| 缩略词(Abbreviations) | 第11-14页 |
| 摘要 | 第14-17页 |
| Abstract | 第17-20页 |
| 引言 | 第21-24页 |
| 第一部分 文献综述 | 第24-124页 |
| 第一章 神经细胞调亡及其相关神经变性疾病的研究现状 | 第25-43页 |
| 1 细胞凋亡的形态学特征 | 第25-26页 |
| 2 细胞凋亡的分子机制 | 第26-27页 |
| 3 细胞凋亡的生物学意义 | 第27-29页 |
| 4 细胞凋亡的检测方法 | 第29-30页 |
| 4.1 显微镜技术 | 第29页 |
| 4.2 TUNEL染色法 | 第29-30页 |
| 4.3 Hoechst和DAPI染色法 | 第30页 |
| 4.4 流式细胞分析法 | 第30页 |
| 4.5 Western Blotting检测 | 第30页 |
| 5 细胞凋亡与神经变性疾病的关系 | 第30-32页 |
| 6 小结 | 第32页 |
| 参考文献 | 第32-43页 |
| 第二章 神经变性疾病体内体外模型研究进展 | 第43-70页 |
| 1 帕金森病模型诱导剂概述 | 第43-46页 |
| 1.1 MPTP/MPP~+ | 第43-44页 |
| 1.2 6-OHDA | 第44-45页 |
| 1.3 鱼藤酮(Rotenone) | 第45-46页 |
| 2 体内、体外帕金森模型的建立 | 第46-49页 |
| 2.1 6-OHDA诱导的帕金森病模型 | 第47-48页 |
| 2.2 鱼藤酮诱导的帕金森病模型 | 第48页 |
| 2.3 MPTP/MPP~+诱导的帕金森病模型 | 第48-49页 |
| 2.4 基因编辑技术产生PD动物模型 | 第49页 |
| 3 阿尔茨海默病模型诱导剂概述 | 第49-51页 |
| 3.1 OKA | 第50页 |
| 3.2 Wortmannin | 第50页 |
| 3.3 Isoprenaline | 第50页 |
| 3.4 Haloperidol | 第50-51页 |
| 3.5 Colchicine | 第51页 |
| 4 经典的阿尔茨海默模型建立 | 第51-53页 |
| 5 其他神经变性疾病模型的建立 | 第53-54页 |
| 6 小结 | 第54页 |
| 参考文献 | 第54-70页 |
| 第三章 神经细胞ROS、Ca~(2+)/CaMKⅡ-mTOR信号转导与凋亡/变性发生的关系 | 第70-88页 |
| 0 ROS调控机制及其稳态 | 第70-72页 |
| 1 神经细胞ROS与凋亡/变性的关系 | 第72-76页 |
| 1.1 神经细胞ROS与凋亡/变性同线粒体的关系 | 第72页 |
| 1.2 神经细胞ROS与凋亡/变性关联细胞毒性分子 | 第72-74页 |
| 1.3 神经细胞ROS与凋亡/变性关联调控蛋白Bcl-2 | 第74-76页 |
| 2 Ca~(2+)/CaMKⅡmTOR的分子结构 | 第76页 |
| 2.1 Ca~(2+)/CaMKⅡ的分子结构 | 第76页 |
| 2.2 mTOR的分子结构 | 第76页 |
| 3 Ca~(2+)/CaMKⅡ-mTOR信号转导网络 | 第76-77页 |
| 4 Ca~(2+)/CaMKⅡ-mTOR信号转导与凋亡/变性的关系 | 第77-78页 |
| 5 小结 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-88页 |
| 第四章 神经细胞Akt/AMPK-mTOR信号通路作用及与凋亡/变性发生的关系 | 第88-98页 |
| 1 Akt的分子结构 | 第88页 |
| 2 AMPK的分子结构 | 第88-89页 |
