摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-16页 |
第一章 绪论 | 第16-30页 |
·自身免疫性疾病 | 第16-19页 |
·Treg细胞与自身免疫性疾病 | 第16-17页 |
·Th17细胞与自身免疫性疾病 | 第17-18页 |
·炎症微环境与Treg/Th17比例失衡 | 第18-19页 |
·miRNA | 第19-24页 |
·miRNA的生物合成与作用机制 | 第19-20页 |
·miRNA与免疫 | 第20-22页 |
·miRNA与自身免疫性疾病 | 第22-24页 |
·NF-κB及其信号通路 | 第24-28页 |
·NF-κB通路概述 | 第24-26页 |
·NF-κB与免疫 | 第26-27页 |
·NF-κB与自身免疫性疾病 | 第27-28页 |
·小结 | 第28-30页 |
第二章 本研究的目的、内容、方法、实验方案以及意义 | 第30-32页 |
·研究目的 | 第30页 |
·研究内容 | 第30页 |
·研究方法 | 第30页 |
·实验方案 | 第30-31页 |
·体外验证miR-34a和miR-31对Foxp3表达水平的调控 | 第30页 |
·探讨Foxp3~+细胞中miR-34a和miR-31的表达水平 | 第30-31页 |
·IL-6、TNF-α 介导miR-34a和miR-31调控Foxp3的机制初探 | 第31页 |
·研究意义 | 第31-32页 |
第三章 实验材料与方法 | 第32-58页 |
·实验材料 | 第32-42页 |
·实验动物与试剂 | 第32-35页 |
·主要仪器和耗材 | 第35-37页 |
·主要溶液配制 | 第37-42页 |
·实验内容与方法 | 第42-58页 |
·体外验证miR-34a和miR-31对Foxp3表达水平的调控 | 第42-51页 |
·相关质粒图谱及引物 | 第42-44页 |
·小鼠逆转录病毒重组质粒MGP-31构建 | 第44-48页 |
·小鼠慢病毒重组质粒p LV-miR-31构建 | 第48-49页 |
·质粒转染HEK-293T细胞 | 第49页 |
·qPCR检测miR-34a、miR-31和Foxp3 mRNA水平 | 第49-50页 |
·Immunoblot技术检测Foxp3蛋白水平 | 第50-51页 |
·Foxp3~+细胞中miR-34a和miR-31的表达水平 | 第51-53页 |
·体外诱导iTreg细胞 | 第51-52页 |
·qPCR检测Foxp3 mRNA、miR-34a和miR-31的表达水平 | 第52页 |
·体外Foxp3~+ EL4细胞 | 第52-53页 |
·普通PCR检测Foxp3基因水平,qPCR检测Foxp3 mRNA、miR-34a和miR-31 | 第53页 |
·IL-6、TNF-α 介导miR-34a和miR-31调控Foxp3的机制初探 | 第53-57页 |
·体外诱导小鼠Th17细胞 | 第53-55页 |
·qPCR检测miR-34a和miR-31的表达水平 | 第55页 |
·IL-6 及TNF-α 分别刺激小鼠CD4~+T和EL4细胞 | 第55页 |
·qPCR检测miR-34a和miR-31的表达水平 | 第55页 |
·IL-6 刺激Treg细胞 | 第55-56页 |
·流式细胞术鉴定Treg细胞 | 第56页 |
·IL-6、TNF-α 及NF-κB抑制剂分别刺激Foxp3~+ EL4细胞 | 第56-57页 |
·Immunoblot技术检测NF-κB活性以及Foxp3表达水平 | 第57页 |
·qPCR检测miR-34a和miR-31的表达水平 | 第57页 |
·统计学方法 | 第57-58页 |
第四章 实验结果及讨论 | 第58-82页 |
·体外验证miR-34a和miR-31对Foxp3表达水平的调控 | 第58-68页 |
·aMGP-31逆转录病毒重组质粒构建成功 | 第58-60页 |
·bpLV-miR-31慢病毒重组质粒构建成功 | 第60-62页 |
·miR-31抑制Foxp3 mRNA水平 | 第62-66页 |
·miR-34a和miR-31抑制Foxp3的蛋白水平 | 第66-67页 |
·小结 | 第67-68页 |
·Foxp3~+细胞中miR-34a和miR-31的表达水平 | 第68-71页 |
·iTreg细胞中Foxp3与miR-34a和miR-31的表达水平呈负相关 | 第68-69页 |
·Foxp3~+ EL4细胞中Foxp3与miR-34a和miR-31的表达水平呈负相关 | 第69-71页 |
·小结 | 第71页 |
·IL-6、TNF-α 介导miR-34a和miR-31调控Foxp3的机制初探 | 第71-80页 |
·Th17细胞中miR-34a和miR-31的表达水平上调 | 第71-74页 |
·IL-6 和TNF-α 上调miR-34a和miR-31的表达水平 | 第74-75页 |
·IL-6 和TNF-α 抑制Foxp3蛋白水平 | 第75-77页 |
·NF-κB参与miR-34a和miR-31对Foxp3表达的调控 | 第77-80页 |
·小结 | 第80页 |
·讨论 | 第80-82页 |
第五章 主要结论与展望 | 第82-85页 |
·主要结论 | 第82页 |
·展望 | 第82-85页 |
参考文献 | 第85-92页 |
综述:小鼠Treg细胞治疗自身免疫性疾病的实验室研究进展 | 第92-99页 |
综述参考文献 | 第96-99页 |
致谢 | 第99-100页 |
攻读硕士学位期间发表的文章及参加的会议 | 第100页 |