| 符号说明 | 第5-9页 |
| 中文摘要 | 第9-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第12-28页 |
| 1.1 双生病毒的概况 | 第12-14页 |
| 1.1.1 双生病毒的基因组结构 | 第12-14页 |
| 1.1.2 双生病毒的分类 | 第14页 |
| 1.2 双生病毒的侵染过程 | 第14-18页 |
| 1.2.1 双生病毒的复制 | 第14-15页 |
| 1.2.2 双生病毒的转录 | 第15页 |
| 1.2.3 双生病毒的移动 | 第15-18页 |
| 1.3 番茄黄化曲叶病毒 | 第18-25页 |
| 1.3.1 番茄黄化曲叶病毒分类及特征 | 第18页 |
| 1.3.2 TYLCV的传播媒介及方式 | 第18-19页 |
| 1.3.3 番茄黄化曲叶病毒病的发生情况 | 第19-21页 |
| 1.3.4 田间寄主范围 | 第21页 |
| 1.3.5 TYLCV病害的生物学特性 | 第21-22页 |
| 1.3.6 TYLCV的检测 | 第22-24页 |
| 1.3.7 不同检测方法的比较 | 第24页 |
| 1.3.8 与双生病毒伴随的卫星DNAp的研究进展 | 第24-25页 |
| 1.4 TYLCV的防治 | 第25-26页 |
| 1.5 本研究的目的与意义 | 第26-28页 |
| 2 材料与方法 | 第28-41页 |
| 2.1 实验材料 | 第28-30页 |
| 2.1.1 病毒样品的采集 | 第28页 |
| 2.1.2 菌株和载体 | 第28页 |
| 2.1.3 生化及分子生物学试剂 | 第28-29页 |
| 2.1.4 主要实验仪器 | 第29页 |
| 2.1.5 实验所需试剂及配制 | 第29-30页 |
| 2.2 PaLCuCNV、TYLCV及其TYLCVNB的检测与鉴定 | 第30-38页 |
| 2.2.1 植物总DNA提取 | 第30-31页 |
| 2.2.2 引物的合成 | 第31-32页 |
| 2.2.3 PCR扩增 | 第32-34页 |
| 2.2.3.1 外壳蛋白的PCR扩增 | 第32页 |
| 2.2.3.2 全基因组及小分子卫星DNA的PCR扩增 | 第32-33页 |
| 2.2.3.3 PaLCuCNV全基因组DNA的PCR扩增 | 第33页 |
| 2.2.3.4 TYLCV全基因组DNA的PCR扩增 | 第33-34页 |
| 2.2.4 PCR产物的克隆与测序 | 第34-38页 |
| 2.2.4.1 琼脂糖凝胶电泳与DNA片段回收 | 第34-35页 |
| 2.2.4.2 连接载体 | 第35页 |
| 2.2.4.3 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第35-36页 |
| 2.2.4.4 连接产物转化大肠杆菌 | 第36-37页 |
| 2.2.4.5 碱裂解法提取质粒DNA | 第37页 |
| 2.2.4.6 重组质粒鉴定 | 第37-38页 |
| 2.2.4.7 序列分析 | 第38页 |
| 2.3 多重PCR检测技术体系的建立 | 第38-41页 |
| 2.3.1 PCR检测 | 第38-39页 |
| 2.3.2 单一PCR检测及灵敏度研究 | 第39页 |
| 2.3.3 双重PCR检测及灵敏度研究 | 第39-41页 |
| 3 结果与分析 | 第41-56页 |
| 3.1 TYLCV及伴随卫星分子的检测和鉴定 | 第41-44页 |
| 3.1.1 山东省、河南省TYLCV及其伴随卫星检测 | 第41页 |
| 3.1.2 TYLCVNB全序列测定和分析 | 第41-44页 |
| 3.1.2.1 TYLCV与TYLCVNB复合侵染的PCR扩增及序列测定 | 第41-42页 |
| 3.1.2.2 TYLCV伴随TYLCVNB全长序列测定 | 第42页 |
| 3.1.2.3 TYLCV伴随的TYLCVNB与其它DNAp分子的一致率 | 第42-43页 |
| 3.1.2.4 系统进化树分析 | 第43-44页 |
| 3.2 中国番木瓜曲叶病毒病病原的鉴定 | 第44-48页 |
| 3.2.1 PaLCuCNV在河南省发生情况检测 | 第44-45页 |
| 3.2.2 TYLCV与PaLCuCNV的PCR扩增及序列测定 | 第45页 |
| 3.2.3 PaLCuCNV全基因组序列分析 | 第45-48页 |
| 3.3 TYLCV全基因组的扩增 | 第48-53页 |
| 3.3.1 TYLCV在山东省、河南省发生情况检测 | 第48-49页 |
| 3.3.2 山东省、河南省的番茄样品TYLCV全基因组扩增 | 第49-50页 |
| 3.3.3 山东省、河南省的番茄样品TYLCV全基因组序列测定和分析 | 第50-52页 |
| 3.3.4 山东省、河南省的番茄样品TYLCV全基因系统进化树构建 | 第52-53页 |
| 3.4 多重PCR检测PaLCuCNV,TYLCV和TYLCVNB的结果 | 第53-56页 |
| 3.4.1 引物的PCR扩增特异性检测结果 | 第53-54页 |
| 3.4.2 单一PCR检测结果及灵敏度 | 第54页 |
| 3.4.3 双重PCR检测结果及灵敏度 | 第54-55页 |
| 3.4.4 双重PCR的应用 | 第55-56页 |
| 4 讨论 | 第56-59页 |
| 4.1 TYLCV及伴随TYLCVNB的检测和鉴定 | 第56-57页 |
| 4.1.1 山东、河南TYLCV和伴随卫星TYLCVNB检测和分析 | 第56页 |
| 4.1.2 TYLCV全基因序列分析 | 第56-57页 |
| 4.2 PaLCuCNV检测和分析 | 第57页 |
| 4.3 多重PCR检测技术的建立 | 第57-59页 |
| 5 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第67页 |
