| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6页 |
| 文献综述 | 第9-22页 |
| 第一章 纳米抗体简介及大肠杆菌表达系统的研究进展 | 第9-17页 |
| 1.1 纳米抗体简介 | 第9-14页 |
| 1.1.1 纳米抗体的结构特点 | 第9-11页 |
| 1.1.2 纳米抗体的功能特性 | 第11-12页 |
| 1.1.3 纳米抗体的应用 | 第12-14页 |
| 1.2 大肠杆菌原核表达系统的研究概况 | 第14-17页 |
| 1.2.1 大肠杆菌表达系统表达外源基因的优缺点 | 第14-15页 |
| 1.2.2 提高大肠杆菌表达系统高效可溶性表达外源蛋白的方法 | 第15-17页 |
| 第二章 融合标签技术研究进展 | 第17-22页 |
| 2.1 融合标签的种类 | 第17-18页 |
| 2.2 融合标签的作用 | 第18-19页 |
| 2.2.1 增加重组蛋白质的产量 | 第18-19页 |
| 2.2.2 提高蛋白的可溶性和稳定性 | 第19页 |
| 2.2.3 促进蛋白正确折叠 | 第19页 |
| 2.2.4 实现蛋白的特异性标记 | 第19页 |
| 2.2.5 在检测方面的应用 | 第19页 |
| 2.3 生物素亲和素系统（BAS系统） | 第19-20页 |
| 2.4 本论文的研究意义、主要内容及技术路线 | 第20-22页 |
| 2.4.1 研究意义 | 第20-21页 |
| 2.4.2 主要内容及技术路线 | 第21-22页 |
| 试验研究 | 第22-36页 |
| 第三章 抗圆环病毒II型Cap蛋白纳米抗体的生物素修饰及二聚化改造 | 第22-35页 |
| 3.1 材料 | 第22-25页 |
| 3.1.1 PCV2 Cap蛋白、纳米抗体、菌株、载体 | 第22-23页 |
| 3.1.2 酶、纯化树脂、抗体 | 第23页 |
| 3.1.3 主要药品及试剂 | 第23页 |
| 3.1.4 溶液配制 | 第23-25页 |
| 3.1.5 主要仪器 | 第25页 |
| 3.2 方法 | 第25-30页 |
| 3.2.1 纳米抗体表达载体的构建 | 第25-26页 |
| 3.2.2 重组纳米抗体的诱导表达及纯化 | 第26页 |
| 3.2.3 包涵体的提取 | 第26-27页 |
| 3.2.4 蛋白透析 | 第27页 |
| 3.2.5 PCV2 Cap蛋白的表达纯化 | 第27-28页 |
| 3.2.6 融合标签纳米抗体和Cap蛋白量的测定 | 第28-29页 |
| 3.2.7 间接ELISA检测融合标签纳米抗体抗原结合活性 | 第29页 |
| 3.2.8 直接ELISA检测重组纳米抗体生物素标记的效果 | 第29-30页 |
| 3.3 实验结果 | 第30-34页 |
| 3.3.1 PCV2 Cap的原核表达与纯化 | 第30页 |
| 3.3.2 生物素化纳米抗体二聚体表达载体pNovoAvi-dVHH的构建 | 第30-31页 |
| 3.3.3 生物素化纳米抗体二聚体的表达 | 第31-32页 |
| 3.3.4 重组纳米抗体包涵体的提取与纯化 | 第32页 |
| 3.3.5 重组纳米抗体的ELISA功能验证 | 第32-33页 |
| 3.3.6 重组纳米抗体生物素标记ELISA验证 | 第33-34页 |
| 3.4 讨论 | 第34-35页 |
| 结论 | 第35-36页 |
| 参考文献 | 第36-39页 |
| 致谢 | 第39-40页 |
| 作者简介 | 第40页 |
