染色第26页
    2.3 数据分析第26页
3 结果与分析第26-36页
    3.1 miR-130a敲除(130KO)小鼠的鉴定第26-28页
        3.1.1 miR-130a敲除小鼠的测序鉴定第26-27页
        3.1.2 野生型小鼠与敲除小鼠中miR-130a表达量的比较第27-28页
    3.2 高脂诱导 130KO小鼠肥胖模型的建立第28-31页
        3.2.1 高脂诱导小鼠增重分析第28-29页
        3.2.2 高脂诱导小鼠切片分析第29-31页
    3.3 miR-130a敲除小鼠的脂肪生成标记基因的表达分析第31-33页
        3.3.1 常规饲喂条件下小鼠脂肪生成标记基因的表达第31页
        3.3.2 高脂诱导下小鼠脂肪生成标记基因的表达第31-33页
    3.4 130KO小鼠葡萄糖耐受和胰岛素耐受试验第33-36页
        3.4.1 130KO小鼠的血糖下降第33-34页
        3.4.2 130KO小鼠胰岛素敏感度分析第34-36页
4 讨论第36-39页
5 结论第39-40页
致谢第40-41页
参考文献第41-48页
附录:高脂饲喂小鼠后屠宰图片第48-49页

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