| 3 Akt/AMPK-mTOR信号通路 | 第89页 |
| 4 神经细胞Akt/AMPK-mTOR信号通路与凋亡/变性的关系 | 第89-92页 |
| 4.1 神经细胞Akt-mTOR信号与凋亡/变性 | 第91页 |
| 4.2 神经细胞AMPK-mTOR信号与凋亡/变性 | 第91-92页 |
| 5 小结 | 第92-93页 |
| 参考文献 | 第93-98页 |
| 第五章 神经细胞PP2A/PP5-MAPK信号转导及与凋亡/变性的关系 | 第98-107页 |
| 1 PP2A的分子结构 | 第98页 |
| 2 PP5的分子结构 | 第98-99页 |
| 3 MAPK的分子结构 | 第99页 |
| 4 神经细胞PP2A-MAPK信号与凋亡/变性 | 第99-100页 |
| 5 神经细胞PP5-MAPK信号与凋亡/变性 | 第100-101页 |
| 6 小结 | 第101-102页 |
| 参考文献 | 第102-107页 |
| 第六章 神经细胞自噬与凋亡关系在神经变性疾病发生中的作用 | 第107-124页 |
| 1 细胞自噬的概念和过程 | 第107-110页 |
| 1.1 细胞自噬的概念 | 第107-108页 |
| 1.2 细胞自噬的过程 | 第108-110页 |
| 2 神经细胞自噬与凋亡的关系 | 第110-112页 |
| 3 神经细胞的自噬和凋亡与帕金森病的关系 | 第112-113页 |
| 4 神经细胞的自噬和凋亡与阿尔兹海默病的关系 | 第113-114页 |
| 5 神经细胞的自噬和凋亡与亨廷顿舞蹈病的关系 | 第114页 |
| 6 神经细胞的自噬和凋亡与肌萎缩侧索硬化的关系 | 第114-115页 |
| 7 小结 | 第115页 |
| 参考文献 | 第115-124页 |
| 第二部分 实验研究 | 第124-237页 |
| 第七章 动物PD模型大脑SNC和海马回神经元凋亡与Akt/AMPK/mTOR活性关系研究 | 第125-136页 |
| 1 材料和方法 | 第126-128页 |
| 1.1 主要试剂及药品 | 第126页 |
| 1.2 实验动物来源及造模 | 第126页 |
| 1.3 样品采集和处理 | 第126-127页 |
| 1.4 脑切片免疫组化分析 | 第127页 |
| 1.5 免疫印迹(Western blot)分析 | 第127-128页 |
| 1.6 数据分析 | 第128页 |
| 2 结果 | 第128-131页 |
| 2.1 MPTP诱导小鼠大脑SNc区的TH~+细胞数目减少 | 第128-129页 |
| 2.2 MPTP诱导小鼠大脑SNc区神经元凋亡 | 第129-130页 |
| 2.3 鱼藤酮诱导大鼠大脑脑SNc及海马回神经元凋亡 | 第130页 |
| 2.4 鱼藤酮诱导大鼠纹状体AMPK/Akt/mTOR信号通路异常涉及凋亡 | 第130-131页 |
| 3 讨论 | 第131-132页 |
| 参考文献 | 第132-136页 |
| 第八章 神经细胞PD模型Ca~(2+)/CaMKⅡ转导与线粒体H_2O_2交互作用抑制mTOR通路导致凋亡发生研究 | 第136-160页 |
| 1 材料及方法 | 第137-141页 |
| 1.1 主要药品及试剂 | 第137-138页 |
| 1.2 PC12细胞系及原代小鼠皮质神经元培养 | 第138页 |
| 1.3 重组腺病毒的构建及感染 | 第138-139页 |
| 1.4 慢病毒shRNA克隆,扩增和感染 | 第139页 |
| 1.5 细胞活性分析 | 第139页 |
| 1.6 DAPI和TUNEL染色 | 第139页 |
| 1.7 细胞H_2O_2成像 | 第139-140页 |
| 1.8 细胞[Ca~(2+)]_i成像 | 第140页 |
