| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 第一章 绪论 | 第7-16页 |
| 1.1 GLP-1类似物的研究 | 第7-8页 |
| 1.1.1 GLP-1的简介 | 第7页 |
| 1.1.2 GLP-1类似物的研究 | 第7-8页 |
| 1.2 中国仓鼠卵巢（Chinese hamster ovary,CHO）细胞表达体系概述 | 第8-10页 |
| 1.2.1 CHO细胞表达体系的优势 | 第8-9页 |
| 1.2.2 CHO细胞高效表达策略 | 第9-10页 |
| 1.3 无血清培养基中特殊小分子物质的添加 | 第10-12页 |
| 1.3.1 无血清培养基的概述 | 第10页 |
| 1.3.2 无血清培养基中添加的特殊小分子物质 | 第10-11页 |
| 1.3.3 苏拉明 | 第11-12页 |
| 1.3.4 丙戊酸 | 第12页 |
| 1.4 动物细胞大规模培养概述 | 第12-15页 |
| 1.4.1 细胞的培养方式 | 第12-13页 |
| 1.4.2 细胞大规模培养生物反应器介绍 | 第13页 |
| 1.4.3 细胞大规模培养条件控制 | 第13-15页 |
| 1.5 立题背景及研究内容 | 第15-16页 |
| 第二章 材料与方法 | 第16-23页 |
| 2.1 实验材料 | 第16-18页 |
| 2.1.1 细胞株 | 第16页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第16页 |
| 2.1.3 实验耗材及仪器 | 第16-17页 |
| 2.1.4 培养基及相关溶液配制 | 第17-18页 |
| 2.2 实验方法 | 第18-23页 |
| 2.2.1 细胞的复苏、培养及冻存 | 第18-19页 |
| 2.2.2 添加不同浓度苏拉明流加实验 | 第19页 |
| 2.2.3 添加不同浓度丙戊酸流加实验 | 第19页 |
| 2.2.4 苏拉明和丙戊酸混合添加流加实验 | 第19页 |
| 2.2.5 蛋白的检测方法 | 第19-20页 |
| 2.2.6 细胞周期的测定 | 第20页 |
| 2.2.7 细胞凋亡的测定 | 第20页 |
| 2.2.8 胞内总RNA的提取 | 第20页 |
| 2.2.9 反转录PCR和荧光定量PCR | 第20-21页 |
| 2.2.10 重组CHO细胞在5L一次性生物反应器中扩大培养 | 第21页 |
| 2.2.11 融合蛋白的分离纯化 | 第21-22页 |
| 2.2.12 融合蛋白的生物活性检测 | 第22-23页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第23-35页 |
| 3.1 无血清培养基中特殊小分子的添加对重组CHO细胞的影响 | 第23-28页 |
| 3.1.1 苏拉明对重组CHO细胞的影响 | 第23-24页 |
| 3.1.2 丙戊酸对重组CHO细胞的影响 | 第24-27页 |
| 3.1.3 混合添加苏拉明和丙戊酸对重组CHO细胞的影响 | 第27-28页 |
| 3.2 重组CHO细胞在一次性生物反应器中流加培养的条件优化 | 第28-31页 |
| 3.2.1 pH控制方式的优化 | 第28-29页 |
| 3.2.2 DO控制方式的优化 | 第29-30页 |
| 3.2.3 补料方式的优化 | 第30-31页 |
| 3.2.4 重组CHO细胞在5L一次性生物反应器中流加培养 | 第31页 |
| 3.3 融合蛋白的分离纯化及生物活性检测 | 第31-35页 |
| 3.3.1 Blue Sepharose FF亲和层析 | 第31-32页 |
| 3.3.2 Octyl Sepharose FF疏水层析 | 第32-33页 |
| 3.3.3 Q Sepharose离子层析 | 第33页 |
| 3.3.4 融合蛋白的生物活性检测 | 第33-35页 |
| 主要结论与展望 | 第35-36页 |
| 主要结论 | 第35页 |
| 展望 | 第35-36页 |
| 致谢 | 第36-37页 |
| 参考文献 | 第37-41页 |
| 附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第41页 |
