摘要 | 第6-8页 |
英文摘要 | 第8-10页 |
第一章 文献综述 | 第15-25页 |
1.1 葡萄遗传转化研究简介 | 第15-20页 |
1.1.1 葡萄再生途径 | 第16-19页 |
1.1.2 葡萄遗传转化方法 | 第19-20页 |
1.1.3 转基因葡萄植株的筛选 | 第20页 |
1.2 葡萄抗白粉病研究简介 | 第20-21页 |
1.2.1 葡萄白粉病 | 第20-21页 |
1.2.2 葡萄抗白粉病简介 | 第21页 |
1.3 葡萄3个抗白粉病基因的研究简介 | 第21-24页 |
1.3.1 葡萄抗白粉病芪合成酶基因 | 第21-22页 |
1.3.2 葡萄抗白粉病泛素连接酶基因 | 第22-23页 |
1.3.3 葡萄抗白粉病病程相关蛋白基因 | 第23-24页 |
1.4 本研究的目的和意义 | 第24-25页 |
第二章 欧洲葡萄品种体细胞胚胎发生途径的建立及转基因方法筛选 | 第25-40页 |
2.1 材料和试剂 | 第25-26页 |
2.1.1 供试葡萄植物材料 | 第25页 |
2.1.2 供试植物表达载体及菌株 | 第25页 |
2.1.3 主要试剂 | 第25-26页 |
2.1.4 主要仪器 | 第26页 |
2.2 方法 | 第26-29页 |
2.2.1 葡萄品种器官发生途径的建立 | 第26页 |
2.2.2 葡萄品种体细胞胚发生途径的建立 | 第26-27页 |
2.2.3 葡萄品种体细胞胚发育各个时期的形态学观察 | 第27页 |
2.2.4 葡萄品种农杆菌介导和基因枪法转基因效率的比较 | 第27-28页 |
2.2.5 数据分析 | 第28-29页 |
2.3 结果与分析 | 第29-37页 |
2.3.1 葡萄品种器官发生途径的建立 | 第29页 |
2.3.2 欧洲葡萄品种胚性愈伤组织的诱导的影响因素 | 第29-33页 |
2.3.3 葡萄品种胚性愈伤组织的保持与扩繁培养基的筛选 | 第33-34页 |
2.3.4 葡萄品种体细胞胚的萌发与成苗培养基筛选 | 第34-36页 |
2.3.5 葡萄品种农杆菌介导法和基因枪法转基因GUS染色结果比较 | 第36-37页 |
2.4 讨论 | 第37-39页 |
2.5 小结 | 第39-40页 |
第三章 欧洲葡萄品种遗传转化体系建立与转华东葡萄白河351 芪合成酶基因研究 .. 26 | 第40-53页 |
3.1 材料和试剂 | 第40-41页 |
3.1.1 供试葡萄植物材料 | 第40页 |
3.1.2 供试植物表达载体及菌株 | 第40页 |
3.1.3 葡萄白粉菌 | 第40-41页 |
3.1.4 主要试剂 | 第41页 |
3.1.5 主要仪器 | 第41页 |
3.2 方法 | 第41-43页 |
3.2.1 华东葡萄白河351 芪合成酶基因VpSTSgDNA2 转化欧洲葡萄品种 | 第41-42页 |
3.2.2 转华东葡萄白河351 芪合成酶基因VpSTSgDNA2 的欧洲葡萄抗性植株检测 | 第42页 |
3.2.3 转华东葡萄白河351 芪合成酶基因VpSTSgDNA2 的欧洲葡萄品种植株接种白粉菌及H2O2检测 | 第42页 |
3.2.4 转华东葡萄白河351 芪合成酶基因VpSTSgDNA2 的欧洲葡萄品种植株接种白粉菌目的基因转录水平检测 | 第42-43页 |
3.2.5 转化芪合成酶基因VpSTSgDNA2 的欧洲葡萄植株接种白粉菌芪类物质的HPLC检测 | 第43页 |
3.2.6 数据分析 | 第43页 |
3.3 结果与分析 | 第43-50页 |
3.3.1 欧洲葡萄品种转化华东葡萄白河351 芪合成酶基因VpSTSgDNA2 与抗性植株分子检测 | 第43-46页 |
3.3.2 转华东葡萄白河351 芪合成酶基因VpSTSgDNA2 的欧洲葡萄品种霞多丽叶片接种白粉菌及H2O2检测 | 第46-48页 |
3.3.3 转华东葡萄白河351 芪合成酶基因VpSTSgDNA2 的欧洲葡萄品种霞多丽葡萄叶片接种白粉菌目的基因转录水平检测 | 第48-50页 |
3.3.4 转华东葡萄白河351 芪合成酶基因VpSTSgDNA2 的霞多丽葡萄叶片接种白粉菌芪类物质的HPLC检测 | 第50页 |
3.4 讨论 | 第50-52页 |
3.5 小结 | 第52-53页 |
第四章 华东葡萄白河351 泛素连接酶基因VpUR9 转化欧洲葡萄品种的研究 | 第53-67页 |
4.1 材料和试剂 | 第53-54页 |
4.1.1 供试葡萄植物材料 | 第53页 |
