| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 缩略词表 | 第9-11页 |
| 引言 | 第11-21页 |
| 1. SAC信号通路 | 第12-13页 |
| 2. Mps1 | 第13-18页 |
| 2.1 Mps1是SAC必需基因 | 第15-16页 |
| 2.2 Mps1与染色体中期排列 | 第16页 |
| 2.3 Mps1与胞质分裂 | 第16页 |
| 2.4 Mps1与中心体复制 | 第16-17页 |
| 2.5 Mps1与DNA损伤 | 第17-18页 |
| 2.6 Mps1的其它功能 | 第18页 |
| 3. 抑制Mps1激酶活性的小分子化合物 | 第18-19页 |
| 4. 研究目的 | 第19-21页 |
| 材料与方法 | 第21-28页 |
| 1. 实验材料 | 第21-22页 |
| 1.1 细胞株、菌株及试剂 | 第21页 |
| 1.2 培养基及试剂盒 | 第21页 |
| 1.3 抗体及组织芯片 | 第21页 |
| 1.4 Mpsl siRNA序列 | 第21-22页 |
| 1.5 CyclinB10-107功能片段和CyclinB 10-107/△D功能片段 | 第22页 |
| 2. 实验方法 | 第22-28页 |
| 2.1 细胞培养、冻存及复苏 | 第22-23页 |
| 2.2 质粒转染及siRNA转染 | 第23页 |
| 2.3 质粒提取和琼脂糖凝胶DNA回收 | 第23-24页 |
| 2.4 免疫印迹、免疫荧光及免疫组化 | 第24-25页 |
| 2.5 感受态细胞的制备 | 第25页 |
| 2.6 有丝分裂指数、染色体中期错配及核型分析 | 第25-26页 |
| 2.7 流式及活细胞摄影 | 第26-27页 |
| 2.8 细胞计数及结晶紫染色 | 第27页 |
| 2.9 稳定细胞系构建 | 第27-28页 |
| 结果 | 第28-41页 |
| 第一部分 过表达Mps1削弱SAC功能 | 第28-35页 |
| 1. Mps1在结肠癌组织中高表达 | 第28-29页 |
| 2. 过表达Mps1在细胞周期中发挥功能 | 第29-31页 |
| 3. 过表达Mps1削弱SAC功能 | 第31-34页 |
| 3.1 过表达Mps1对SAC的激活功能影响微弱 | 第31-32页 |
| 3.2 过表达Mps1显著削弱SAC的维持功能 | 第32-34页 |
| 4. 过表达Mps1促进基因组不稳定性 | 第34-35页 |
| 第二部分 抑制Mps1激酶活性缺失SAC促进肿瘤细胞死亡 | 第35-39页 |
| 1. 抑制Mps1有丝分裂前中期后的激酶活性促进肿瘤细胞死亡 | 第35-36页 |
| 2. Mps1有丝分裂中期后的缺失不影响肿瘤细胞生存能力 | 第36-39页 |
| 第三部分 SAC缺陷促进肿瘤细胞多核巨核化 | 第39-41页 |
| 1. 抑制Mps1激酶活性促进肿瘤细胞多核巨核化 | 第39页 |
| 2. Mps1有丝分裂中期后的缺失不影响胞质分裂功能 | 第39-41页 |
| 讨论 | 第41-43页 |
| 1. 过表达Mps1削弱SAC功能 | 第41页 |
| 2. Mps1有丝分裂中期后的缺失不影响胞质分裂功能 | 第41-42页 |
| 3. 抑制Mps1激酶活性缺失SAC促进肿瘤细胞死亡 | 第42-43页 |
| 结论 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-56页 |
| 致谢 | 第56-58页 |
| 已发表论文 | 第58页 |
