| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 英文缩略表 | 第12-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-23页 |
| 1.1 RV G蛋白研究进展 | 第13-17页 |
| 1.1.1 RV G蛋白 | 第13-14页 |
| 1.1.2 G蛋白与宿主免疫的关系 | 第14-15页 |
| 1.1.3 G蛋白与宿主细胞受体的关系 | 第15-16页 |
| 1.1.4 G蛋白与病毒致病性的关系 | 第16-17页 |
| 1.2 RV中和抗体研究进展 | 第17-23页 |
| 1.2.1 研究背景 | 第17页 |
| 1.2.2 中和抗体应用于疾病预防 | 第17-19页 |
| 1.2.3 中和抗体检测方法 | 第19页 |
| 1.2.4 不同检测方法的应用范围 | 第19-21页 |
| 1.2.5 检测方法的评价标准 | 第21页 |
| 1.2.6 讨论 | 第21-23页 |
| 第二章 RV G蛋白的原核表达 | 第23-30页 |
| 2.1 实验材料 | 第23页 |
| 2.1.1 菌株、质粒、毒株 | 第23页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第23页 |
| 2.2 方法 | 第23-26页 |
| 2.2.1 引物设计 | 第23-24页 |
| 2.2.2 RT-PCR | 第24页 |
| 2.2.3 PCR产物的克隆与测序 | 第24页 |
| 2.2.4 原核表达载体的构建 | 第24-25页 |
| 2.2.5 重组表达质粒的诱导表达 | 第25页 |
| 2.2.6 重组G蛋白的SDS-PAGE分析 | 第25页 |
| 2.2.7 重组G蛋白的Western blot鉴定 | 第25-26页 |
| 2.3 结果与分析 | 第26-28页 |
| 2.3.1 RV G基因的克隆 | 第26页 |
| 2.3.2 克隆重组质粒的鉴定 | 第26-27页 |
| 2.3.3 重组表达质粒的鉴定 | 第27页 |
| 2.3.4 SDS-PAGE分析 | 第27-28页 |
| 2.3.5 Western blot鉴定 | 第28页 |
| 2.4 讨论 | 第28-30页 |
| 第三章 RV G蛋白的真核表达 | 第30-36页 |
| 3.1 实验材料 | 第30页 |
| 3.1.1 菌株、质粒、毒株与细胞系 | 第30页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第30页 |
| 3.2 方法 | 第30-32页 |
| 3.2.1 引物设计 | 第30页 |
| 3.2.2 RT-PCR与克隆测序 | 第30-31页 |
| 3.2.3 表达质粒的构建与转染 | 第31页 |
| 3.2.4 重组质粒的表达鉴定 | 第31-32页 |
| 3.3 结果与分析 | 第32-34页 |
| 3.3.1 RV G基因的克隆 | 第32页 |
| 3.3.2 酶切鉴定 | 第32-33页 |
| 3.3.3 RT-PCR鉴定 | 第33页 |
| 3.3.4 IFA鉴定 | 第33-34页 |
| 3.4 讨论 | 第34-36页 |
| 第四章 RV G蛋白V区特异性单克隆抗体的制备与鉴定 | 第36-40页 |
| 4.1 实验材料 | 第36页 |
| 4.1.1 动物、质粒、毒株与细胞系 | 第36页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第36页 |
| 4.2 方法 | 第36-37页 |
| 4.2.1 杂交瘤细胞的制备与筛选 | 第36页 |
| 4.2.2 抗体效价测定及亚型鉴定 | 第36页 |
| 4.2.3 间接免疫荧光(IFA)鉴定 | 第36-37页 |
| 4.2.4 Western blot鉴定 | 第37页 |
| 4.3 结果与分析 | 第37-39页 |
| 4.3.1 杂交瘤细胞的制备与筛选 | 第37页 |
| 4.3.2 单克隆抗体亚型鉴定以及效价检测 | 第37页 |
| 4.3.3 Western blot鉴定 | 第37-38页 |
| 4.3.4 IFA鉴定 | 第38-39页 |
| 4.4 讨论 | 第39-40页 |
| 第五章 全文结论 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-46页 |
| 附录 | 第46-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 作者简历 | 第54页 |