| 1.9 免疫印迹(Western blot)分析 | 第140页 |
| 1.10 统计分析 | 第140-141页 |
| 2 结果 | 第141-151页 |
| 2.1 鱼藤酮诱导神经细胞凋亡关联[Ca~(2+)]_i升高 | 第141-142页 |
| 2.2 鱼藤酮通过Ca~(2+)介导mTOR通路抑制引发神经细胞凋亡 | 第142-144页 |
| 2.3 鱼藤酮诱导神经细胞Ca~(2+)依赖的CaMKⅡ磷酸化介导mTOR通路抑制和凋亡 | 第144-146页 |
| 2.4 鱼藤酮引发Ca~(2+)-CaMKⅡ依赖性地诱导神经细胞H_2O_2过量产生 | 第146页 |
| 2.5 鱼藤酮诱导线粒体H_2O_2依赖性的[Ca~(2+)]_i升高激活CaMKⅡ致mTOR抑制及神经细胞凋亡 | 第146-148页 |
| 2.6 过表达mTOR、持续激活S6K1和下调4E-BP1表达降低鱼藤酮诱导[Ca~(2+)]_i升高介导CaMKⅡ磷酸化和神经细胞凋亡 | 第148-151页 |
| 3 讨论 | 第151-153页 |
| 参考文献 | 第153-160页 |
| 第九章 神经细胞PD模型自噬抑制涉及不依赖mTOR通路的AMPK激活机制 | 第160-175页 |
| 1 材料及方法 | 第161-162页 |
| 1.1 主要药品及试剂 | 第161页 |
| 1.2 PC12细胞系及原代小鼠皮质神经元培养 | 第161页 |
| 1.3 腺病毒的构建与感染细胞 | 第161页 |
| 1.4 细胞免疫荧光染色 | 第161-162页 |
| 1.5 MDC染色 | 第162页 |
| 1.6 GFP-LC3分析 | 第162页 |
| 1.7 免疫印迹(Western blot)分析 | 第162页 |
| 1.8 统计分析 | 第162页 |
| 2 结果 | 第162-169页 |
| 2.1 PD细胞模型中α-Synuclein增加和自噬抑制 | 第162-164页 |
| 2.2 PD细胞模型中AMPK激活关联mTOR信号通路和自噬抑制 | 第164-169页 |
| 3 讨论 | 第169-170页 |
| 参考文献 | 第170-175页 |
| 第十章 神经细胞PD模型中阻断的Ulk1-Beclin 1及Atg5-Atg12途径抑制自噬分子机理研究 | 第175-190页 |
| 1 材料及方法 | 第176-177页 |
| 1.1 主要药品及试剂 | 第176页 |
| 1.2 PC12细胞系及原代小鼠皮质神经元培养 | 第176页 |
| 1.3 构建Ulk1敲除的PC12细胞 | 第176-177页 |
| 1.4 mCherry-GFP-LC3分析 | 第177页 |
| 1.5 免疫印迹(Western blot)和Co-IP分析 | 第177页 |
| 1.6 统计分析 | 第177页 |
| 2 结果 | 第177-181页 |
| 2.1 PD细胞模型中Ulk1和Beclin 1活性抑制 | 第177-179页 |
| 2.2 PD细胞模型中Beclin 1释放/活化受阻 | 第179-180页 |
| 2.3 敲除Ulk1强化PD毒物引发的神经细胞Beclin 1活化受阻 | 第180-181页 |
| 2.4 PD细胞模型中Atg5-Atg12复合物形成受阻关联自噬抑制 | 第181页 |
| 3 讨论 | 第181-184页 |
| 参考文献 | 第184-190页 |
| 第十一章 白藜芦醇保护抗镉诱导神经细胞凋亡实验研究 | 第190-200页 |
| 1 材料及方法 | 第190-191页 |
| 1.1 主要药品和试剂 | 第190-191页 |
| 1.2 PC12细胞系及原代小鼠皮质神经元培养 | 第191页 |
