| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 1 文献综述 | 第9-14页 |
| 1.1 稻瘟病菌细胞壁发育机制 | 第9-10页 |
| 1.1.1 稻瘟病菌的侵染过程 | 第9页 |
| 1.1.2 稻瘟病菌的细胞壁发育机制 | 第9页 |
| 1.1.3 稻瘟病菌调控细胞壁发育的相关基因研究现状 | 第9-10页 |
| 1.2 稻瘟病菌识别寄主的分子机制 | 第10-11页 |
| 1.2.1 稻瘟病菌识别寄主表面信号的机制 | 第10-11页 |
| 1.2.2 稻瘟病菌在寄主表面附着的机制 | 第11页 |
| 1.3 PKC信号通路调控真核生物生长发育的机制 | 第11-14页 |
| 1.3.1 丝状真菌PKC的研究进展 | 第11-12页 |
| 1.3.2 PKC受体RACK1的研究现状 | 第12-14页 |
| 2 引言 | 第14-15页 |
| 3 材料与方法 | 第15-25页 |
| 3.1 供试菌株 | 第15页 |
| 3.2 供试培养基 | 第15页 |
| 3.3 供试菌株培养条件 | 第15-16页 |
| 3.3.1 稻瘟菌菌株培养条件 | 第15页 |
| 3.3.2 大肠杆菌菌株培养条件 | 第15页 |
| 3.3.3 酵母菌株培养条件 | 第15页 |
| 3.3.4 农杆菌菌株的培养 | 第15-16页 |
| 3.4 酵母转化及酵母质粒的提取 | 第16页 |
| 3.4.1 酵母转化 | 第16页 |
| 3.4.2 酵母质粒的提取 | 第16页 |
| 3.5 稻瘟病菌的核酸提取及反转录 | 第16-17页 |
| 3.5.1 基因组DNA的提取 | 第16-17页 |
| 3.5.2 总RNA的提取 | 第17页 |
| 3.5.3 RNA的反转录 | 第17页 |
| 3.6 Southern杂交 | 第17-18页 |
| 3.6.1 探针的制备 | 第17页 |
| 3.6.2 酶切及电泳 | 第17-18页 |
| 3.6.3 转膜 | 第18页 |
| 3.6.4 交联及杂交 | 第18页 |
| 3.6.5 洗膜显色 | 第18页 |
| 3.7 MGG_04719 氨基酸序列的获得及分析 | 第18-19页 |
| 3.8 MGG_04719 的酵母回补试验 | 第19页 |
| 3.9 Morak1在不同发育阶段的转录水平 | 第19页 |
| 3.10 Morak1敲除载体的构建及突变体鉴定 | 第19-21页 |
| 3.10.1 Morak1敲除载体的构建 | 第19-20页 |
| 3.10.2 原生质体的制备 | 第20页 |
| 3.10.3 原生质体转化 | 第20页 |
| 3.10.4 Morak1缺失突变体的鉴定 | 第20-21页 |
| 3.10.4.1 PCR筛选 | 第20页 |
| 3.10.4.2 RT-PCR验证 | 第20页 |
| 3.10.4.3 Southern杂交验证 | 第20-21页 |
| 3.11 Morak1的基因回补及农杆菌介导的稻瘟病菌转化 | 第21页 |
| 3.11.1 Morak1突变体的回补载体构建 | 第21页 |
| 3.11.2 农杆菌介导的稻瘟病菌转化 | 第21页 |
| 3.12 Morak1的亚细胞定位 | 第21页 |
| 3.13 通过酵母双杂交验证Morak1是否作为一类Gβ亚基 | 第21-22页 |
| 3.14 Morak1突变体的生物学表型分析 | 第22-23页 |
| 3.14.1 Morak1突变体在不同培养基上的生长速率及干重测定 | 第22页 |
| 3.14.2 Morak1突变体对几种胁迫因子的敏感性测定 | 第22页 |
| 3.14.3 Morak1突变体的产孢量及孢子形态观察 | 第22页 |
| 3.14.4 Morak1突变体的孢子萌发率及附着胞形成率测定 | 第22页 |
| 3.14.5 Morak1突变体的膨压测定 | 第22页 |
| 3.14.6 Morak1突变体原生质体释放实验 | 第22-23页 |
| 3.14.7 Morak1突变体的附着能力测定 | 第23页 |
| 3.14.8 Morak1突变体的有性生殖实验 | 第23页 |
| 3.15 Morak1突变体的致病性分析 | 第23-24页 |
| 3.15.1 Morak1突变体对水稻及大麦的致病性测定 | 第23页 |
| 3.15.2 Morak1突变体的大麦侵染测定 | 第23页 |
| 3.15.3 Morak1突变体的创伤离体致病性测定 | 第23页 |
| 3.15.4 Morak1突变体的侵染生物量积累测定 | 第23-24页 |
| 3.15.5 Morak1突变体的DAB染色 | 第24页 |
| 3.16 数据分析方法 | 第24-25页 |
| 4 结果与分析 | 第25-42页 |
| 4.1 MGG_04719 的生物信息学分析 | 第25-26页 |
| 4.2 MGG_04719 部分恢复酵母Asc1突变体对高温的敏感性 | 第26-27页 |
| 4.3 Morak1在分生孢子及侵染初期上调表达 | 第27-28页 |
| 4.4 Morak1不与Gα亚基互作 | 第28页 |
| 4.5 Morak1基因敲除及突变体获得 | 第28-30页 |
| 4.6 Morak1基因缺失影响菌丝生长 | 第30-31页 |
| 4.7 Morak1调控稻瘟病菌分生孢子发育 | 第31-33页 |
| 4.8 Morak1基因缺失影响孢子萌发和附着胞形成 | 第33-34页 |
| 4.9 Morak1突变体致病性降低 | 第34-35页 |
| 4.10 Morak1调控稻瘟病菌的附着能力 | 第35-36页 |
| 4.11 Morak1调控稻瘟病菌的细胞壁发育 | 第36-37页 |
| 4.12 Morak1基因缺失影响稻瘟病菌的侵染 | 第37-39页 |
| 4.13 Morak1调控稻瘟病菌对氧化胁迫的应答 | 第39-41页 |
| 4.14 Morak1的亚细胞定位 | 第41-42页 |
| 5 小结与讨论 | 第42-45页 |
| 参考文献 | 第45-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 附录 | 第52-53页 |
| 作者简介 | 第53页 |
