| 中文摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 符号说明 | 第11-13页 |
| 第一章 前言 | 第13-18页 |
| 1 金刚烷胺概述 | 第13-15页 |
| 1.1 金刚烷胺的理化性质 | 第13-14页 |
| 1.2 金刚烷胺的药理作用 | 第14页 |
| 1.2.1 抗流感病毒作用 | 第14页 |
| 1.2.2 抗帕金森病作用 | 第14页 |
| 1.2.3 金刚烷胺的其他作用 | 第14页 |
| 1.3 金刚烷胺的危害 | 第14-15页 |
| 2 金刚烷胺检测方法研究进展 | 第15-17页 |
| 2.1 色谱分析法 | 第15-16页 |
| 2.1.1 高效液相色谱法 | 第15页 |
| 2.1.2 气相色谱法 | 第15-16页 |
| 2.1.3 液相色谱-串联质谱法 | 第16页 |
| 2.1.4 亲水作用色谱-串联质谱法 | 第16页 |
| 2.2 毛细管电泳法 | 第16-17页 |
| 2.3 电位滴定法 | 第17页 |
| 2.4 微流控芯片法 | 第17页 |
| 2.5 免疫分析法 | 第17页 |
| 3 本研究的目的及意义 | 第17-18页 |
| 第二章 金刚烷胺人工抗原的制备与鉴定 | 第18-24页 |
| 1 材料和方法 | 第18-20页 |
| 1.1 主要试剂 | 第18页 |
| 1.2 仪器与材料 | 第18页 |
| 1.3 主要溶液系统 | 第18页 |
| 1.4 金刚烷胺人工抗原的制备 | 第18-19页 |
| 1.4.1 免疫原合成 | 第18-19页 |
| 1.4.2 包被原合成 | 第19页 |
| 1.5 人工抗原的分析 | 第19-20页 |
| 1.5.1 人工抗原紫外光谱扫描鉴定 | 第19页 |
| 1.5.2 人工抗原蛋白质浓度的测定 | 第19-20页 |
| 2 结果 | 第20-21页 |
| 2.1 人工抗原紫外光谱扫描结果 | 第20-21页 |
| 2.2 人工抗原蛋白质浓度测定的结果 | 第21页 |
| 3 讨论 | 第21-24页 |
| 第三章 金刚烷胺单克隆抗体的制备 | 第24-36页 |
| 1 材料和方法 | 第24-31页 |
| 1.1 实验动物与生物材料 | 第24页 |
| 1.2 主要试剂 | 第24页 |
| 1.3 实验仪器与耗材 | 第24-25页 |
| 1.4 主要溶液系统 | 第25-26页 |
| 1.4.1 ELISA溶液 | 第25页 |
| 1.4.2 细胞培养溶液 | 第25-26页 |
| 1.4.3 纯化使用液 | 第26页 |
| 1.4.4 SDS-PAGE凝胶电泳使用液 | 第26页 |
| 1.5 金刚烷胺单克隆抗体的制备 | 第26-30页 |
| 1.5.1 动物免疫 | 第26-27页 |
| 1.5.2 ELISA筛选系统的建立 | 第27页 |
| 1.5.2.1 iELISA操作程序 | 第27页 |
| 1.5.2.2 CiELISA操作程序 | 第27页 |
| 1.5.2.3 确定包被抗原工作浓度和阳性血清效价 | 第27页 |
| 1.5.3 细胞融合 | 第27-29页 |
| 1.5.3.1 骨髓瘤细胞的培养 | 第27-28页 |
| 1.5.3.2 饲养细胞的制备 | 第28页 |
| 1.5.3.3 免疫脾细胞的制备 | 第28页 |
| 1.5.3.4 细胞融合 | 第28-29页 |
| 1.5.3.5 阳性孔的筛选 | 第29页 |
| 1.5.3.6 阳性孔的亚克隆 | 第29页 |
| 1.5.4 杂交瘤细胞株的稳定性试验及建株 | 第29页 |
| 1.5.5 腹水制备 | 第29页 |
| 1.5.6 腹水纯化 | 第29-30页 |
| 1.6 单克隆抗体的鉴定 | 第30-31页 |
| 1.6.1 纯化前后腹水蛋白浓度测定 | 第30页 |
| 1.6.2 抗体纯化效果SDS-PAGE鉴定 | 第30页 |
| 1.6.3 单克隆抗体特异性鉴定 | 第30-31页 |
| 2 结果 | 第31-34页 |
| 2.1 包被抗原的工作浓度和阳性血清效价的确定 | 第31页 |
| 2.2 融合前SP2/0生长状况 | 第31-32页 |
| 2.3 单克隆孔杂交瘤细胞生长状态 | 第32页 |
| 2.4 单克隆抗体细胞株的建立和稳定性 | 第32页 |
| 2.5 腹水的制备 | 第32页 |
| 2.6 SDS-PAGE凝胶电泳检测腹水纯化效果 | 第32-33页 |
| 2.7 单克隆抗体的鉴定 | 第33-34页 |
| 2.7.1 腹水蛋白含量 | 第33页 |
| 2.7.2 抗体特异性鉴定 | 第33-34页 |
| 3 讨论 | 第34-36页 |
| 第四章 鸡肉中金刚烷胺残留ELISA检测方法的建立 | 第36-43页 |
| 1 材料和方法 | 第36-37页 |
| 1.1 实验仪器与试剂 | 第36页 |
| 1.2 样品 | 第36页 |
| 1.3 ELSIA检测方法的建立 | 第36-37页 |
| 1.3.1 确定最佳封闭液 | 第36页 |
| 1.3.2 抗原抗体最佳工作浓度的确定 | 第36页 |
| 1.3.3 CiELISA标准工作曲线及相关参数 | 第36-37页 |
| 1.4 样品添加回收试验 | 第37页 |
| 1.4.1 样品处理方法 | 第37页 |
| 1.4.2 样品基质干扰 | 第37页 |
| 1.4.3 标准曲线的绘制 | 第37页 |
| 1.4.4 样品中金刚烷胺回收率测定 | 第37页 |
| 2 结果 | 第37-41页 |
| 2.1 ELISA检测方法的建立 | 第37-40页 |
| 2.1.1 最佳封闭条件的确定 | 第37-38页 |
| 2.1.2 抗原抗体工作浓度的确定 | 第38-39页 |
| 2.1.3 CiELISA标准工作曲线及参数 | 第39-40页 |
| 2.2 金刚烷胺单克隆抗体的初步应用 | 第40-41页 |
| 2.2.1 样品基质 | 第40-41页 |
| 2.2.2 样品溶液中标准曲线的绘制 | 第41页 |
| 2.3 样品添加回收率 | 第41页 |
| 3 讨论 | 第41-43页 |
| 全文结论 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |