摘要 | 第5-8页 |
abstract | 第8-10页 |
缩略词表 | 第16-18页 |
前言 | 第18-21页 |
第一部分 C/EBPα 在体外肾间质纤维化过程中的作用机制研究 | 第21-47页 |
1 引言 | 第21页 |
2 材料和方法 | 第21-34页 |
2.1 研究对象 | 第21-22页 |
2.2 主要试剂 | 第22页 |
2.3 主要仪器 | 第22-23页 |
2.4 实验方法 | 第23-34页 |
2.4.1 细胞培养 | 第23页 |
2.4.2 质粒抽提 | 第23-25页 |
2.4.3 质粒转染 | 第25-26页 |
2.4.4 总RNA抽提 | 第26页 |
2.4.5 逆转录(RT)反应 | 第26-27页 |
2.4.6 Real-time PCR反应 | 第27-28页 |
2.4.7 ELISA检测细胞因子MCP-1 | 第28-29页 |
2.4.8 Western blot蛋白印迹法 | 第29-32页 |
2.4.9 流式细胞仪观察细胞凋亡 | 第32-33页 |
2.4.10 统计学处理 | 第33-34页 |
3 结果 | 第34-43页 |
3.1 质粒瞬时转染HK-2 细胞 24h转染效率; | 第34页 |
3.2 质粒瞬时转染HK-2 细胞流式细胞术转染效率; | 第34-35页 |
3.3 质粒瞬时转染HK-2 细胞 36h C/EBPα 蛋白表达情况 | 第35-36页 |
3.4 质粒瞬时转染HK-2 细胞 36h NF-κB、PPARγ 蛋白表达情况; | 第36页 |
3.5 沉默C/EBPαTGFβ1 刺激HK-20h 4h 12h 24h MCP-1 表达水平; | 第36-37页 |
3.6 HK-2 细胞转染C/EBPα 质粒 24h TGFβ1(10ng/ml)刺激 12h | 第37-39页 |
3.7 转染后,各因子m RNA表达 | 第39-43页 |
3.7.1 TGFβ 刺激转染C/EBPα 质粒后HK-2 细胞C/EBPα 表达 | 第39-40页 |
3.7.2 TGFβ 刺激转染后HK-2 细胞PPARγ 的表达 | 第40-41页 |
3.7.3 TGFβ 刺激转染后HK-2 细胞ColⅠ的表达 | 第41-43页 |
4 讨论 | 第43-47页 |
第二部分 C/EBPα 在UUO模型中的表达情况及作用机制研究 | 第47-71页 |
1 引言 | 第47页 |
2. 材料和方法 | 第47-57页 |
2.1 研究对象及主要试剂 | 第47页 |
2.2 实验仪器 | 第47-48页 |
2.3 实验方法 | 第48-51页 |
2.4 UUO肾病模型 | 第51-52页 |
2.5 常规病理染色 | 第52-53页 |
2.6 免疫组织化学染色 | 第53-55页 |
2.7 RT-q PCR反应 | 第55-56页 |
2.8 统计学处理 | 第56-57页 |
3 结果 | 第57-67页 |
3.1 小鼠基因型鉴定结果 | 第57-58页 |
3.2 BALB/c小鼠各组术后7天的生化结果 | 第58页 |
3.3 C57小鼠野生型(WT)和杂合敲除小鼠UUO术后 7d的肌酐水平 | 第58-59页 |
3.4 C57各组小鼠和BALB/c各组小鼠病理染色结果 | 第59-61页 |
3.5 C57模型中各因子的m RNA表达水平 | 第61-63页 |
3.5.1 C57 UUO肾病模型小鼠各组中C/EBPα m RNA表达水平变化 | 第61-62页 |
3.5.2 C57 UUO肾病模型小鼠各组中NF-κB m RNA表达水平变化 | 第62-63页 |
3.6 BALB/c小鼠中,各个因子的m RNA表达水平 | 第63-67页 |
3.6.1 BALB/c UUO肾病模型小鼠各组中C/EBPαm RNA表达水平 | 第63-64页 |
3.6.2 BALB/c UUO肾病模型小鼠各组中NF-κB m RNA表达水平 | 第64-65页 |
3.6.3 BALB/c UUO肾病模型小鼠各组中 α-SMA m RNA表达水平 | 第65页 |
3.6.4 BALB/c UUO肾病模型小鼠各组中Ecadherin m RNA表达水平 | 第65-67页 |
4 讨论 | 第67-71页 |
结论 | 第71-72页 |
参考文献 | 第72-76页 |
在读期间发表和撰写的文章及学术会议投稿 | 第76-77页 |
致谢 | 第77-78页 |