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拟南芥蛋白磷酸酶TOPP4调控扁平细胞的形态建成

中文摘要第3-4页
Abstract第4-5页
缩略词表第6-10页
第一部分 文献综述第10-26页
    1.1 拟南芥叶扁平细胞发育及其研究进展第10-17页
        1.1.1 拟南芥表皮细胞发育过程第10-11页
        1.1.2 拟南芥叶扁平细胞发育调控基因及分子机理第11-12页
        1.1.3 拟南芥细胞骨架调控扁平细胞的研究进展第12-14页
        1.1.4 ROP GTPase信号网络调控拟南芥扁平细胞形态建成第14-17页
    1.2 生长素调控叶扁平细胞形态建成的研究进展第17-22页
        1.2.1 生长素极性运输的研究进展第17-18页
        1.2.2 蛋白磷酸化和去磷酸化调控生长素极性运输的研究进展第18-19页
        1.2.3 胞吞回收调控PIN1蛋白的极性分布第19-20页
        1.2.4 生长素通过TMK和ABPl复合体调控ROP信号途径第20-21页
        1.2.5 ROP信号途径通过胞吞回收来调控PIN1蛋白的极性分布第21-22页
    1.3 蛋白磷酸酶PP1研究进展第22-24页
    1.4 本论文的研究意义第24-26页
第二部分 实验材料及方法第26-37页
    2.1 实验材料第26页
        2.1.1 拟南芥材料第26页
        2.1.2 载体和菌株第26页
    2.2 实验仪器和试剂第26-27页
        2.2.1 实验仪器菌第26页
        2.2.2 实验相关酶、试剂和试剂盒第26-27页
    2.3 实验方法第27-37页
        2.3.1 拟南芥植株种植培养第27-28页
        2.3.2 突变体扁平形态分析第28页
        2.3.3 拟南芥基因组DNA的提取第28-29页
        2.3.4 生长素对topp4-1突变体扁平细胞发育的影响第29页
        2.3.5 总RNA的提取及Real-time RT-PCR定量分析第29页
        2.3.6 带HIS标签的PIN1蛋白质的纯化第29页
        2.3.7 带GST标签的蛋白质的纯化第29-30页
        2.3.8 酵母双杂交实验第30-31页
        2.3.9 BiFC实验第31页
        2.3.10 原生质体中游离及外源基因的转化第31-32页
        2.3.11 微丝和微管活体观察及药物处理第32页
        2.3.12 荧光原位杂交实验第32-33页
        2.3.13 基因枪转化外源基因第33页
        2.3.14 ROP2活性测定第33-34页
        2.3.15 体外磷酸化实验第34-35页
        2.3.16 膜蛋白提取和体内磷酸化检测第35-37页
第三部分 结果与分析第37-65页
    3.1 一个新的扁平细胞突变体的筛选和鉴定第37页
    3.2 拟南芥topp4-1突变体叶扁平细胞变小,细胞凸出形成缺失第37-40页
    3.3 TOPP4基因突变对叶扁平细胞发育过程的影响第40-42页
    3.4 在topp4-1突变体中超表达TOPP4基因可以恢复其突变表型第42-44页
    3.5 在野生型中超表达TOPP4能促进扁平细胞凸出的形成和伸展第44页
    3.6 在野生型中用artifcial microRNA技术降低TOPP4基因的表达可引起扁平细胞形态缺陷表型第44-46页
    3.7 突变topp4-1蛋白对植株生长有显性负效应,外源施加PP1的抑制剂抑制扁平细胞的凸出的形成第46-48页
    3.8 外源性生长素不能恢复topp4-1扁平细胞形态缺陷第48-50页
    3.9 TOPP4参与到PIN1介导的扁平细胞通路第50-52页
    3.10 TOPP4与PID拮抗调控了扁平细胞形态建成第52-54页
    3.11 TOPP4与PIN1蛋白在体外、体内均有相互作用第54-55页
    3.12 TOPP4能将磷酸化的PIN1去磷酸化第55-57页
    3.13 topp4-1突变体中PIN1在极性定位改变第57-59页
    3.14 TOPP4可能参与到PIN1囊泡运输第59-60页
    3.15 TOPP4调控扁平细胞形态建成依赖于ROP-RIC介导的信号通路第60-62页
    3.16 TOPP4调控扁平细胞形态建成依赖于ROP-RIC介导的细胞骨架第62-64页
    3.17 TOPP4通过调控微管的稳定性和微丝的聚合来调控细胞骨架的分布第64-65页
第四部分 讨论与展望第65-69页
    4.1 突变topp4-1蛋白对扁平细胞形态建成有显性负效应第65-66页
    4.2 TOPP4通过对PIN1的去磷酸化来调控PIN1的极性分布和囊泡运输第66页
    4.3 TOPP4通过ROP信号通路调控微丝骨架第66-67页
    4.4 TOPP4介导的PIN1去磷酸化调控扁平细胞的形态建成第67页
    4.5 展望第67-69页
参考文献第69-77页
在学期间的研究成果第77-78页
致谢第78页

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