| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-8页 |
| 1 绪论 | 第8-16页 |
| ·Wnt信号通路 | 第8页 |
| ·经典Wnt/β-catenin信号通路 | 第8-10页 |
| ·p53基因 | 第10-14页 |
| ·p53基因结构与功能 | 第10-12页 |
| ·p53基因的网络调控 | 第12页 |
| ·p53基因相关信号通路及肿瘤形成 | 第12-14页 |
| ·Wnt/β-catenin信号通路与p53的关联 | 第14-16页 |
| 2 实验材料与方法 | 第16-23页 |
| ·实验材料 | 第16-17页 |
| ·实验仪器 | 第16页 |
| ·实验试剂 | 第16页 |
| ·主要试剂配制 | 第16-17页 |
| ·实验方法 | 第17-23页 |
| ·AGS细胞转染、蛋白水平检测 | 第17-18页 |
| ·p53启动子及其上游序列克隆 | 第18-19页 |
| ·293T细胞转染、蛋白水平检测 | 第19-21页 |
| ·293T细胞荧光定量PCR水平检测 | 第21-23页 |
| 3 实验结果 | 第23-30页 |
| ·AGS细胞过表达β-catenin、Lef1实验 | 第23-24页 |
| ·β-catenin、Lef1过表达western检测结果 | 第23页 |
| ·一过性敲减β-catenin后western检测结果 | 第23-24页 |
| ·p53启动子及其上游序列载体构建 | 第24-27页 |
| ·p53启动子定位及TCF/Lef1基序查找 | 第24-25页 |
| ·p53启动子及其上游序列克隆 | 第25-27页 |
| ·实验假说建立 | 第27-28页 |
| ·293T细胞共表达实验 | 第28-29页 |
| ·293T细胞转染效率 | 第28页 |
| ·293T细胞共表达western结果 | 第28-29页 |
| ·293T细胞荧光素酶基因定量PCR结果 | 第29-30页 |
| 4 讨论 | 第30-35页 |
| ·p53启动子上游克隆序列 | 第30-31页 |
| ·β-catenin、Lef1、p53三者相互关联 | 第31-32页 |
| ·β-catenin、Lef1上调p53 | 第31页 |
| ·β-catenin/Lefl与p53之间正负反馈机制 | 第31页 |
| ·β-catenin通过TCF/Lef1调控p53 | 第31-32页 |
| ·β-catenin转录水平调控p53假说证否 | 第32页 |
| ·实验系统可能存在问题 | 第32页 |
| ·细胞系统可能存在问题 | 第32页 |
| ·克隆系统可能存在问题 | 第32页 |
| ·蛋白与DNA相互作用方法比较 | 第32-35页 |
| 结论 | 第35-36页 |
| 参考文献 | 第36-41页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第41-42页 |
| 致谢 | 第42-43页 |
