苯脲类除草剂伏草隆免疫检测方法的研究
| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-9页 |
| 1 前言 | 第9-17页 |
| ·我国农药残留现状 | 第9-11页 |
| ·农药残留的危害 | 第9-10页 |
| ·农药残留的控制措施 | 第10-11页 |
| ·ELISA方法和胶体金免疫层析试纸条方法简介 | 第11-12页 |
| ·ELISA方法简介 | 第11-12页 |
| ·胶体金免疫层析试纸条简介 | 第12页 |
| ·苯脲类残留的检测方法及研究进展 | 第12-16页 |
| ·大型仪器检测的方法 | 第13页 |
| ·免疫学检测方法 | 第13页 |
| ·国内外苯脲类检测技术及最新进展 | 第13-14页 |
| ·伏草隆概述及其研究进展 | 第14-16页 |
| ·本课题的研究目的及意义 | 第16页 |
| ·本课题的研究内容 | 第16-17页 |
| 2 材料和方法 | 第17-30页 |
| ·实验材料 | 第17-19页 |
| ·主要药品和试剂 | 第17-18页 |
| ·主要仪器和设备 | 第18页 |
| ·待测样品 | 第18-19页 |
| ·实验常用溶液的配制 | 第19页 |
| ·实验方法 | 第19-30页 |
| ·半抗原的设计与合成 | 第19-21页 |
| ·半抗原与蛋白的偶联 | 第21-22页 |
| ·多克隆抗体制备 | 第22-23页 |
| ·直接竞争ELISA方法实验条件优化 | 第23-24页 |
| ·直接竞争ELIA方法标准曲线的建立 | 第24页 |
| ·交叉反应率的测定 | 第24-25页 |
| ·添加回收实验 | 第25页 |
| ·直接竞争ELISA方法的验证 | 第25页 |
| ·直接竞争ELISA方法的精密度 | 第25-26页 |
| ·胶体金及胶体金探针的制备 | 第26-27页 |
| ·胶体金免疫试纸条方法层析条件的选择 | 第27-29页 |
| ·免疫层析试纸条检测限的确定 | 第29页 |
| ·免疫层析试纸条方法特异性的测定 | 第29页 |
| ·胶体金免疫试纸条应用于水样的检测 | 第29-30页 |
| 3 结果与讨论 | 第30-48页 |
| ·半抗原的鉴定 | 第30-31页 |
| ·半抗原Hapten A的结构鉴定 | 第30页 |
| ·半抗原Hapten B的结构鉴定 | 第30-31页 |
| ·抗体的制备 | 第31-32页 |
| ·抗血清效价与亲和力的测定 | 第31页 |
| ·抗血清的纯化 | 第31-32页 |
| ·直接竞争ELISA方法实验条件优化 | 第32-35页 |
| ·包被量的优化和酶标稀释倍数的优化 | 第32页 |
| ·封闭液选择的优化 | 第32-33页 |
| ·缓冲液pH值对ELISA的影响 | 第33-34页 |
| ·离子浓度的选择对ELISA的影响 | 第34页 |
| ·直接竞争ELISA方法标准曲线的建立 | 第34-35页 |
| ·交叉反应率的测定 | 第35-36页 |
| ·实际样品的检测 | 第36-37页 |
| ·实际水样(井水、自来水、海河水)的添加回收 | 第36-37页 |
| ·高效液相色谱方法的验证 | 第37-38页 |
| ·直接竞争ELISA方法的精密度 | 第38-39页 |
| ·板内变异 | 第38页 |
| ·板间变异 | 第38-39页 |
| ·胶体金的制备 | 第39-40页 |
| ·制备金标抗体最佳条件的优化 | 第40-41页 |
| ·胶体金连接抗体时pH的选择 | 第40页 |
| ·胶体金连接抗体量的选择 | 第40-41页 |
| ·层析条件的优化 | 第41-42页 |
| ·金标抗体稀释倍数的选择 | 第41页 |
| ·包被原稀释液的选择 | 第41-42页 |
| ·免疫层析试纸条组成材料的优化 | 第42-44页 |
| ·硝酸纤维素膜处理条件的选择 | 第42页 |
| ·样品垫处理条件的选择 | 第42-43页 |
| ·有机溶剂对检测限的影响 | 第43-44页 |
| ·免疫层析试纸条检测限的确定 | 第44页 |
| ·免疫层析试纸条方法特异性的测定 | 第44-45页 |
| ·实际水样的检测 | 第45页 |
| ·ELISA方法对免疫层析试纸条的验证 | 第45-46页 |
| ·试纸条的稳定性 | 第46-48页 |
| 4 结论 | 第48-49页 |
| 5 展望 | 第49-50页 |
| 6 参考文献 | 第50-56页 |
| 7 攻读硕士期间所发表论文 | 第56-57页 |
| 8 致谢 | 第57页 |
