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双壳类C型凝集素免疫功能及分子识别机制的研究

致谢第4-5页
摘要第5-8页
ABSTRACT第8-10页
第一章 研究背景第14-32页
    第一节C型凝集素研究概述第14-25页
        一、C型凝集素的定义第14页
        二、C型凝集素的结构第14-18页
        三、C型凝集素的分类第18页
        四、C型凝集素的功能第18-25页
    第二节 无脊椎动物C型凝集素研究概述第25-27页
        一、无脊椎动物C型凝集素的分类第25-26页
        二、无脊椎动物C型凝集素的功能第26-27页
        三、无脊椎动物C型凝集素的分子识别机制第27页
    第三节 双壳类C型凝集素的研究进展第27-29页
    第四节 本研究的目的及意义第29-32页
第二章 实验材料和方法第32-46页
    第一节 实验材料第32-35页
        一、实验动物及菌株第32-33页
        二、生物试剂第33-34页
        三、仪器设备第34-35页
    第二节 实验方法第35-46页
        一、实验动物的处理及样品收集第35页
        二、mRNA的提取及cDNA的合成第35-36页
        三、基因克隆及序列分析第36-37页
        四、mRNA表达水平的检测第37页
        五、基因的原核重组及蛋白的表达纯化第37-40页
        六、多克隆抗体的制备和IgG的纯化第40页
        七、Western blotting检测第40-41页
        八、免疫组织化学检测第41-42页
        九、免疫荧光检测第42页
        十、重组蛋白的PAMPs结合活性检测第42-43页
        十一、重组蛋白的菌结合活性检测第43页
        十二、重组蛋白凝菌活性的检测第43-44页
        十三、重组蛋白抑菌曲线的测定第44页
        十四、重组蛋白对兔血红细胞的凝集作用检测第44页
        十五、重组蛋白促进贝类血细胞的吞噬活性检测第44-45页
        十六、重组蛋白促进扇贝血细胞的包囊化活性检测第45页
        十七、数据统计分析第45-46页
第三章 实验结果第46-82页
    第一节 栉孔扇贝含四个CRD的C型凝集素Cf Lec-4 的研究第46-57页
        一、CfLec-4 的基因克隆及序列分析第46-48页
        二、不同PAMPs刺激后CfLec-4 在mRNA水平的表达模式第48-49页
        三、CfLec-4 的原核重组表达以及多克隆抗体的制备第49-50页
        四、CfLec-4 在栉孔扇贝不同组织中的分布第50-51页
        五、Cflec-4 重组蛋白的PAMPs结合活性第51-52页
        六、CfLec-4 重组蛋白的菌结合活性第52-53页
        七、Cflec-4 重组蛋白对栉孔扇贝血淋巴细胞吞噬活性促进第53-54页
        八、CfLec-4 的四个CRD结构域的基因重组及蛋白表达第54页
        九、CfLec-4 四个CRD重组蛋白的PAMPs结合活性第54-55页
        十、CfLec-4 的四个CRD重组蛋白的菌结合活性第55-56页
        十一、Cf Lec-4 四个CRD促进扇贝血淋巴细胞对大肠杆菌的吞噬活性第56-57页
    第二节 海湾扇贝含单个CRD的C型凝集素免疫功能及识别机制的研究第57-73页
        一、含关键氨基酸基序EPD/WSD的C型凝集素AiCTL-7 的研究第57-65页
        二、含关键氨基酸基序EPN的C型凝集素AiCTL-2,AiCTL-3 和AiCTL-4 的研究第65-73页
    第三节 牡蛎膜型C型凝集素CgCLec-5 研究第73-82页
        一、CgCLec-5 的序列特征第73-75页
        二、CgCLec-5 的基因重组、蛋白表达及抗体特异性检测第75-76页
        三、CgCLec-5 的组织分布第76-78页
        四、CgCLec-5 的CRD结构域重组蛋白的PAMPs结合谱第78-79页
        五、CgCLec-5 促进牡蛎血淋巴细胞的吞噬活性第79-82页
第四章 讨论第82-96页
    第一节C型凝集素在机体固有免疫中起重要作用第82-83页
    第二节 双壳类C型凝集素数量多并广泛分布第83-84页
    第三节 双壳类C型凝集素具有广泛的组织分布第84-86页
    第四节 双壳类C型凝集素的结构多样性第86-90页
        一、双壳类含有结构多样的C型凝集素第86页
        二、双壳类C型凝集素的Ca2+结合位点2具有多样性第86-90页
    第五节 双壳类C型凝集素对PAMPs和微生物的识别活性第90-93页
        一、含多个CRD的C型凝集素Cf Lec-4 具有广泛的PAMPs识别谱和菌结合谱第90-91页
        二、双壳类动物含单个CRD的C型凝集素的免疫识别活性第91-93页
    第六节 双壳类C型凝集素具有凝集和抑菌活性第93-94页
    第七节 双壳类C型凝集素具备调理素活性第94-96页
第五章 结论第96-100页
参考文献第100-118页
附录 本论文所用引物序列第118-120页
作者简历第120-122页
硕博连读期间完成和发表的论文第122-123页

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