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miR-20b对Th17细胞分化和实验性自身免疫性脑脊髓炎发病的调控机制研究

中文摘要第1-7页
Abstract第7-12页
缩略语第12-14页
第一章 前言第14-36页
 第一节 Th17细胞第14-19页
     ·Th17细胞的发现第14-15页
     ·Th17效应细胞谱系第15页
     ·Th17细胞的分化调控第15-17页
     ·Th17和Treg细胞分化的相互作用第17-18页
     ·Th17和Th1/Th2细胞间的关系第18-19页
     ·Th17细胞的稳定性第19页
 第二节 多发性硬化症及实验性自身免疫性脑脊髓炎第19-29页
     ·概述第19-21页
     ·多发性硬化症的免疫致病机制第21-23页
     ·Th17细胞和多发性硬化症第23-29页
 第三节 microRNA第29-36页
     ·miRNAs的产生和功能第29-31页
     ·miRNAs和免疫系统第31-34页
     ·miRNA与MS、EAE第34-36页
第二章 材料与方法第36-72页
 第一节 实验材料第36-44页
     ·实验动物第36页
     ·主要试剂第36-39页
     ·主要耗材、仪器第39-40页
     ·菌种及细胞第40页
     ·质粒第40-42页
     ·常用溶液配制第42-44页
 第二节 实验方法第44-72页
     ·MOG(35-55)多肽诱导EAE模型的建立第44-45页
     ·组织切片、H&E染色及Luxol Fast Blue染色第45-49页
     ·小鼠单淋巴细胞准备第49-51页
     ·CD4+T细胞富集第51页
     ·CD4+T细胞体外分化第51-52页
     ·流式染色及检测第52-54页
     ·表达载体构建及相关检测实验第54-63页
     ·T细胞转染第63页
     ·细胞增殖检测第63-64页
     ·细胞凋亡检测第64页
     ·慢病毒包装、浓缩及感染第64-65页
     ·Western Blot免疫印迹第65-68页
     ·IL-17A ELISA第68-69页
     ·定量PCR(qPCR)反应第69-71页
     ·统计学分析第71-72页
第三章 实验结果第72-97页
 第一节 miR-20b的表达检测第72-74页
     ·miR-20b在EAE小鼠中表达下降第72-73页
     ·miR-20b在体外分化Th17细胞中表达下降第73-74页
 第二节 预测、鉴定miR-20b的靶基因第74-79页
     ·miR-20b的靶基因预测第74页
     ·miR-20b抑制靶基因的表达第74-79页
 第三节 miR-20b在体外抑制Th17细胞的分化第79-83页
     ·miR-20b在体外对Th17细胞增殖和凋亡的影响第79-80页
     ·miR-20b在体外可以抑制Th17细胞的分化第80-83页
 第四节 miR-20b抑制EAE疾病进程第83-90页
     ·慢病毒载体LV-ctrl及LV-miR-20b的表达检测第83页
     ·慢病毒感染小鼠后miR-20b表达的检测第83-85页
     ·慢病毒感染小鼠后免疫细胞构成的检测第85-88页
     ·miR-20b抑制EAE发病进程第88-90页
 第五节 miR-20b在体内抑制Th17细胞的产生第90-93页
     ·miR-20b可以减少CD4+T细胞在CNS中的浸润第90-93页
 第六节 miR-20b在体内通过抑制靶基因表达抑制Th17细胞的产生和EAE疾病进程第93-97页
     ·miR-20b可以抑制EAE小鼠RORγt和STAT3的表达第93-94页
     ·miR-20b可能通过抑制RORγt和STAT3的表达减缓小鼠EAE发病进程第94-97页
第四章 讨论与总结第97-100页
参考文献第100-122页
致谢第122-123页
个人简历在学期间发表的学术论文及研究成果第123页

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