摘要 | 第5-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
第一章 文献综述 | 第10-19页 |
1.1 MHC概述 | 第10页 |
1.2 MHC Ⅰ类分子结构 | 第10-11页 |
1.3 功能 | 第11-12页 |
1.4 MHC基因的多态性 | 第12页 |
1.4.1 MHCI类分子的多肽结合区呈多态性 | 第12页 |
1.4.2 MHC分子在种间、个体间呈多态性 | 第12页 |
1.5 MHC基因多态性研究的应用 | 第12-14页 |
1.5.1 MHC与疾病的抗性 | 第13页 |
1.5.2 家禽MHC与抗病育种 | 第13页 |
1.5.3 在系统进化中的应用 | 第13-14页 |
1.5.4 在种群保护方面的作用 | 第14页 |
1.6 MHC多态性研究方法 | 第14-15页 |
1.6.1 RSCA参比链介导的构象分析 | 第14页 |
1.6.2 PCR-SSCP单链构象多态性 | 第14-15页 |
1.6.3 不分位点直接测序 | 第15页 |
1.7 PCR-SSCP简述 | 第15-16页 |
1.7.1 PCR - SSCP的基本原理 | 第15页 |
1.7.2 PCR - SSCP技术优缺点 | 第15-16页 |
1.8 PCR-SSCP用于MHC Ⅰ基因多态性分析 | 第16-17页 |
1.9 本研究的目的和意义 | 第17-19页 |
第二章 试验材料与方法 | 第19-36页 |
2.1 试验材料与仪器 | 第19-22页 |
2.1.1 试验动物样本 | 第19页 |
2.1.2 试剂 | 第19页 |
2.1.3 部分主要试剂的配制 | 第19-22页 |
2.1.4 试验仪器 | 第22页 |
2.2 试验方法 | 第22-36页 |
2.2.1 绿头鸭全血采集 | 第22页 |
2.2.2 绿头鸭基因组DNA的提取 | 第22-23页 |
2.2.3 脏器总RNA提取 | 第23-24页 |
2.2.4 基因组DNA的检测 | 第24页 |
2.2.5.电泳检测RNA样品 | 第24-25页 |
2.2.6 大肠杆菌感受态细胞的Cacl2法制备及质粒转化 | 第25-26页 |
2.2.7 MHC Ⅰ类基因扩增 | 第26-29页 |
2.2.8 RACE获取cDNA全长 | 第29-32页 |
2.2.9 PCR产物连接,克隆测序 | 第32-33页 |
2.2.10 全长cDNA序列获取 | 第33页 |
2.2.11 MHC Ⅰ类外显子2和外显子3表达位点群体PCR-SSCP | 第33页 |
2.2.12 巢氏PCR | 第33页 |
2.2.13 PCR-SSCP检测 | 第33-34页 |
2.2.14 等位基因的确定 | 第34-35页 |
2.2.15 群体MHC基因多态性分析方法及软件 | 第35-36页 |
第三章 试验结果 | 第36-55页 |
3.1 绿头鸭基因组DNA的提取 | 第36页 |
3.2 组织样品RNA的提取结果 | 第36-37页 |
3.3 验证基因是否编码 | 第37-38页 |
3.4 3’RACE和 5’RACE结果 | 第38-39页 |
3.5 RACE回收产物做克隆检测结果 | 第39-40页 |
3.6 绿头鸭MHC Ⅰ全长序列分析 | 第40-42页 |
3.7 群体PCR-SSCP结果 | 第42-46页 |
3.7.1 PCR结果获取分析 | 第42-43页 |
3.7.2 个体SSCP结果分析 | 第43-44页 |
3.7.3 群体SSCP结果分析 | 第44-46页 |
3.8 获取MHC-I等位基因多态性分析 | 第46-55页 |
3.8.1 MHC-I外显子2等位基因核酸序列多态性分析 | 第46-47页 |
3.8.2 MHC-I外显子2等位基因氨基酸序列多态性分析 | 第47-49页 |
3.8.3 MHC-I外显子2等位基因进化树分析 | 第49页 |
3.8.4 MHC-I外显子2位点遗传学分析 | 第49-50页 |
3.8.5 MHC-I外显子3等位基因核酸序列多态性分析 | 第50-51页 |
3.8.6 MHC-I外显子3等位基因氨基酸序列多态性分析 | 第51-53页 |
3.8.7 MHC-I外显子3等位基因进化树学分析 | 第53页 |
3.8.8 MHC-I外显子3位点遗传学分析 | 第53-55页 |
第四章 讨论 | 第55-57页 |
4.1 PCR - SSCP技术之于本研究的效果讨论 | 第55页 |
4.2 绿头鸭与其他物种间的氨基酸序列聚类分析 | 第55页 |
4.3 MHC Ⅰ类基因遗传多态性分析 | 第55-56页 |
4.4 绿头鸭MHC Ⅰ基因的遗传群体学分析 | 第56-57页 |
第五章 结论 | 第57-58页 |
展望 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-70页 |
个人简介 | 第70-71页 |
致谢 | 第71-72页 |