4.1.2 供试植物表达载体及菌株 | 第53页 |
4.1.3 主要试剂 | 第53-54页 |
4.1.4 主要仪器 | 第54页 |
4.2 方法 | 第54-56页 |
4.2.1 华东葡萄白河351 泛素连接酶基因VpUR9 序列比对与聚类分析 | 第54页 |
4.2.2 华东葡萄白河351 和欧洲葡萄品种黑比诺叶片在白粉菌、水杨酸处理时泛素连接酶基因VpUR9 的转录变化 | 第54页 |
4.2.3 华东葡萄白河351 泛素连接酶基因VpUR9 构建植物过量表达载体并转化欧洲葡萄品种 | 第54-55页 |
4.2.4 转华东葡萄白河351 泛素连接酶基因VpUR9 欧洲葡萄品种抗性植株的分子检测 | 第55页 |
4.2.5 转华东葡萄白河351 泛素连接酶基因VpUR9 欧洲葡萄品种抗性植株的western blotting检测 | 第55页 |
4.2.6 转华东葡萄白河351 泛素连接酶基因VpUR9 欧洲葡萄品种植株的白粉病抗性检测 | 第55页 |
4.2.7 转华东葡萄白河351 泛素连接酶基因VpUR9 欧洲葡萄品种植株的抗病相关标记基因表达量分析 | 第55-56页 |
4.3 结果与分析 | 第56-65页 |
4.3.1 华东葡萄白河351 泛素连接酶基因VpUR9 序列分析与相近物种序列比对及聚类分析 | 第56-58页 |
4.3.2 华东葡萄白河351 及欧洲葡萄品种黑比诺中泛素连接酶基因VpUR9 对白粉菌和水杨酸的响应 | 第58-59页 |
4.3.3 华东葡萄白河351 泛素连接酶基因VpUR9 转化欧洲葡萄品种 | 第59-61页 |
4.3.4 转华东葡萄白河351 泛素连接酶基因VpUR9 欧洲葡萄品种红地球抗性植株的分子检测及western blotting | 第61-62页 |
4.3.5 转华东葡萄白河351 泛素连接酶基因VpUR9 欧洲葡萄品种红地球的白粉病抗性检测 | 第62-64页 |
4.3.6 转华东葡萄白河351 泛素连接酶基因VpUR9 对欧洲葡萄品种红地球葡萄植株抗病相关标记基因表达的影响 | 第64-65页 |
4.4 讨论 | 第65-66页 |
4.5 小结 | 第66-67页 |
第五章 华东葡萄白河351 病程相关蛋白基因VpPR4-1转化欧洲葡萄品种红地球的研究 | 第67-80页 |
5.1 材料和试剂 | 第67-68页 |
5.1.1 供试植物材料 | 第67页 |
5.1.2 供试植物表达载体及菌株 | 第67页 |
5.1.3 主要试剂 | 第67-68页 |
5.1.4 主要仪器 | 第68页 |
5.2 方法 | 第68-69页 |
5.2.1 华东葡萄白河351 病程相关蛋白基因VpPR4-1 序列比对与聚类分析 | 第68页 |
5.2.2 华东葡萄白河351 白粉菌侵染、外源激素喷施、逆境胁迫下病程相关蛋白基因VpPR4-1 表达分析 | 第68页 |
5.2.3 华东葡萄白河351 病程相关蛋白基因VpPR4-1 克隆、亚细胞定位与VpPR4-1蛋白的DNase活性分析 | 第68-69页 |
5.2.4 华东葡萄白河351 病程相关蛋白基因VpPR4-1 植物表达载体的构建与转化欧洲葡萄品种红地球 | 第69页 |
5.2.5 转华东葡萄白河351 病程相关蛋白基因VpPR4-1 欧洲葡萄品种红地球白粉菌抗性鉴定与抗病相关标记基因表达定量分析 | 第69页 |
5.3 结果与分析 | 第69-78页 |
5.3.1 华东葡萄白河351 病程相关蛋白基因VpPR4-1 序列比对与聚类分析 | 第69-71页 |
5.3.2 华东葡萄白河351 病程相关蛋白基因VpPR4-1 对白粉菌、外源激素及逆境胁迫的响应 | 第71-73页 |
5.3.3 华东葡萄白河351 病程相关蛋白VpPR4-1 的DNase活性分析 | 第73页 |
5.3.4 华东葡萄白河351 病程相关蛋白基因VpPR4-1 亚细胞定位 | 第73-74页 |
5.3.5 华东葡萄白河351 病程相关蛋白基因VpPR4-1 植物表达载体的构建与转化欧洲葡萄品种红地球 | 第74-76页 |
5.3.6 转华东葡萄白河351 病程相关蛋白基因VpPR4-1 欧洲葡萄品种红地球白粉菌抗性鉴定与抗病相关标记基因表达分析 | 第76-78页 |
5.4 讨论 | 第78-79页 |
5.5 小结 | 第79-80页 |
第六章 结论 | 第80-81页 |
参考文献 | 第81-94页 |
缩略词 | 第94-95页 |
致谢 | 第95-96页 |
作者简介 | 第96页 |