质谱在糖链结构鉴定和糖蛋白与抗体相互作用中的应用研究
| 中文摘要 | 第1-15页 |
| ABSTRACT | 第15-19页 |
| 缩略符号说明 | 第19-22页 |
| 第一章 绪论 | 第22-42页 |
| ·糖基化修饰的种类及功能综述 | 第22-28页 |
| ·N-连接糖基化 | 第23-24页 |
| ·O-GalNAc糖基化 | 第24-26页 |
| ·O-GlcNAc糖基化 | 第26页 |
| ·糖基化磷脂酰肌醇锚定 | 第26-27页 |
| ·磷酸化糖基修饰 | 第27页 |
| ·C-甘露糖基化 | 第27-28页 |
| ·糖肽的富集方法 | 第28-34页 |
| ·凝集素亲和层析 | 第29-31页 |
| ·肼化学富集法 | 第31-32页 |
| ·硼酸富集法 | 第32-33页 |
| ·亲水相互作用分离法 | 第33-34页 |
| ·生物质谱技术 | 第34-39页 |
| ·生物质谱的离子化方式 | 第35页 |
| ·生物质谱的质量分析器 | 第35-36页 |
| ·生物质谱的碎裂方式 | 第36-38页 |
| ·质谱的数据处理 | 第38-39页 |
| ·论文大纲 | 第39-42页 |
| 第二章 过糖基化HCG的纯化 | 第42-54页 |
| ·引言 | 第42页 |
| ·实验材料 | 第42-45页 |
| ·试剂与耗材 | 第42-43页 |
| ·主要仪器 | 第43页 |
| ·缓冲液及流动相的配制 | 第43-45页 |
| ·实验方法 | 第45-48页 |
| ·抗体偶联琼脂糖珠的制备 | 第45页 |
| ·hCG的纯化 | 第45-46页 |
| ·SDS-PAGE分析 | 第46页 |
| ·hCG胶内酶解 | 第46-47页 |
| ·质谱分析 | 第47-48页 |
| ·数据库搜索 | 第48页 |
| ·结果与讨论 | 第48-53页 |
| ·hCG的纯化 | 第48-49页 |
| ·hCG的质谱鉴定 | 第49-53页 |
| ·本章小结 | 第53-54页 |
| 第三章 HCG的糖基化表征 | 第54-69页 |
| ·引言 | 第54-55页 |
| ·药品与试剂 | 第55-57页 |
| ·试剂与耗材 | 第55页 |
| ·主要仪器 | 第55-56页 |
| ·色谱柱 | 第56页 |
| ·缓冲液及流动相的配制 | 第56-57页 |
| ·实验方法 | 第57-58页 |
| ·hCG酶解 | 第57页 |
| ·多肽质谱分析 | 第57页 |
| ·数据库搜索 | 第57-58页 |
| ·N-糖链释放和纯化 | 第58页 |
| ·N-糖链质谱分析 | 第58页 |
| ·结果与讨论 | 第58-67页 |
| ·糖基化位点鉴定 | 第58-63页 |
| ·N-糖链分析 | 第63-67页 |
| ·本章小结 | 第67-69页 |
| 第四章 HCG与单克隆抗体相互作用表征 | 第69-75页 |
| ·引言 | 第69-70页 |
| ·药品与试剂 | 第70页 |
| ·试剂与耗材 | 第70页 |
| ·主要仪器 | 第70页 |
| ·缓冲液的配制 | 第70页 |
| ·实验方法 | 第70-72页 |
| ·传感器的筛选 | 第70-71页 |
| ·样品测定 | 第71-72页 |
| ·结果与讨论 | 第72-74页 |
| ·本章小结 | 第74-75页 |
| 第五章 氢/氘交换方法研究单抗的抗原表位序列 | 第75-88页 |
| ·引言 | 第75-76页 |
| ·药品与试剂 | 第76-77页 |
| ·试剂与耗材 | 第76页 |
| ·主要仪器 | 第76页 |
| ·色谱柱 | 第76页 |
| ·缓冲液及流动相的配制 | 第76-77页 |
| ·实验方法 | 第77-79页 |
| ·覆盖度考察 | 第77-78页 |
| ·抗原表位的检测 | 第78-79页 |
| ·结果与讨论 | 第79-86页 |
| ·本章小结 | 第86-88页 |
| 第六章 抗原表位的确定及验证 | 第88-95页 |
| ·引言 | 第88页 |
| ·药品与试剂 | 第88-90页 |
| ·试剂与耗材 | 第88-89页 |
| ·主要仪器 | 第89页 |
| ·色谱柱 | 第89页 |
| ·缓冲液及流动相的配制 | 第89-90页 |
| ·实验方法 | 第90-91页 |
| ·N-糖链位点特异性分析 | 第90-91页 |
| ·BLI分析 | 第91页 |
| ·结果与讨论 | 第91-94页 |
| ·本章小结 | 第94-95页 |
| 第七章 低分子肝素结构表征 | 第95-107页 |
| ·引言 | 第95-97页 |
| ·药品与试剂 | 第97-98页 |
| ·试剂与耗材 | 第97页 |
| ·主要仪器 | 第97页 |
| ·色谱柱 | 第97-98页 |
| ·缓冲液的配制 | 第98页 |
| ·实验方法 | 第98-99页 |
| ·RPIP-ESI-MS方法建立 | 第98页 |
| ·数据解析 | 第98-99页 |
| ·2D-HSQC-NMR分析 | 第99页 |
| ·结果与讨论 | 第99-106页 |
| ·依诺肝素和那曲肝素的RPIP-ESI-MS分析 | 第99-101页 |
| ·质谱数据解析 | 第101-103页 |
| ·重复性考察 | 第103-104页 |
| ·杂质鉴定 | 第104-106页 |
| ·本章小结 | 第106-107页 |
| 全文总结 | 第107-109页 |
| 附录 | 第109-117页 |
| 参考文献 | 第117-137页 |
| 致谢 | 第137-138页 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文及申请的专利 | 第138-139页 |
| 附件 | 第139-154页 |
