| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5页 |
| 第一章 绪论 | 第8-16页 |
| 1.1 抗菌肽 | 第8-10页 |
| 1.1.1 抗菌肽简介 | 第8页 |
| 1.1.2 抗菌肽的来源 | 第8页 |
| 1.1.3 抗菌肽的理化性质 | 第8页 |
| 1.1.4 抗菌肽的结构特征 | 第8-9页 |
| 1.1.5 抗菌肽的作用机制 | 第9-10页 |
| 1.2 抗氧化肽简介 | 第10-14页 |
| 1.2.1 自由基和氧化损伤 | 第10页 |
| 1.2.2 抗氧化肽的来源 | 第10-11页 |
| 1.2.3 抗氧化肽的活性评价方法 | 第11-13页 |
| 1.2.4 抗氧化肽的作用机制 | 第13-14页 |
| 1.3 两栖类功能性多肽 | 第14-16页 |
| 1.3.1 两栖源多肽的功能多样性 | 第14-15页 |
| 1.3.2 两栖类功能性多肽的应用 | 第15-16页 |
| 第二章 抗菌肽和抗氧化肽的纯化和鉴定 | 第16-26页 |
| 2.1 材料与方法 | 第16-19页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第16页 |
| 2.1.2 实验试剂与耗材 | 第16页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第16页 |
| 2.1.4 皮肤分泌物的制备 | 第16-17页 |
| 2.1.5 功能性多肽的初步分离纯化 | 第17页 |
| 2.1.6 反相高效液相色谱（RP‐HPLC）分离 | 第17页 |
| 2.1.7 氨基酸序列分析 | 第17页 |
| 2.1.8 理论分子量 | 第17-18页 |
| 2.1.9 LC‐MS/MS分析 | 第18-19页 |
| 2.2 结果与分析 | 第19-25页 |
| 2.2.1 功能性多肽的纯化 | 第19-22页 |
| 2.2.2 氨基酸序列分析 | 第22页 |
| 2.2.3 理论分子量和理化参数分析 | 第22页 |
| 2.2.4 质谱分析 | 第22-25页 |
| 2.3 讨论 | 第25-26页 |
| 第三章 三种蛙皮肤组织cDNA文库的构建、多肽的cDNA克隆和序列分析 | 第26-37页 |
| 3.1 材料与方法 | 第26页 |
| 3.1.1 实验动物 | 第26页 |
| 3.1.2 实验试剂与耗材 | 第26页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第26页 |
| 3.2 mRNA的提取 | 第26-28页 |
| 3.2.1 准备工作 | 第26-27页 |
| 3.2.2 提取mRNA | 第27-28页 |
| 3.2.3 琼脂糖凝胶电泳 | 第28页 |
| 3.3 CDNA文库的构建 | 第28-31页 |
| 3.3.1 第一链cDNA的合成 | 第28页 |
| 3.3.2 第二链cDNA的合成 | 第28-29页 |
| 3.3.3 PCR产物的纯化和回收 | 第29页 |
| 3.3.4 编码抗菌肽和抗氧化肽cDNA基因的克隆 | 第29-30页 |
| 3.3.5 阳性克隆的筛选 | 第30-31页 |
| 3.4 基因测序与序列分析 | 第31页 |
| 3.5 结果与分析 | 第31-35页 |
| 3.5.1 阳性克隆的筛选 | 第31页 |
| 3.5.2 测序结果及基因分析 | 第31-35页 |
| 3.6 讨论 | 第35-37页 |
| 第四章 多肽功能分析 | 第37-49页 |
| 4.1 材料与方法 | 第37-41页 |
| 4.1.1 实验试剂与耗材 | 第37页 |
| 4.1.2 实验仪器 | 第37页 |
| 4.1.3 多肽的人工合成 | 第37页 |
| 4.1.4 抗菌功能分析 | 第37-39页 |
| 4.1.5 抗氧化 | 第39-40页 |
| 4.1.6 溶血活性 | 第40-41页 |
| 4.2 结果与分析 | 第41-45页 |
| 4.2.1 MIC检测结果 | 第41-42页 |
| 4.2.2 抗氧化活性结果 | 第42-44页 |
| 4.2.3 溶血检测结果 | 第44-45页 |
| 4.3 讨论 | 第45-49页 |
| 第五章 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 攻读学位期间取得的科研成果清单 | 第60页 |
