| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-22页 |
| ·组蛋白去乙酰化酶 | 第9-16页 |
| ·组蛋白去乙酰化酶的分类 | 第9-10页 |
| ·组蛋白乙酰化和染色质结构 | 第10-12页 |
| ·组蛋白去乙酰化酶在转录中的作用 | 第12-13页 |
| ·组蛋白去乙酰化酶在转录中的作用方式 | 第12-13页 |
| ·在转录中与组蛋白去乙酰化酶作用的转录因子 | 第13页 |
| ·HDAC 对细胞增生的影响 | 第13页 |
| ·HDAC 与癌症的关系 | 第13-15页 |
| ·组蛋白去乙酰化酶在肿瘤药物研发中的应用 | 第15-16页 |
| ·酵母双杂交系统 | 第16-20页 |
| ·酵母双杂交实验原理 | 第16-17页 |
| ·利用酵母双杂交发现新的蛋白质和蛋白质的新功能 | 第17-18页 |
| ·利用酵母双杂交在细胞体内研究抗原和抗体的相互作用 | 第18页 |
| ·利用酵母双杂交筛选药物的作用位点 | 第18页 |
| ·利用酵母双杂交建立基因组蛋白连锁图 | 第18-19页 |
| ·酵母双杂交系统的优点 | 第19页 |
| ·酵母双杂交系统局限性和存在的问题 | 第19-20页 |
| ·免疫共沉淀 | 第20-21页 |
| ·免疫共沉淀试验原理 | 第20页 |
| ·免疫共沉淀试验的优缺点 | 第20-21页 |
| ·本实验的主要研究目的及内容 | 第21-22页 |
| 第二章 材料与方法 | 第22-35页 |
| ·实验材料与仪器 | 第22-24页 |
| ·细胞系、质粒、菌株 | 第22页 |
| ·常用分子生物学工具酶及试剂盒 | 第22-23页 |
| ·实验仪器 | 第23-24页 |
| ·试验方法 | 第24-35页 |
| ·免疫共沉淀用溶液的配制 | 第24-25页 |
| ·已知的载体引物 | 第25页 |
| ·酵母双杂交实验流程图 | 第25-26页 |
| ·诱饵质粒载体的构建 | 第26-29页 |
| ·酵母细胞 AH109 感受态的制备 | 第29页 |
| ·酵母细胞 AH109 的转化及 3’-AT 浓度的优化 | 第29-30页 |
| ·“诱饵”质粒 pGBKT7-HDAC1 的对酵母细胞的毒性及自激活效应检测 | 第30页 |
| ·检测幼饵蛋白在酵母中的表达 | 第30-31页 |
| ·AH109(pGBKT7-HDAC)与文库的融合： | 第31-32页 |
| ·阳性杂交克隆的质粒的提取及插入片断的检测 | 第32页 |
| ·重新验证候选克隆 | 第32-33页 |
| ·细胞转染（以 24 孔板为例） | 第33页 |
| ·验证 pCMV-HA- HDAC1 pCMV-Myc- FHL2 的表达 | 第33-34页 |
| ·免疫共沉淀分析 HDAC1 与 FHL2 相互作用的实验 | 第34-35页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第35-42页 |
| ·HELA细胞总 RNA 的提取 | 第35页 |
| ·成功构建诱饵重组载体 PGBKT7-HDAC1 | 第35-37页 |
| ·HDAC1 不具有酵母细胞毒性及自激活活性 | 第37页 |
| ·HDAC1 融合蛋白在酵母细胞中获得表达 | 第37-38页 |
| ·从 HELA CDNA 文库中筛选出与 HDAC1 相互作用的蛋白 | 第38-39页 |
| ·阳性杂交克隆的 PGADT7-CDNA 质粒的提取及插入片断的检测 | 第39-40页 |
| ·HDAC1 和 FHL2 在真核细胞中有表达 | 第40页 |
| ·免疫共沉淀证明 HDAC1 与 FHL2 有相互作用 | 第40-42页 |
| 第四章 实验结论 | 第42-44页 |
| 参考文献 | 第44-48页 |
| 致谢 | 第48页 |
