| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-11页 |
| 前言 | 第11-22页 |
| 1 呼吸道病毒简介 | 第11-15页 |
| ·腺病毒(Adenovirus) | 第11-12页 |
| ·甲型和乙型流感病毒(Influenza A virus and Influenza B virus) | 第12页 |
| ·副流感病毒(Parainfluenza Virus) | 第12页 |
| ·禽流感病毒(Avian influenza virus) | 第12页 |
| ·呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus) | 第12-13页 |
| ·麻疹病毒(Measles virus) | 第13页 |
| ·人偏肺病毒(Human metapneumo virus) | 第13页 |
| ·腮腺炎病毒(Mumps virus) | 第13-14页 |
| ·鼻病毒(Rhino virus) | 第14页 |
| ·冠状病毒(Corona virus) | 第14页 |
| ·SARS冠状病毒(Severe Acute Respiratory Syndromes) | 第14页 |
| ·风疹病毒(Rubella virus) | 第14-15页 |
| ·博卡病毒(Human Bocavirus) | 第15页 |
| 2 呼吸道病毒的检测方法 | 第15-17页 |
| ·病毒的分离培养 | 第15-16页 |
| ·血清学检测方法 | 第16页 |
| ·聚合酶链式反应技术 | 第16页 |
| ·分子杂交技术 | 第16-17页 |
| ·基因芯片技术 | 第17页 |
| 3 质谱检测技术 | 第17-21页 |
| ·PCR-MassARRAY技术概述 | 第17-18页 |
| ·多重PCR-质谱联用技术比较 | 第18-19页 |
| ·MALDI-TOF MS技术原理及步骤(基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱法) | 第19页 |
| ·引物延伸法 | 第19-20页 |
| ·PCR-MassARRAY引物设计的特殊要求 | 第20页 |
| ·MALDI-TOF MS的应用 | 第20-21页 |
| 4 本实验研究内容及意义 | 第21-22页 |
| 材料与方法 | 第22-39页 |
| 1 实验材料 | 第22-24页 |
| ·临床样本的收集 | 第22页 |
| ·质粒 | 第22-23页 |
| ·体外培养病毒的收集 | 第23页 |
| ·主要试剂 | 第23-24页 |
| ·主要实验器材与消耗 | 第24页 |
| 2 实验方法 | 第24-39页 |
| ·PCR-MassARRAY扩增引物和延伸引物的设计与合成 | 第24-30页 |
| ·PCR-MassARRAY检测体系的建立 | 第30页 |
| ·PCR-MassARRAY检测17种呼吸道病毒质粒 | 第30-35页 |
| ·17种呼吸道病毒重组质粒的序列测定 | 第30页 |
| ·引物溶解和稀释 | 第30-31页 |
| ·质粒的定量和稀释 | 第31-32页 |
| ·质粒标准品的iPLEX实验过程 | 第32-35页 |
| ·PCR-MassARRAY检测体外培养病毒 | 第35-36页 |
| ·病毒核酸的定量和稀释 | 第35页 |
| ·培养病毒iPLEX实验 | 第35-36页 |
| ·11种呼吸道体外培养病毒的序列测定 | 第36页 |
| ·PCR-MassARRAY检测110份临床样本 | 第36-39页 |
| ·110份临床样本DNA/RNA的提取 | 第36-37页 |
| ·110份临床样本RNA反转录反应 | 第37-38页 |
| ·110份临床样本核酸的定量和稀释 | 第38页 |
| ·110例HIN1感染样本iPLEX实验 | 第38页 |
| ·实时荧光定量PCR方法检测110份临床样本 | 第38-39页 |
| 结果 | 第39-54页 |
| 1 17种呼吸道病毒质粒PCR-MASSARRAY检测结果 | 第39-46页 |
| ·17种呼吸道病毒质粒特异性检测结果 | 第39-44页 |
| ·17种呼吸道病毒质粒灵敏度检测结果 | 第44-46页 |
| 2 体外培养病毒PCR-MASSARRAY检测结果 | 第46-48页 |
| 3 呼吸道临床样本PCR-MASSARRAY检测结果 | 第48-54页 |
| ·PCR-MassARRAY检测临床样本峰图结果 | 第48-51页 |
| ·110份临床样本PCR-MassARRAY检测结果 | 第51-52页 |
| ·110份临床样本PCR-MassARRAY与实时荧光定量PCR检测结果比较 | 第52-54页 |
| 讨论 | 第54-57页 |
| 结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 作者简介 | 第66-67页 |
| 在研期间发表的论文 | 第67页 |
