摘要 | 第1-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-19页 |
1 紫苏简介 | 第10-12页 |
·紫苏生理特性 | 第10页 |
·紫苏成分 | 第10-11页 |
·紫苏的开发利用价值 | 第11-12页 |
2 植物油脂生物合成的基本途径 | 第12-15页 |
·三酰甘油(TAG)的合成 | 第12-13页 |
·三酰甘油(TAG)的积累 | 第13-14页 |
·植物不饱和脂肪酸的合成 | 第14页 |
·PDAT基因研究进展 | 第14-15页 |
3 PCR技术及其在植物研究中的应用 | 第15-16页 |
4 单核苷酸多态性的研究概况 | 第16-17页 |
·SNP的原理及特点 | 第16页 |
·SNP检测分析方法 | 第16-17页 |
5 本研究的目的意义和研究内容 | 第17-18页 |
6 技术路线 | 第18-19页 |
第二章 紫苏PDAT基因克隆及生物信息学分析 | 第19-44页 |
1 材料 | 第19页 |
·试验材料 | 第19页 |
·供试菌株和载体 | 第19页 |
·主要试剂 | 第19页 |
·主要仪器 | 第19页 |
2 试验方法 | 第19-29页 |
·试剂的配置方法 | 第19-20页 |
·紫苏叶片总RNA的提取 | 第20-21页 |
·紫苏叶片总RNA的检测 | 第21页 |
·cDNA第一链的合成 | 第21-22页 |
·RNA反转录后获得cDNA的PCR检测及引物设计 | 第22-24页 |
·紫苏PDAT基因全长序列的扩增 | 第24页 |
·紫苏PDAT基因cDNA的克隆 | 第24-29页 |
3 结果与分析 | 第29-41页 |
·紫苏叶片总RNA的提取 | 第29页 |
·紫苏PDAT基因cDNA的克隆 | 第29-32页 |
·紫苏PDAT基因的生物信息学分析 | 第32-41页 |
4 讨论与结论 | 第41-43页 |
·转录组测序的基因发掘及基因cDNA序列全长的获得 | 第41-42页 |
·紫苏PDAT基因生物信息学分析 | 第42-43页 |
5 小结 | 第43-44页 |
第三章 紫苏PDAT基因表达特性分析 | 第44-58页 |
1 材料 | 第44-45页 |
·供试材料 | 第44页 |
·主要试剂及仪器 | 第44-45页 |
2 试验方法 | 第45-47页 |
·紫苏RNA的提取及cDNA的合成 | 第45页 |
·引物的设计 | 第45页 |
·半定量PCR | 第45-46页 |
·实时荧光定量PCR | 第46页 |
·引物特异性鉴定 | 第46页 |
·高效扩增条件的确立 | 第46-47页 |
·实时荧光定量PCR数据计算 | 第47页 |
3 结果与分析 | 第47-56页 |
·紫苏RNA的提取 | 第47-48页 |
·PCR扩增反应的循环数筛选 | 第48页 |
·紫苏PDAT基因的半定量分析 | 第48-50页 |
·荧光定量PCR反应条件的确定 | 第50-51页 |
·PDAT基因在紫苏不同组织及种子发育不同时期的表达模式 | 第51-56页 |
4 讨论与结论 | 第56-57页 |
·紫苏不同组织RNA的提取 | 第56页 |
·PDAT基因在紫苏不同组织中的表达特性 | 第56-57页 |
5 小结 | 第57-58页 |
第四章 紫苏PDAT基因的单核苷酸多态性分析 | 第58-67页 |
1 试验材料 | 第58页 |
2 试验方法 | 第58-59页 |
·紫苏RNA的提取及cDNA的合成 | 第58页 |
·引物的设计 | 第58-59页 |
·PCR扩增和测序 | 第59页 |
·SNP位点鉴定 | 第59页 |
·PDAT基因序列单核苷酸多态性检测 | 第59页 |
3 结果与分析 | 第59-64页 |
·紫苏PDAT基因PCR扩增 | 第59-60页 |
·SNP位点鉴定 | 第60-62页 |
·紫苏PDAT基因的单核苷酸多态性(SNP)分析 | 第62-63页 |
·紫苏PDAT基因单倍型分析 | 第63-64页 |
4. 讨论与结论 | 第64-65页 |
·使用高保真DNA聚合酶可进行错配校正 | 第64页 |
·紫苏PDAT基因单核苷酸多态性分析 | 第64-65页 |
5 小结 | 第65-67页 |
参考文献 | 第67-74页 |
Abstract | 第74-76页 |
附录1 | 第76-77页 |
附录2 | 第77-78页 |
致谢 | 第78页 |