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IL-6和TNF-α经NF-κB-miR-34a/miR-31-Foxp3信号轴导致Treg/Th17细胞失衡

摘要第1-8页
Abstract第8-16页
第一章 绪论第16-30页
   ·自身免疫性疾病第16-19页
     ·Treg细胞与自身免疫性疾病第16-17页
     ·Th17细胞与自身免疫性疾病第17-18页
     ·炎症微环境与Treg/Th17比例失衡第18-19页
   ·miRNA第19-24页
     ·miRNA的生物合成与作用机制第19-20页
     ·miRNA与免疫第20-22页
     ·miRNA与自身免疫性疾病第22-24页
   ·NF-κB及其信号通路第24-28页
     ·NF-κB通路概述第24-26页
     ·NF-κB与免疫第26-27页
     ·NF-κB与自身免疫性疾病第27-28页
   ·小结第28-30页
第二章 本研究的目的、内容、方法、实验方案以及意义第30-32页
   ·研究目的第30页
   ·研究内容第30页
   ·研究方法第30页
   ·实验方案第30-31页
     ·体外验证miR-34a和miR-31对Foxp3表达水平的调控第30页
     ·探讨Foxp3~+细胞中miR-34a和miR-31的表达水平第30-31页
     ·IL-6、TNF-α 介导miR-34a和miR-31调控Foxp3的机制初探第31页
   ·研究意义第31-32页
第三章 实验材料与方法第32-58页
   ·实验材料第32-42页
     ·实验动物与试剂第32-35页
     ·主要仪器和耗材第35-37页
     ·主要溶液配制第37-42页
   ·实验内容与方法第42-58页
     ·体外验证miR-34a和miR-31对Foxp3表达水平的调控第42-51页
       ·相关质粒图谱及引物第42-44页
       ·小鼠逆转录病毒重组质粒MGP-31构建第44-48页
       ·小鼠慢病毒重组质粒p LV-miR-31构建第48-49页
       ·质粒转染HEK-293T细胞第49页
       ·qPCR检测miR-34a、miR-31和Foxp3 mRNA水平第49-50页
       ·Immunoblot技术检测Foxp3蛋白水平第50-51页
     ·Foxp3~+细胞中miR-34a和miR-31的表达水平第51-53页
       ·体外诱导iTreg细胞第51-52页
       ·qPCR检测Foxp3 mRNA、miR-34a和miR-31的表达水平第52页
       ·体外Foxp3~+ EL4细胞第52-53页
       ·普通PCR检测Foxp3基因水平,qPCR检测Foxp3 mRNA、miR-34a和miR-31第53页
     ·IL-6、TNF-α 介导miR-34a和miR-31调控Foxp3的机制初探第53-57页
       ·体外诱导小鼠Th17细胞第53-55页
       ·qPCR检测miR-34a和miR-31的表达水平第55页
       ·IL-6 及TNF-α 分别刺激小鼠CD4~+T和EL4细胞第55页
       ·qPCR检测miR-34a和miR-31的表达水平第55页
       ·IL-6 刺激Treg细胞第55-56页
       ·流式细胞术鉴定Treg细胞第56页
       ·IL-6、TNF-α 及NF-κB抑制剂分别刺激Foxp3~+ EL4细胞第56-57页
       ·Immunoblot技术检测NF-κB活性以及Foxp3表达水平第57页
       ·qPCR检测miR-34a和miR-31的表达水平第57页
     ·统计学方法第57-58页
第四章 实验结果及讨论第58-82页
   ·体外验证miR-34a和miR-31对Foxp3表达水平的调控第58-68页
     ·aMGP-31逆转录病毒重组质粒构建成功第58-60页
     ·bpLV-miR-31慢病毒重组质粒构建成功第60-62页
     ·miR-31抑制Foxp3 mRNA水平第62-66页
     ·miR-34a和miR-31抑制Foxp3的蛋白水平第66-67页
     ·小结第67-68页
   ·Foxp3~+细胞中miR-34a和miR-31的表达水平第68-71页
     ·iTreg细胞中Foxp3与miR-34a和miR-31的表达水平呈负相关第68-69页
     ·Foxp3~+ EL4细胞中Foxp3与miR-34a和miR-31的表达水平呈负相关第69-71页
     ·小结第71页
   ·IL-6、TNF-α 介导miR-34a和miR-31调控Foxp3的机制初探第71-80页
     ·Th17细胞中miR-34a和miR-31的表达水平上调第71-74页
     ·IL-6 和TNF-α 上调miR-34a和miR-31的表达水平第74-75页
     ·IL-6 和TNF-α 抑制Foxp3蛋白水平第75-77页
     ·NF-κB参与miR-34a和miR-31对Foxp3表达的调控第77-80页
     ·小结第80页
   ·讨论第80-82页
第五章 主要结论与展望第82-85页
   ·主要结论第82页
   ·展望第82-85页
参考文献第85-92页
综述:小鼠Treg细胞治疗自身免疫性疾病的实验室研究进展第92-99页
 综述参考文献第96-99页
致谢第99-100页
攻读硕士学位期间发表的文章及参加的会议第100页

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