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葡萄遗传转化体系与转抗病相关基因研究

摘要第6-8页
英文摘要第8-10页
第一章 文献综述第15-25页
    1.1 葡萄遗传转化研究简介第15-20页
        1.1.1 葡萄再生途径第16-19页
        1.1.2 葡萄遗传转化方法第19-20页
        1.1.3 转基因葡萄植株的筛选第20页
    1.2 葡萄抗白粉病研究简介第20-21页
        1.2.1 葡萄白粉病第20-21页
        1.2.2 葡萄抗白粉病简介第21页
    1.3 葡萄3个抗白粉病基因的研究简介第21-24页
        1.3.1 葡萄抗白粉病芪合成酶基因第21-22页
        1.3.2 葡萄抗白粉病泛素连接酶基因第22-23页
        1.3.3 葡萄抗白粉病病程相关蛋白基因第23-24页
    1.4 本研究的目的和意义第24-25页
第二章 欧洲葡萄品种体细胞胚胎发生途径的建立及转基因方法筛选第25-40页
    2.1 材料和试剂第25-26页
        2.1.1 供试葡萄植物材料第25页
        2.1.2 供试植物表达载体及菌株第25页
        2.1.3 主要试剂第25-26页
        2.1.4 主要仪器第26页
    2.2 方法第26-29页
        2.2.1 葡萄品种器官发生途径的建立第26页
        2.2.2 葡萄品种体细胞胚发生途径的建立第26-27页
        2.2.3 葡萄品种体细胞胚发育各个时期的形态学观察第27页
        2.2.4 葡萄品种农杆菌介导和基因枪法转基因效率的比较第27-28页
        2.2.5 数据分析第28-29页
    2.3 结果与分析第29-37页
        2.3.1 葡萄品种器官发生途径的建立第29页
        2.3.2 欧洲葡萄品种胚性愈伤组织的诱导的影响因素第29-33页
        2.3.3 葡萄品种胚性愈伤组织的保持与扩繁培养基的筛选第33-34页
        2.3.4 葡萄品种体细胞胚的萌发与成苗培养基筛选第34-36页
        2.3.5 葡萄品种农杆菌介导法和基因枪法转基因GUS染色结果比较第36-37页
    2.4 讨论第37-39页
    2.5 小结第39-40页
第三章 欧洲葡萄品种遗传转化体系建立与转华东葡萄白河351 芪合成酶基因研究 .. 26第40-53页
    3.1 材料和试剂第40-41页
        3.1.1 供试葡萄植物材料第40页
        3.1.2 供试植物表达载体及菌株第40页
        3.1.3 葡萄白粉菌第40-41页
        3.1.4 主要试剂第41页
        3.1.5 主要仪器第41页
    3.2 方法第41-43页
        3.2.1 华东葡萄白河351 芪合成酶基因VpSTSgDNA2 转化欧洲葡萄品种第41-42页
        3.2.2 转华东葡萄白河351 芪合成酶基因VpSTSgDNA2 的欧洲葡萄抗性植株检测第42页
        3.2.3 转华东葡萄白河351 芪合成酶基因VpSTSgDNA2 的欧洲葡萄品种植株接种白粉菌及H2O2检测第42页
        3.2.4 转华东葡萄白河351 芪合成酶基因VpSTSgDNA2 的欧洲葡萄品种植株接种白粉菌目的基因转录水平检测第42-43页
        3.2.5 转化芪合成酶基因VpSTSgDNA2 的欧洲葡萄植株接种白粉菌芪类物质的HPLC检测第43页
        3.2.6 数据分析第43页
    3.3 结果与分析第43-50页
        3.3.1 欧洲葡萄品种转化华东葡萄白河351 芪合成酶基因VpSTSgDNA2 与抗性植株分子检测第43-46页
        3.3.2 转华东葡萄白河351 芪合成酶基因VpSTSgDNA2 的欧洲葡萄品种霞多丽叶片接种白粉菌及H2O2检测第46-48页
        3.3.3 转华东葡萄白河351 芪合成酶基因VpSTSgDNA2 的欧洲葡萄品种霞多丽葡萄叶片接种白粉菌目的基因转录水平检测第48-50页
        3.3.4 转华东葡萄白河351 芪合成酶基因VpSTSgDNA2 的霞多丽葡萄叶片接种白粉菌芪类物质的HPLC检测第50页
    3.4 讨论第50-52页
    3.5 小结第52-53页
第四章 华东葡萄白河351 泛素连接酶基因VpUR9 转化欧洲葡萄品种的研究第53-67页
    4.1 材料和试剂第53-54页
        4.1.1 供试葡萄植物材料第53页