| 1.3 细胞形态学观察和活性分析 | 第191页 |
| 1.4 DAPI和TUNEL染色 | 第191页 |
| 1.5 免疫印迹(Western blot)分析 | 第191页 |
| 1.6 统计分析 | 第191页 |
| 2 结果 | 第191-194页 |
| 2.1 白藜芦醇削弱镉诱导神经细胞活性下降和形态学变化 | 第191-193页 |
| 2.2 白藜芦醇抵抗镉诱导神经细胞凋亡 | 第193-194页 |
| 3 讨论 | 第194-195页 |
| 参考文献 | 第195-200页 |
| 第十二章 白藜芦醇通过抑制mTORC1和mTORC2信号通路抗镉诱导神经细胞凋亡分子机理研究 | 第200-218页 |
| 1 材料及方法 | 第201-203页 |
| 1.1 主要药品和试剂 | 第201页 |
| 1.2 实验动物 | 第201-202页 |
| 1.3 PC12细胞系及原代小鼠皮质神经元培养 | 第202页 |
| 1.4 重组腺病毒的构建和细胞感染 | 第202页 |
| 1.5 慢病毒shRNA设计,构建和感染 | 第202页 |
| 1.6 细胞活性分析 | 第202页 |
| 1.7 TUNEL染色 | 第202-203页 |
| 1.8 免疫印迹(Western blot)分析 | 第203页 |
| 1.9 统计分析 | 第203页 |
| 2 结果 | 第203-210页 |
| 2.1 下调mTOR增强白藜芦醇抑制镉诱导神经细胞凋亡 | 第203页 |
| 2.2 mTORC1和mTORC2通路涉及白藜芦醇抗镉神经毒性发挥保护作用 | 第203-207页 |
| 2.3 白藜芦醇通过靶向mTORC1介导S6K1途径抗镉诱导神经细胞凋亡 | 第207页 |
| 2.4 白藜芦醇通过靶向mTORC1介导4E-BP1途径抗镉诱导神经细胞凋亡 | 第207-208页 |
| 2.5 白藜芦醇通过靶向mTORC2介导Akt途径抗镉诱导神经细胞凋亡 | 第208-210页 |
| 3 讨论 | 第210-212页 |
| 参考文献 | 第212-218页 |
| 第十三章 白藜芦醇通过PP2A和PP5抑制镉激活Erk1/2和JNK通路抗神经细胞凋亡分子机理研究 | 第218-237页 |
| 1 材料及方法 | 第219-220页 |
| 1.1 主要药品和试剂 | 第219页 |
| 1.2 PC12细胞系及原代小鼠皮质神经元培养 | 第219-220页 |
| 1.3 重组腺病毒的构建和感染 | 第220页 |
| 1.4 台盼蓝染色活细胞分析 | 第220页 |
| 1.5 DAPI染色 | 第220页 |
| 1.6 免疫印迹(Western blot)分析 | 第220页 |
| 1.7 统计分析 | 第220页 |
| 2 结果 | 第220-227页 |
| 2.1 白藜芦醇通过阻滞镉激活JNK和Erk1/2通路抗神经细胞凋亡 | 第220-223页 |
| 2.2 钝化c-Jun或MKK1表达增强白藜芦醇抗镉诱导神经细胞凋亡 | 第223-224页 |
| 2.3 白藜芦醇营救Cd抑制的神经细胞PP2A和PP5活性 | 第224-225页 |
| 2.4 过表达PP2A提高白藜芦醇抑制镉诱导JNK、Erk1/2和p38激活和神经细胞凋亡 | 第225-226页 |
| 2.5 过表达PP5增强Res抑制Cd诱导JNK,Erk1/2活化及抗神经细胞凋亡 | 第226-227页 |
| 3 讨论 | 第227-229页 |
| 参考文献 | 第229-237页 |
| 第三部分 全文结论 | 第237-239页 |
| 全文结论 | 第238-239页 |
| 附1 攻读博士学位期间研究成果及获奖情况 | 第239-246页 |
| 致谢 | 第246-247页 |
