| 中文摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 综述部分 | 第10-22页 |
| 一、EMT的研究进展 | 第10-18页 |
| 1. EMT的概念 | 第10-11页 |
| 2. EMT的分类 | 第11-12页 |
| 3. EMT的作用机制 | 第12-16页 |
| ·诱导EMT发生的关键因素 | 第12页 |
| ·与EMT发生有的关信号通路 | 第12-15页 |
| ·调控EMT的转录因子 | 第15-16页 |
| 4. EMT在肿瘤发生发展过程中的作用 | 第16页 |
| 5. EMT在器官纤维化中的作用 | 第16-18页 |
| ·EMT在肝纤维化中的作用 | 第16-17页 |
| ·EMT在肺纤维化中的作用 | 第17页 |
| ·EMT在肾纤维化中的作用 | 第17-18页 |
| 二、microRNA在EMT过程中的作用 | 第18-21页 |
| 1. miRNA的作用机制 | 第18-19页 |
| 2. miRNA调节EMT的机制 | 第19-21页 |
| ·miRNA 调节 E-cadherin 表达 | 第19-20页 |
| ·miRNA与TGF-β/Smads信号通路 | 第20-21页 |
| ·miRNA调节RhoA/ROCK信号通路 | 第21页 |
| 三、本论文的研究思路 | 第21-22页 |
| 参考文献 | 第22-26页 |
| 实验部分 | 第26-47页 |
| 一、引言 | 第26页 |
| 二、实验仪器和材料 | 第26-28页 |
| 1. 实验仪器 | 第26-27页 |
| 2. 实验材料 | 第27-28页 |
| 三、实验方法 | 第28-34页 |
| 1. 荧光素酶报告载体的构建 | 第28-30页 |
| ·重组荧光素酶报告载体构建 | 第28-29页 |
| ·突变荧光素酶报告载体构建 | 第29-30页 |
| 2. 细胞内荧光素酶测定 | 第30-31页 |
| ·细胞转染 | 第30页 |
| ·Luciferase 测定 | 第30-31页 |
| ·β-gal测定 | 第31页 |
| 3. 细胞划痕实验 | 第31页 |
| 4. Western-blot | 第31-33页 |
| ·细胞蛋白提取 | 第31-32页 |
| ·制胶 | 第32页 |
| ·转膜(湿法) | 第32页 |
| ·免疫标记及显影 | 第32-33页 |
| 5. RNA 提取及 Q-PCR | 第33-34页 |
| ·细胞RNA的提取 | 第33页 |
| ·逆转录体系(20μL)TaKaRa试剂盒 | 第33页 |
| ·Q-PCR体系(20μL)TaKaRa试剂盒 | 第33-34页 |
| 四、实验结果 | 第34-45页 |
| 1. TGF-β诱导肝细胞发生EMT | 第34-35页 |
| 2. miR-30和miR-101在TGF-β1诱导的肝细胞EMT过程中表达下调 | 第35-36页 |
| 3. miR-30调控Snail1表达的作用机制 | 第36-38页 |
| 4. miR-101调控ZEB1表达的作用机制 | 第38-40页 |
| 5. miR-30抑制TGF-β诱导的肝细胞EMT | 第40-41页 |
| 6. miR-101抑制TGF-β诱导的肝细胞EMT | 第41-43页 |
| 7. miR30、miR101抑制TGF-β诱导的肝细胞的迁移 | 第43-45页 |
| 五、小结与讨论 | 第45-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