        4.1.2 供试植物表达载体及菌株第53页
        4.1.3 主要试剂第53-54页
        4.1.4 主要仪器第54页
    4.2 方法第54-56页
        4.2.1 华东葡萄白河351 泛素连接酶基因VpUR9 序列比对与聚类分析第54页
        4.2.2 华东葡萄白河351 和欧洲葡萄品种黑比诺叶片在白粉菌、水杨酸处理时泛素连接酶基因VpUR9 的转录变化第54页
        4.2.3 华东葡萄白河351 泛素连接酶基因VpUR9 构建植物过量表达载体并转化欧洲葡萄品种第54-55页
        4.2.4 转华东葡萄白河351 泛素连接酶基因VpUR9 欧洲葡萄品种抗性植株的分子检测第55页
        4.2.5 转华东葡萄白河351 泛素连接酶基因VpUR9 欧洲葡萄品种抗性植株的western blotting检测第55页
        4.2.6 转华东葡萄白河351 泛素连接酶基因VpUR9 欧洲葡萄品种植株的白粉病抗性检测第55页
        4.2.7 转华东葡萄白河351 泛素连接酶基因VpUR9 欧洲葡萄品种植株的抗病相关标记基因表达量分析第55-56页
    4.3 结果与分析第56-65页
        4.3.1 华东葡萄白河351 泛素连接酶基因VpUR9 序列分析与相近物种序列比对及聚类分析第56-58页
        4.3.2 华东葡萄白河351 及欧洲葡萄品种黑比诺中泛素连接酶基因VpUR9 对白粉菌和水杨酸的响应第58-59页
        4.3.3 华东葡萄白河351 泛素连接酶基因VpUR9 转化欧洲葡萄品种第59-61页
        4.3.4 转华东葡萄白河351 泛素连接酶基因VpUR9 欧洲葡萄品种红地球抗性植株的分子检测及western blotting第61-62页
        4.3.5 转华东葡萄白河351 泛素连接酶基因VpUR9 欧洲葡萄品种红地球的白粉病抗性检测第62-64页
        4.3.6 转华东葡萄白河351 泛素连接酶基因VpUR9 对欧洲葡萄品种红地球葡萄植株抗病相关标记基因表达的影响第64-65页
    4.4 讨论第65-66页
    4.5 小结第66-67页
第五章 华东葡萄白河351 病程相关蛋白基因VpPR4-1转化欧洲葡萄品种红地球的研究第67-80页
    5.1 材料和试剂第67-68页
        5.1.1 供试植物材料第67页
        5.1.2 供试植物表达载体及菌株第67页
        5.1.3 主要试剂第67-68页
        5.1.4 主要仪器第68页
    5.2 方法第68-69页
        5.2.1 华东葡萄白河351 病程相关蛋白基因VpPR4-1 序列比对与聚类分析第68页
        5.2.2 华东葡萄白河351 白粉菌侵染、外源激素喷施、逆境胁迫下病程相关蛋白基因VpPR4-1 表达分析第68页
        5.2.3 华东葡萄白河351 病程相关蛋白基因VpPR4-1 克隆、亚细胞定位与VpPR4-1蛋白的DNase活性分析第68-69页
        5.2.4 华东葡萄白河351 病程相关蛋白基因VpPR4-1 植物表达载体的构建与转化欧洲葡萄品种红地球第69页
        5.2.5 转华东葡萄白河351 病程相关蛋白基因VpPR4-1 欧洲葡萄品种红地球白粉菌抗性鉴定与抗病相关标记基因表达定量分析第69页
    5.3 结果与分析第69-78页
        5.3.1 华东葡萄白河351 病程相关蛋白基因VpPR4-1 序列比对与聚类分析第69-71页
        5.3.2 华东葡萄白河351 病程相关蛋白基因VpPR4-1 对白粉菌、外源激素及逆境胁迫的响应第71-73页
        5.3.3 华东葡萄白河351 病程相关蛋白VpPR4-1 的DNase活性分析第73页
        5.3.4 华东葡萄白河351 病程相关蛋白基因VpPR4-1 亚细胞定位第73-74页
        5.3.5 华东葡萄白河351 病程相关蛋白基因VpPR4-1 植物表达载体的构建与转化欧洲葡萄品种红地球第74-76页
        5.3.6 转华东葡萄白河351 病程相关蛋白基因VpPR4-1 欧洲葡萄品种红地球白粉菌抗性鉴定与抗病相关标记基因表达分析第76-78页
    5.4 讨论第78-79页
    5.5 小结第79-80页
第六章 结论第80-81页
参考文献第81-94页
缩略词第94-95页
致谢第95-96页
作者简介第96页

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