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siRNA沉默TGFBR2基因对HepG2细胞增殖的影响

中文摘要第1-7页
Abstract第7-9页
中英文索引及缩略词表第9-11页
前言第11-15页
 1 研究背景第11-13页
 2 国内外研究现状第13页
 3 研究目的及研究意义第13-14页
 4 研究内容第14页
 5 技术路线第14-15页
材料和方法第15-31页
 1 实验仪器、材料和试剂第15-21页
   ·实验仪器与设备第15-16页
   ·实验材料第16-18页
     ·细胞、菌种和质粒第16-17页
     ·siRNA 及 real-time PCR 引物的合成第17-18页
   ·实验试剂第18-19页
   ·其他试剂的配方第19-21页
 2 实验方法第21-31页
   ·细胞培养第21-22页
     ·细胞培养液配制第21页
     ·细胞复苏第21页
     ·细胞传代第21-22页
   ·脂质体介导 siRNA 瞬时转染的条件筛选第22-23页
   ·real-time PCR 检测并筛选效率最高的 siRNA 片段第23-25页
     ·脂质体介导 siRNA 瞬时转染 HepG2 肝癌细胞株第23页
     ·siRNA 转染后细胞总 RNA 提取第23页
     ·RNA 反转录反应第23-24页
     ·实时定量 PCR 反应第24-25页
   ·重组 siRNA-pEGFP-N3 质粒瞬时转染 HepG2 肝癌细胞株第25-26页
     ·重组 siRNA-pEGFP-N3 质粒构建和克隆第25-26页
     ·脂质体介导重组 siRNA-pEGFP-N3 质粒转染 HepG2 细胞第26页
   ·Western blot 检测 TGFBR2 蛋白表达水平第26-29页
     ·蛋白提取、制样和定量检测第26-27页
     ·Western blot 检测蛋白表达水平第27-29页
   ·MTT 实验检测 TGF-β1 对 HepG2 细胞增殖的影响第29-30页
     ·TGF-β1 刺激实验的条件筛选第29页
     ·MTT 实验检测 TGFBR2 沉默后对 HepG2 细胞增殖的影响第29-30页
   ·统计学分析第30-31页
结果第31-36页
   ·lipo2000 介导 siRNA-NC-Fam 转染 HepG2 细胞第31页
   ·real-time PCR 检测 siRNA 的干扰效率第31-33页
     ·HepG2 细胞的总 RNA 提取第31-32页
     ·各组 siRNA 沉默 TGFBR2 基因的效率第32-33页
   ·siRNA-pEGFP-N3 质粒瞬时转染 HepG2 细胞第33页
   ·Western blot 检测 siRNA 干扰后 TGFBR2 蛋白表达水平第33页
   ·MTT 实验检测 TGF-β1 对 HepG2 细胞的增殖影响第33-34页
   ·MTT 实验检测 siRNA 沉默 TGFBR2 基因后 HepG2 细胞增殖情况第34-36页
讨论第36-38页
结论第38-39页
展望第39-40页
附图第40-42页
References第42-44页
文献综述第44-56页
 References第52-56页
致谢第56-57页
攻读硕士学位期间取得的研究成果(含学术论文)第57页

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