摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
1 前言 | 第9-14页 |
1.1 促进脂肪生成的miRNA | 第10页 |
1.2 抑制脂肪生成的miRNA | 第10-12页 |
1.3 参与脂肪代谢的miRNA | 第12页 |
1.4 与胰岛素抵抗和糖尿病有关的miRNAs | 第12-13页 |
1.5 CRISPR/Cas9技术 | 第13-14页 |
1.6 本研究的目的及意义 | 第14页 |
2 材料与方法 | 第14-26页 |
2.1 实验材料 | 第14-17页 |
2.1.1 实验动物 | 第14页 |
2.1.2 小鼠饲料 | 第14页 |
2.1.3 主要仪器 | 第14-15页 |
2.1.4 主要试剂 | 第15页 |
2.1.5 试剂的配置 | 第15-17页 |
2.2 实验方法 | 第17-26页 |
2.2.1 技术路线 | 第17页 |
2.2.2 取材 | 第17页 |
2.2.3 DNA抽提 | 第17-18页 |
2.2.4 PCR扩增 | 第18页 |
2.2.5 RNA抽提及mRNA、miRNA反转录 | 第18-21页 |
2.2.6 总蛋白提取及Western Blot检测 | 第21-23页 |
2.2.7 葡萄糖耐受试验(GTT) | 第23-24页 |
2.2.8 胰岛素耐受试验(ITT) | 第24-25页 |
2.2.9 石蜡切片 | 第25页 |
2.2.10 冰冻切片 | 第25-26页 |
2.2.11 油红O染色 | 第26页 |
2.3 数据分析 | 第26页 |
3 结果与分析 | 第26-36页 |
3.1 miR-130a敲除(130KO)小鼠的鉴定 | 第26-28页 |
3.1.1 miR-130a敲除小鼠的测序鉴定 | 第26-27页 |
3.1.2 野生型小鼠与敲除小鼠中miR-130a表达量的比较 | 第27-28页 |
3.2 高脂诱导 130KO小鼠肥胖模型的建立 | 第28-31页 |
3.2.1 高脂诱导小鼠增重分析 | 第28-29页 |
3.2.2 高脂诱导小鼠切片分析 | 第29-31页 |
3.3 miR-130a敲除小鼠的脂肪生成标记基因的表达分析 | 第31-33页 |
3.3.1 常规饲喂条件下小鼠脂肪生成标记基因的表达 | 第31页 |
3.3.2 高脂诱导下小鼠脂肪生成标记基因的表达 | 第31-33页 |
3.4 130KO小鼠葡萄糖耐受和胰岛素耐受试验 | 第33-36页 |
3.4.1 130KO小鼠的血糖下降 | 第33-34页 |
3.4.2 130KO小鼠胰岛素敏感度分析 | 第34-36页 |
4 讨论 | 第36-39页 |
5 结论 | 第39-40页 |
致谢 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-48页 |
附录:高脂饲喂小鼠后屠宰图片 | 第48-49页 |