| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 第1章 绪论 | 第14-42页 |
| 1.1 辐射生物学 | 第14-19页 |
| 1.1.1 辐射生物学概况 | 第14页 |
| 1.1.2 辐射与生物体作用的原初过程 | 第14-15页 |
| 1.1.3 辐射的生物效应 | 第15-17页 |
| 1.1.4 辐射生物学研究的热点 | 第17-19页 |
| 1.2 辐射诱导的旁效应及其机理 | 第19-24页 |
| 1.2.1 辐射诱导旁效应的研究历史 | 第19-20页 |
| 1.2.2 辐射诱导旁效应的研究体系 | 第20-21页 |
| 1.2.3 辐射诱导旁效应的研究方法 | 第21页 |
| 1.2.4 辐射旁效应研究中的辐照方法 | 第21-22页 |
| 1.2.5 辐射旁效应产生的分子机制 | 第22-24页 |
| 1.3 单粒子微束装置简介 | 第24-27页 |
| 1.3.1 采用单粒子微束进行生物学研究的发展概况 | 第24-25页 |
| 1.3.2 CAS-LIBB单粒子微束装置简介 | 第25-27页 |
| 1.4 秀丽隐杆线虫 | 第27-34页 |
| 1.4.1 秀丽隐杆线虫的研究历史 | 第28-30页 |
| 1.4.2 秀丽隐杆线虫作为模式生物的优点 | 第30-31页 |
| 1.4.3 秀丽隐杆线虫的共享资源 | 第31-33页 |
| 1.4.4 线虫的辐射生物学研究 | 第33-34页 |
| 1.5 本论文的研究目的和主要内容 | 第34页 |
| 参考文献 | 第34-42页 |
| 第2章 辐射损伤信号在线虫个体上的转导效应 | 第42-56页 |
| 2.1 前言 | 第42-43页 |
| 2.2 材料与方法 | 第43-47页 |
| 2.2.1 线虫品系和试剂 | 第43页 |
| 2.2.2 线虫培养 | 第43-44页 |
| 2.2.3 线虫的同步化处理 | 第44页 |
| 2.2.4 单粒子微束定点定量辐照线虫 | 第44-45页 |
| 2.2.5 生殖腺细胞凋亡数目的测定 | 第45-46页 |
| 2.2.6 寿命的测定 | 第46页 |
| 2.2.7 线虫产卵率的检测 | 第46页 |
| 2.2.8 数据统计分析 | 第46-47页 |
| 2.3 结果与分析 | 第47-51页 |
| 2.3.1 定点辐射诱导旁区生殖腺细胞凋亡 | 第47-48页 |
| 2.3.2 辐射旁效应与辐射剂量的关系 | 第48-49页 |
| 2.3.3 定点辐射对线虫平均寿命的影响 | 第49-50页 |
| 2.3.4 定点辐射线虫导致子代的遗传损伤 | 第50-51页 |
| 2.4 讨论 | 第51-53页 |
| 参考文献 | 第53-56页 |
| 第3章 单束定点辐射线虫诱导的HUS-1::GFP聚集及DNA损伤通路的研究 | 第56-70页 |
| 3.1 前言 | 第56-57页 |
| 3.2 材料与方法 | 第57-61页 |
| 3.2.1 线虫品系和试剂 | 第57-58页 |
| 3.2.2 线虫培养及同步化处理 | 第58页 |
| 3.2.3 HUS-1::GFP聚集点的观察与统计 | 第58页 |
| 3.2.4 RNAi干扰 | 第58-59页 |
| 3.2.5 产生dsRNA的L4440质粒构建 | 第59-61页 |
| 3.2.6 数据统计分析 | 第61页 |
| 3.3 结果与分析 | 第61-66页 |
| 3.3.1 定点辐射导致旁区HUS-1::GFP聚集点数目的增加 | 第61-63页 |
| 3.3.2 重组质粒菌种的构建 | 第63-64页 |
| 3.3.3 DNA损伤响应途径参与辐射诱导的旁效应 | 第64-66页 |
| 3.4 讨论 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-70页 |
| 第4章 利用组织特异性RNAi方法探究DNA损伤通路的空间功能 | 第70-84页 |
| 4.1 前言 | 第70-72页 |
| 4.2 材料与方法 | 第72-75页 |
| 4.2.1 线虫品系和试剂 | 第72页 |
| 4.2.2 线虫培养及同步化处理 | 第72页 |
| 4.2.3 组织特异性RNAi干扰 | 第72页 |
| 4.2.4 生殖腺细胞凋亡数目的测定 | 第72-73页 |
| 4.2.5 实时定量RT-PCR分析 | 第73-74页 |
| 4.2.6 γ源全身辐照实验 | 第74页 |
| 4.2.7 数据统计分析 | 第74-75页 |
| 4.3 结果与分析 | 第75-80页 |
| 4.3.1 对组织特异性RNAi实验体系的验证 | 第75-78页 |
| 4.3.2 DDR在咽部辐射旁效应中的空间作用 | 第78-79页 |
| 4.3.3 DDR在阴门部位辐射旁效应中的空间作用 | 第79-80页 |
| 4.4 讨论 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-84页 |
| 第5章 活体水平诱导的辐射旁效应与氧化应激的关联 | 第84-92页 |
| 5.1 前言 | 第84-85页 |
| 5.2 材料与方法 | 第85-86页 |
| 5.2.1 线虫品系和试剂 | 第85-86页 |
| 5.2.2 线虫培养及同步化处理 | 第86页 |
| 5.2.3 线虫体内自由基表达水平检测 | 第86页 |
| 5.2.4 数据统计分析 | 第86页 |
| 5.3 结果与分析 | 第86-89页 |
| 5.3.1 定点辐射导致线虫体内ROS水平上升 | 第86-87页 |
| 5.3.2 定点辐射后对线虫体内ROS的原位检测 | 第87-88页 |
| 5.3.3 自由基清除剂对旁区生殖细胞凋亡的拯救作用 | 第88-89页 |
| 5.4 讨论 | 第89-90页 |
| 参考文献 | 第90-92页 |
| 第6章 神经酰胺及其代谢通路在旁效应转导中的作用 | 第92-102页 |
| 6.1 前言 | 第92-93页 |
| 6.2 材料与方法 | 第93-96页 |
| 6.2.1 线虫品系和试剂 | 第93-94页 |
| 6.2.2 线虫培养及同步化处理 | 第94页 |
| 6.2.3 生殖腺细胞凋亡数目的测定 | 第94页 |
| 6.2.4 实时定量RT-PCR分析 | 第94-96页 |
| 6.2.5 数据统计分析 | 第96页 |
| 6.3 结果与分析 | 第96-98页 |
| 6.3.1 神经酰胺代谢途径基因功能缺失后对辐射旁效应的影响 | 第96-98页 |
| 6.3.2 神经酰胺代谢合酶基因功能缺失后对egl-1/ced-13基因表达量的影响 | 第98页 |
| 6.4 讨论 | 第98-99页 |
| 参考文献 | 第99-102页 |
| 结论 | 第102-104页 |
| 致谢 | 第104-106页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文与参加的学术会议 | 第106-108页 |
| 附录 | 第108页 |
