| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 前言 | 第11-12页 |
| 英文缩略表 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-26页 |
| 综述一 肌肉生长抑制素及其抑制剂的研究进展 | 第13-19页 |
| 1 MSTN基因的研究现状 | 第13-16页 |
| ·MSTN基因的表达 | 第13页 |
| ·MSTN基因的结构特点 | 第13-14页 |
| ·MSTN基因的功能 | 第14页 |
| ·MSTN基因的作用机制 | 第14-16页 |
| 2 MSTN抑制剂的研究 | 第16-18页 |
| 3 MSTN的应用前景 | 第18-19页 |
| ·MSTN在医学上的应用前景 | 第18页 |
| ·MSTN在动物应用中的前景 | 第18-19页 |
| 综述二 纳米抗体的研究进展 | 第19-26页 |
| 1 纳米抗体的发现 | 第19-20页 |
| 2 纳米抗体的结构 | 第20-21页 |
| 3 纳米抗体的特性 | 第21页 |
| 4 纳米抗体的制备 | 第21-22页 |
| 5 纳米抗体的类型 | 第22-23页 |
| 6 纳米抗体的发展 | 第23页 |
| 7 纳米抗体的应用 | 第23-26页 |
| 第二章 实验研究 | 第26-70页 |
| 实验一 MSTN纳米抗体文库富集与筛选 | 第26-43页 |
| 摘要 | 第26页 |
| 1 材料与方法 | 第26-35页 |
| ·材料 | 第26-28页 |
| ·方法 | 第28-35页 |
| 2 结果 | 第35-41页 |
| ·初级纳米抗体文库的多样性分析 | 第35-36页 |
| ·辅助噬菌体扩繁和纳米抗体文库的富集 | 第36页 |
| ·MSTN成熟肽蛋白的大量表达和免疫原性检测 | 第36-37页 |
| ·抗原和免疫血清反应的ELISA检测 | 第37页 |
| ·四轮亲和淘选 | 第37-39页 |
| ·检测MSTN重组噬菌体亲和性 | 第39页 |
| ·重组抗体在HB2151中可溶性表达 | 第39-40页 |
| ·PCR检测结果 | 第40-41页 |
| ·MSTN纳米抗体序列比对分析 | 第41页 |
| 3 讨论 | 第41-43页 |
| ·噬菌体展示系统表达外源蛋白 | 第41-42页 |
| ·免疫库淘选高特异性和亲和力的抗体难度大 | 第42页 |
| ·高亲和力和特异性纳米抗体的筛选 | 第42-43页 |
| 实验二 MSTN纳米抗体的原核表达和纯化 | 第43-54页 |
| 摘要 | 第43页 |
| 1 材料与方法 | 第43-48页 |
| ·材料 | 第43-44页 |
| ·方法 | 第44-48页 |
| 2 结果 | 第48-52页 |
| ·MSTN单域重链抗体片段目的区基因的克隆 | 第48页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第48-49页 |
| ·构建与鉴定重组的纳米抗体MPA和MPK表达载体 | 第49-50页 |
| ·重组MSTN纳米抗体的原核表达 | 第50页 |
| ·优化重组抗体表达条件 | 第50页 |
| ·重组MSTN纳米抗体的浓度测定 | 第50页 |
| ·重组MSTN纳米抗体Western Blot检测 | 第50-52页 |
| 3 讨论 | 第52-54页 |
| ·原核表达载体的选择 | 第52-53页 |
| ·重组抗体的纯化纯度较高 | 第53-54页 |
| 实验三 MSTN纳米抗体对小白鼠增重效果研究 | 第54-70页 |
| 摘要 | 第54-55页 |
| 1 材料与方法 | 第55-59页 |
| ·材料 | 第55页 |
| ·方法 | 第55-59页 |
| 2 结果 | 第59-68页 |
| ·ELISA检测抗体活性 | 第59-60页 |
| ·Western Blot特异性检测 | 第60页 |
| ·细胞毒性检测 | 第60-62页 |
| ·中和活性实验结果 | 第62-64页 |
| ·最优MSTN纳米抗体剂量组增重及组织学观察 | 第64-67页 |
| ·小白鼠MSTN蛋白组织免疫荧光检测与分析 | 第67-68页 |
| 3 讨论 | 第68-70页 |
| ·MSTN纳米抗体对C2C12细胞未产生毒性 | 第68-69页 |
| ·MSTN纳米抗体对小白鼠增重效果明显 | 第69页 |
| ·MSTN纳米抗体促进骨骼肌增大 | 第69-70页 |
| 第三章 实验结论 | 第70-71页 |
| 1 成功筛选到 MSTN 纳米抗体 | 第70页 |
| 2 在大肠杆菌中表达 MSTN 纳米抗体具有高特异性和亲和力 | 第70页 |
| 3 获得的 MSTN 纳米抗体能够促进肌肉组织生长 | 第70-71页 |
| 创新点 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-81页 |
| 附录 | 第81-85页 |
| 致谢 | 第85-86页 |
| 作者简介 | 第86-87页 |
| 导师评阅表 | 第87页 |
