腺病毒载体左侧ITR区对下游基因表达特异性的影响
| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 图和附表清单 | 第11-12页 |
| 缩略词表 | 第12-13页 |
| 第1章 引言 | 第13-25页 |
| ·肿瘤的基因治疗 | 第13-15页 |
| ·腺病毒介导的靶向性肿瘤基因治疗 | 第15-19页 |
| ·腺病毒的结构 | 第15页 |
| ·腺病毒载体的发展 | 第15-19页 |
| ·hTERT启动子在肿瘤靶向性基因中的应用 | 第19-21页 |
| ·报告基因的应用 | 第21-22页 |
| ·研究方案和技术路线 | 第22-25页 |
| ·研究方案 | 第22-24页 |
| ·技术路线 | 第24-25页 |
| 第2章 腺病毒载体的构建 | 第25-51页 |
| ·实验材料 | 第25-27页 |
| ·主要仪器 | 第25页 |
| ·主要试剂 | 第25-26页 |
| ·质粒及菌株 | 第26页 |
| ·试剂配制 | 第26-27页 |
| ·实验方法 | 第27-35页 |
| ·人基因组提取 | 第27-28页 |
| ·PCR反应 | 第28-29页 |
| ·连接反应 | 第29页 |
| ·感受态细胞制备 | 第29-30页 |
| ·转化反应 | 第30页 |
| ·碱裂解法提取质粒DNA | 第30-31页 |
| ·质粒小提 | 第31页 |
| ·胶回收 | 第31-32页 |
| ·酶切反应 | 第32页 |
| ·DNA纯化 | 第32-33页 |
| ·去磷酸化反应 | 第33页 |
| ·反应补平 | 第33-34页 |
| ·腺病毒重组反应 | 第34页 |
| ·菌种保存 | 第34-35页 |
| ·实验结果 | 第35-49页 |
| ·目的片段的合成 | 第35-36页 |
| ·入门载体质粒p-hTERT-E1a的构建 | 第36-38页 |
| ·入门载体质粒p-rhTERT-E1a的构建 | 第38-40页 |
| ·入门载体p-rCMV-E1a的构建 | 第40-42页 |
| ·携带GFP报告基因的各入门载体的构建 | 第42-47页 |
| ·重组腺病毒载体的构建 | 第47-49页 |
| ·讨论 | 第49-51页 |
| 第3章 重组腺病毒包装及功能测定 | 第51-60页 |
| ·实验材料 | 第51页 |
| ·主要仪器 | 第51页 |
| ·主要试剂 | 第51页 |
| ·细胞株 | 第51页 |
| ·实验方法 | 第51-56页 |
| ·细胞培养基配制 | 第52-53页 |
| ·活细胞计数 | 第53页 |
| ·细胞冻存 | 第53页 |
| ·细胞复苏 | 第53页 |
| ·细胞传代 | 第53-54页 |
| ·重组腺病毒包装 | 第54-55页 |
| ·病毒扩增 | 第55页 |
| ·病毒滴度测定 | 第55-56页 |
| ·重组腺病毒感染肿瘤细胞 | 第56页 |
| ·数据分析 | 第56页 |
| ·实验结果 | 第56-60页 |
| ·重组腺病毒包装及滴度测定 | 第57页 |
| ·荧光表达情况及分析 | 第57-60页 |
| 第4章 小结与讨论 | 第60-62页 |
| ·小结 | 第60页 |
| ·讨论 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-70页 |
| 附录 | 第70-72页 |
| 个人简历 | 第72页 |
| 在学期间发表的学术论文 | 第72-73页 |
| 致谢 | 第73页 |
