中度嗜盐菌Martelella sp.AD-3龙胆酸1,2-双加氧酶的表达、纯化及功能研究
| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-11页 |
| 第1章 绪论 | 第11-22页 |
| ·研究背景 | 第11页 |
| ·多环芳烃的微生物降解 | 第11-15页 |
| ·多环芳烃的微生物代谢途径 | 第11-13页 |
| ·GDO研究进展 | 第13-15页 |
| ·蛋白质组学及其应用 | 第15-17页 |
| ·蛋白质组学概念 | 第15-17页 |
| ·差异蛋白质组学概述 | 第17页 |
| ·Crispr/cas9基因敲除体系概述 | 第17-20页 |
| ·Crispr/cas9基因敲除体系的发现历程 | 第18页 |
| ·Ⅱ型CRISPR/Cas功能行使机制 | 第18-20页 |
| ·研究目的及内容 | 第20-22页 |
| ·研究目的 | 第20页 |
| ·研究内容 | 第20-21页 |
| ·课题意义 | 第21页 |
| ·技术路线 | 第21-22页 |
| 第2章 龙胆酸1,2-双加氧酶的功能及性质研究 | 第22-38页 |
| ·引言 | 第22页 |
| ·实验材料与方法 | 第22-27页 |
| ·实验材料 | 第22-23页 |
| ·实验方法 | 第23-27页 |
| ·结果与讨论 | 第27-37页 |
| ·GDO基因的序列分析 | 第27-28页 |
| ·GDO表达质粒的构建 | 第28页 |
| ·GDO表达的优化 | 第28-29页 |
| ·GDO蛋白的纯化 | 第29-30页 |
| ·GDO酶学性质研究 | 第30-33页 |
| ·GDO催化龙胆酸的机制研究 | 第33-34页 |
| ·龙胆酸氧化过程中的快速动力学研究 | 第34-35页 |
| ·基因定点突变实验 | 第35-36页 |
| ·龙胆酸降解过程中gdo转录水平研究 | 第36-37页 |
| ·本章小结 | 第37-38页 |
| 第3章 中度嗜盐菌AD-3差异蛋白质组学研究 | 第38-58页 |
| ·引言 | 第38页 |
| ·材料与方法 | 第38-41页 |
| ·实验材料 | 第38页 |
| ·实验方法 | 第38-41页 |
| ·结果与讨论 | 第41-57页 |
| ·SDS电泳检测蛋白表达量及主要上调蛋白鉴定 | 第41-43页 |
| ·差异蛋白质组学分析 | 第43-57页 |
| ·本章小结 | 第57-58页 |
| 第4章 中度嗜盐菌AD-3基因敲除体系构建 | 第58-68页 |
| ·引言 | 第58页 |
| ·材料与方法 | 第58-61页 |
| ·实验材料 | 第58-59页 |
| ·实验方法 | 第59-61页 |
| ·结果与讨论 | 第61-67页 |
| ·构建敲除质粒pTC | 第61-65页 |
| ·敲除gdo | 第65-67页 |
| ·本章小结 | 第67-68页 |
| 第5章 结论与展望 | 第68-69页 |
| ·结论 | 第68页 |
| ·展望 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
| 已发表论文 | 第81-82页 |
| 附录1:主要实验仪器 | 第82-83页 |
| 附录2:主要实验试剂 | 第83页 |