| 主要英文缩写对照表 | 第1-12页 |
| 中文摘要 | 第12-14页 |
| Abstract | 第14-16页 |
| 引言 | 第16页 |
| 1. 发病历史回顾 | 第16页 |
| 2. 病原学 | 第16-20页 |
| ·病原类属 | 第16-18页 |
| ·病毒结构特点和生物学特性 | 第18-20页 |
| ·猪圆环病毒的基因结构特点 | 第18-19页 |
| ·猪圆环病毒的形态学特性 | 第19页 |
| ·猪圆环病毒的理化特性 | 第19-20页 |
| ·病毒的增殖特性 | 第20页 |
| 3. 流行病学 | 第20-24页 |
| ·PCV的宿主 | 第21-22页 |
| ·PCV的传播途径 | 第22页 |
| ·PCV的传播特点 | 第22-24页 |
| 4. 致病机制及相关疾病 | 第24-30页 |
| ·致病机制 | 第24-27页 |
| ·PCV相关疾病 | 第27-30页 |
| ·PMWS | 第27-28页 |
| ·PDNS | 第28-29页 |
| ·PNP | 第29页 |
| ·CT | 第29-30页 |
| ·母猪繁殖障碍 | 第30页 |
| ·PRDC | 第30页 |
| 5. 分子生物学 | 第30-33页 |
| ·病毒基因组结构 | 第30-31页 |
| ·结构蛋白 | 第31-32页 |
| ·病毒的变异 | 第32-33页 |
| 6. 免疫学 | 第33-35页 |
| ·免疫机制 | 第33-34页 |
| ·免疫抑制机制 | 第34-35页 |
| 7. 检测方法现状 | 第35-41页 |
| ·病毒分离 | 第36页 |
| ·电镜法 | 第36页 |
| ·PCR法 | 第36-37页 |
| ·免疫组织化学检测技术 | 第37页 |
| ·免疫荧光技术 | 第37-38页 |
| ·原位杂交方法 | 第38页 |
| ·酶联免疫吸附实验 | 第38-41页 |
| 试验一 PCV2-ORF2基因克隆与蛋白的表达与鉴定 | 第41-55页 |
| 1. 材料与方法 | 第41-51页 |
| ·材料及仪器设备 | 第41-42页 |
| ·血清及抗体 | 第41页 |
| ·试剂及耗材 | 第41页 |
| ·质粒及受体菌 | 第41-42页 |
| ·主要仪器及设备 | 第42页 |
| ·试剂配制及方法建立 | 第42-51页 |
| ·主要试剂的配制 | 第42-45页 |
| ·PCV2模版DNA的提取 | 第45页 |
| ·引物设计 | 第45-46页 |
| ·重组克隆质粒转化至大肠杆菌感受态细胞 | 第46-47页 |
| ·重组质粒的PCR及双酶切鉴定 | 第47页 |
| ·重组质粒的测序及结果分析 | 第47页 |
| ·原核表达质粒的构建 | 第47页 |
| ·重组质粒的诱导表达 | 第47-48页 |
| ·SDS-PAGE蛋白电泳分析 | 第48-49页 |
| ·诱导表达条件的优化 | 第49-50页 |
| ·目的蛋白的Western-blot鉴定 | 第50页 |
| ·目的蛋白的大量表达 | 第50-51页 |
| ·目的蛋白的纯化 | 第51页 |
| 2. 结果 | 第51-53页 |
| ·重组表达质粒的PCR及酶切鉴定 | 第51-52页 |
| ·目的基因的诱导表达 | 第52-53页 |
| ·原核表达蛋白的Western-Blot鉴定 | 第53页 |
| 3. 讨论与小结 | 第53-55页 |
| 试验二 抗PCV2-ORF2蛋白检测猪血清间接酶联免疫方法(I-ELISA)的建立 | 第55-62页 |
| 1. 材料与方法 | 第55-57页 |
| ·材料 | 第55页 |
| ·试剂及配制 | 第55-56页 |
| ·间接ELISA试验参数的优化 | 第56-57页 |
| ·抗原包被浓度与血清最佳稀释度的选择 | 第56页 |
| ·包被液的选择 | 第56-57页 |
| ·抗原包被条件的确定 | 第57页 |
| ·血清最佳反应时间的确定 | 第57页 |
| ·底物最佳反应时间的确定 | 第57页 |
| ·临界值(cut-off value)的确定 | 第57页 |
| ·间接ELISA的操作程序和结果判定 | 第57页 |
| ·间接ELISA的特异性试验和重复性试验 | 第57页 |
| 2. 结果 | 第57-60页 |
| ·抗原最佳包被量和血清最佳稀释度的确定 | 第57-58页 |
| ·包被液的确定 | 第58页 |
| ·抗原包被条件的确定 | 第58-59页 |
| ·血清最佳反应时间的确定 | 第59页 |
| ·底物最佳反应时间的确定 | 第59页 |
| ·猪血清PCV2阳性、阴性临界值的确定 | 第59-60页 |
| ·间接ELISA的特异性和重复性试验 | 第60页 |
| 3. 讨论与小结 | 第60-62页 |
| 试验三 间接酶联免疫吸附实验(I-ELISA)检测猪血清抗PCV2抗体 | 第62-67页 |
| 1. 材料与方法 | 第62-64页 |
| ·主要仪器设备 | 第62页 |
| ·试剂及配制 | 第62-63页 |
| ·用于蛋白纯化的溶液的配制 | 第62页 |
| ·ELISA所用溶液 | 第62-63页 |
| ·猪血清 | 第63页 |
| ·试验步骤 | 第63-64页 |
| 2. 结果 | 第64-65页 |
| 3. 讨论与小结 | 第65-67页 |
| 结论 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 作者简介 | 第75-76页 |
