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鞭毛蛋白增强狂犬病疫苗免疫效果的研究

附件第5-6页
摘要第6-7页
Abstract第7-8页
英文缩略表第12-13页
第一章 引言第13-26页
    1.1 研究目的第13-14页
    1.2 国内外研究进展第14-25页
        1.2.1 狂犬病研究第14-18页
        1.2.2 狂犬病病毒研究第18-19页
        1.2.3 狂犬病病毒疫苗研究进展第19-21页
        1.2.4 腺病毒载体的概述第21-23页
        1.2.5 鞭毛蛋白研究第23-25页
    1.3 研究内容及方法第25-26页
第二章 鼠伤寒沙门氏菌鞭毛蛋白的原核表达及纯化第26-33页
    2.1 材料与方法第26-28页
        2.1.1 材料第26页
        2.1.2 重组表达菌的构建第26-27页
        2.1.3 鞭毛蛋白FljB、Fli C和FljB’-FliC的原核表达第27页
        2.1.4 鞭毛蛋白FljB、Fli C和FljB’-FliC的纯化第27-28页
        2.1.5 鞭毛蛋白FljB、Fli C和FljB’-FliC western blot检测第28页
    2.2 结果与分析第28-31页
        2.2.1 目的蛋白表达载体构建及鉴定结果第28-29页
        2.2.2 SDS-PAGE验证目的蛋白的表达第29-30页
        2.2.3 目的蛋白的纯化第30页
        2.2.4 目的蛋白western blot鉴定结果第30-31页
    2.3 讨论第31-33页
第三章 鞭毛蛋白在狂犬病灭活疫苗中的免疫增强作用第33-39页
    3.1 材料与方法第33-35页
        3.1.1 鞭毛蛋白FljB、Fli C和FljB’-FliC的表达和纯化第33页
        3.1.2 小鼠和脾细胞第33-34页
        3.1.3 刺激物第34页
        3.1.4 抗原准备第34页
        3.1.5 免疫第34页
        3.1.6 ELISA第34页
        3.1.7 酶联免疫斑点实验(ELISPOT)第34-35页
        3.1.8 数据分析第35页
    3.2 结果第35-37页
        3.2.1 蛋白纯化和分析第35页
        3.2.2 TLR5激动剂鞭毛蛋白对于WKRV在小鼠中的免疫佐剂特性第35-36页
        3.2.3 TLR5激动剂鞭毛蛋白在小鼠体内所诱导的IFN-γ 和IL-4 生成第36-37页
    3.3 讨论第37-39页
第四章 鞭毛蛋白与狂犬病毒G蛋白的重组腺病毒构建及其免疫增强作用的评价第39-56页
    4.1 材料第40页
        4.1.1 载体、细胞、病毒及实验动物第40页
        4.1.2 主要试剂第40页
        4.1.3 主要仪器和设备第40页
    4.2 方法第40-45页
        4.2.1 pAd-G、pAd-GB和pAd-GC重组腺病毒质粒的构建第40-42页
        4.2.2 复制缺陷型重组腺病毒Ad-G、Ad-GB和Ad-GC的获得及鉴定第42-43页
        4.2.3 复制缺陷型重组腺病毒在小鼠中免疫效果分析第43-45页
        4.2.4 数据分析第45页
    4.3 结果第45-54页
        4.3.1 重组腺病毒穿梭质粒pAdTrack-G和重组腺病毒质粒pAd-G的构建第45-47页
        4.3.2 重组腺病毒穿梭质粒pAdTrack-GB和重组腺病毒质粒pAd-GB的构建第47-48页
        4.3.3 重组腺病毒穿梭质粒pAdTrack-GC和重组腺病毒质粒pAd-GC的构建第48-49页
        4.3.4 重组腺病毒Ad-G、Ad-GB和Ad-GC感染细胞的荧光观察及细胞病变第49-50页
        4.3.5 重组腺病毒Ad-G、Ad-GB和Ad-GC稳定性检测第50-51页
        4.3.6 目的基因的表达检测第51页
        4.3.7 重组腺病毒Ad-G、Ad-GB和Ad-GC的准备第51-52页
        4.3.8 IgG抗体的检测第52-53页
        4.3.9 细胞因子IFN-γ 和IL-4 的检测第53页
        4.3.10 流式细胞术检测T细胞增殖分化情况第53-54页
    4.4 讨论第54-56页
第五章 全文结论第56-57页
参考文献第57-63页
致谢第63-64页
作者简历第64页

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