| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 第一章 绪论 | 第18-30页 |
| 1.1 引言 | 第18-28页 |
| 1.1.1 研究背景 | 第18页 |
| 1.1.2 国内外研究现状及评述 | 第18-28页 |
| 1.2 研究目标和主要研究内容 | 第28-29页 |
| 1.2.1 关键的科学问题与研究目标 | 第28页 |
| 1.2.2 主要研究内容 | 第28-29页 |
| 1.2.3 项目来源与经费支持 | 第29页 |
| 1.3 研究的技术路线 | 第29-30页 |
| 第二章 长春越冬白蜡虫转录组分析 | 第30-42页 |
| 2.1 材料和方法 | 第30-32页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第30-31页 |
| 2.1.2 实验方法 | 第31-32页 |
| 2.2 结果与分析 | 第32-39页 |
| 2.2.1 测序结果和de novo组装 | 第32-34页 |
| 2.2.2 基因功能注释 | 第34-35页 |
| 2.2.3 GO分类和KEGG代谢通路分析 | 第35-38页 |
| 2.2.4 可能与低温胁迫相关的转录本 | 第38-39页 |
| 2.3 讨论 | 第39-41页 |
| 2.3.1 信号通路 | 第39页 |
| 2.3.2 细胞膜的流动性 | 第39页 |
| 2.3.3 其它抗冻相关基因 | 第39-40页 |
| 2.3.4 糖代谢 | 第40页 |
| 2.3.5 抗冻蛋白 | 第40-41页 |
| 2.4 小结 | 第41-42页 |
| 第三章 长春越冬白蜡虫蛋白组分析 | 第42-53页 |
| 3.1 材料和方法 | 第42-45页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第42-43页 |
| 3.1.2 实验方法 | 第43-45页 |
| 3.2 结果与分析 | 第45-51页 |
| 3.2.1 蛋白提取 | 第45-46页 |
| 3.2.2 肽段匹配误差和电荷分布 | 第46-47页 |
| 3.2.3 鉴定肽段和图谱个数分布 | 第47页 |
| 3.2.4 蛋白鉴定覆盖度分布及参考数据库建设 | 第47-48页 |
| 3.2.5 GO注释 | 第48-49页 |
| 3.2.6 COG注释 | 第49-50页 |
| 3.2.7 Pathway代谢通路注释 | 第50-51页 |
| 3.2.8 抗冻蛋白预测 | 第51页 |
| 3.3 讨论 | 第51-52页 |
| 3.4 小结 | 第52-53页 |
| 第四章 长春越冬白蜡虫和昆明越冬前白蜡虫差异表达基因分析 | 第53-66页 |
| 4.1 材料和方法 | 第53-56页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第53-54页 |
| 4.1.2 实验方法 | 第54-56页 |
| 4.2 结果与分析 | 第56-62页 |
| 4.2.1 数据基本分析 | 第56-58页 |
| 4.2.2 差异基因分析 | 第58页 |
| 4.2.3 差异基因GO富集分析 | 第58-60页 |
| 4.2.4 差异基因KEGG富集分析 | 第60-62页 |
| 4.2.5 差异基因验证 | 第62页 |
| 4.3 讨论 | 第62-65页 |
| 4.3.1 糖代谢 | 第63页 |
| 4.3.2 精氨酸和脯氨酸代谢 | 第63-64页 |
| 4.3.3 热应激蛋白 70 | 第64-65页 |
| 4.3.4 与抗冻相关的代谢 | 第65页 |
| 4.4 小结 | 第65-66页 |
| 第五章 白蜡虫afp候选基因周年表达动态分析 | 第66-82页 |
| 5.1 材料和方法 | 第66-69页 |
| 5.1.1 实验材料 | 第66-67页 |
| 5.1.2 实验方法 | 第67-69页 |
| 5.2 结果与分析 | 第69-80页 |
| 5.2.1 基因表达模式分析 | 第69-71页 |
| 5.2.2 周年表达动态分析 | 第71-80页 |
| 5.3 讨论 | 第80-81页 |
| 5.4 小结 | 第81-82页 |
| 第六章 白蜡虫afp基因c DNA克隆及序列分析 | 第82-91页 |
| 6.1 材料和方法 | 第82-86页 |
| 6.1.1 实验材料 | 第82页 |
| 6.1.2 实验方法 | 第82-86页 |
| 6.2 结果与分析 | 第86-89页 |
| 6.2.1 基因克隆 | 第86页 |
| 6.2.2 序列分析 | 第86-88页 |
| 6.2.3 高级结构 | 第88页 |
| 6.2.4 聚类分析 | 第88-89页 |
| 6.3 讨论 | 第89-90页 |
| 6.4 小结 | 第90-91页 |
| 第七章p-afp基因原核表达及热滞活性验证 | 第91-100页 |
| 7.1 材料和方法 | 第91-94页 |
| 7.1.1 实验材料 | 第91-92页 |
| 7.1.2 实验方法 | 第92-94页 |
| 7.2 结果与分析 | 第94-98页 |
| 7.2.1 蛋白表达分析 | 第94-95页 |
| 7.2.2 蛋白纯化分析 | 第95-96页 |
| 7.2.3 Western Blot结果分析 | 第96-97页 |
| 7.2.4 热滞活性测定 | 第97-98页 |
| 7.3 讨论 | 第98-99页 |
| 7.3.1 原核表达 | 第98页 |
| 7.3.2 热滞活性 | 第98-99页 |
| 7.4 小结 | 第99-100页 |
| 第八章 白蜡虫afp基因转化烟草的研究 | 第100-110页 |
| 8.1 材料和方法 | 第100-104页 |
| 8.1.1 实验材料 | 第100-101页 |
| 8.1.2 实验方法 | 第101-104页 |
| 8.2 结果与分析 | 第104-108页 |
| 8.2.1 表达载体构建 | 第104-106页 |
| 8.2.2 转农杆菌LBA4404感受态细胞 | 第106页 |
| 8.2.3 转基因烟草 | 第106-107页 |
| 8.2.4 转基因烟草检测 | 第107-108页 |
| 8.2.5 过冷却点测定 | 第108页 |
| 8.3 讨论 | 第108-109页 |
| 8.4 小结 | 第109-110页 |
| 第九章 讨论与结论 | 第110-114页 |
| 9.1 讨论 | 第110-112页 |
| 9.1.1 白蜡虫低温适应的分子机制 | 第110-111页 |
| 9.1.2 白蜡虫afp基因挖掘 | 第111-112页 |
| 9.1.3 白蜡虫AFP功能研究 | 第112页 |
| 9.2 结论 | 第112-113页 |
| 9.3 创新点 | 第113-114页 |
| 参考文献 | 第114-128页 |
| 附录 | 第128-133页 |
| 在读期间的学术研究 | 第133-134页 |
| 致谢 | 第134页 |