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猪流行性腹泻病毒间接ELISA抗体检测方法的建立与应用及Nsp2蛋白单克隆抗体的制备

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-12页
第一篇 文献综述第12-34页
 第一章 猪流行性腹泻病毒的研究进展第12-34页
  1 病毒基本特性第12-15页
   ·病毒理化与培养特性第12-15页
  2 流行情况第15-17页
  3 病毒基因组结构与蛋白功能第17-19页
   ·病毒基因组结构第17-18页
   ·病毒蛋白功能第18-19页
  4 诊断技术第19-23页
   ·临床诊断及病理组织变化第19-20页
   ·实验室诊断方法第20-23页
  5 免疫与预防第23-24页
   ·PEDV灭活疫苗第23页
   ·PEDV弱毒疫苗第23-24页
  6 控制方法第24-26页
   ·加强饲养管理第24页
   ·返饲治疗第24-25页
   ·疫苗注射治疗第25-26页
  参考文献第26-34页
第二篇 研究内容第34-92页
 第二章 猪流行性腹泻病毒全病毒抗原间接ELISA抗体检测方法的建立与初步应用第34-48页
  摘要第34页
  1 材料与方法第34-37页
   ·材料第34-35页
   ·方法第35-37页
  2 结果第37-44页
   ·间接ELISA方法的建立及条件优化结果第37-40页
   ·间接ELISA阴阳性判定标准的建立第40-41页
   ·特异性试验第41页
   ·敏感性试验第41-42页
   ·重复性试验第42-43页
   ·符合率分析第43页
   ·临床血清样品的检测第43-44页
  3 讨论第44-45页
  参考文献第45-46页
  ABSTRACT第46-48页
 第三章 猪流行性腹泻病毒N蛋白间接ELISA抗体检测方法的建立与初步应用第48-72页
  摘要第48-49页
  1 材料与方法第49-57页
   ·材料第49页
   ·方法第49-57页
  2 结果第57-69页
   ·N基因的扩增第57-58页
   ·重组质粒酶切鉴定第58页
   ·重组N蛋白SDS-PAGE结果第58-59页
   ·表达产物Western-blotting鉴定结果第59-60页
   ·重组N蛋白可溶性检测第60页
   ·重组N蛋白表达条件优化第60-61页
   ·重组N蛋白的纯化第61-62页
   ·间接ELISA方法的建立及条件优化结果第62-65页
   ·间接ELISA阴阳性判定标准的建立第65-66页
   ·特异性试验第66页
   ·敏感性试验第66页
   ·重复性试验第66-67页
   ·符合率分析第67-68页
   ·临床血清样品的检测第68-69页
  3 讨论第69-70页
  参考文献第70-71页
  ABSTRACT第71-72页
 第四章 猪流行性腹泻病毒Nsp2基因原核表达与纯化及蛋白单克隆抗体的制备及鉴定第72-92页
  摘要第72-73页
  1 材料与方法第73-82页
   ·材料第73页
   ·方法第73-82页
  2 结果第82-89页
   ·Nsp2基因的扩增第82-83页
   ·重组质粒酶切鉴定第83-84页
   ·Nsp2基因序列测定第84页
   ·重组Nsp2蛋白SDS-PAGE电泳结果第84页
   ·表达产物Western-blotting鉴定结果第84-85页
   ·重组Nsp2蛋白可溶性检测第85-86页
   ·重组Nsp2蛋白表达条件优化第86-87页
   ·重组Nsp2蛋白的纯化第87页
   ·杂交瘤细胞株的建立和抗体效价的测定第87-88页
   ·单克隆抗体与原核表达蛋白反应的特异性鉴定第88页
   ·杂交瘤细胞株分泌MAb的稳定性鉴定第88-89页
  3 讨论第89-90页
  参考文献第90-91页
  ABSTRACT第91-92页
全文总结第92-94页
致谢第94-96页
附录第96-98页

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