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坦布苏病毒的分离鉴定及荧光定量RT-PCR检测方法的建立与应用

符号说明第1-9页
中文摘要第9-11页
Abstract第11-14页
1 前言第14-33页
   ·坦布苏病毒的一般生物学特性第14-16页
     ·分类学地位与形态学第14-15页
     ·理化特性第15页
     ·培养特性第15-16页
     ·主要症状第16页
     ·主要病理变化第16页
   ·坦布苏病毒的流行病学研究第16-17页
   ·坦布苏病毒的分子生物学研究第17-22页
     ·坦布苏病毒与其他黄病毒属病毒的基因组同源性比较第17-20页
     ·黄病毒属病毒主要蛋白研究进展第20-22页
   ·坦布苏病毒诊断方法的研究进展第22-25页
     ·坦布苏病毒的分离与鉴定第22页
     ·坦布苏病毒血清学检测方法第22-23页
     ·坦布苏病毒分子生物学检测技术第23-25页
   ·荧光定量检测方法的研究进展第25-32页
     ·实时荧光定量 RT-PCR 的定量原理第25-26页
     ·实时荧光定量 PCR 的基本概念第26-27页
     ·实时荧光定量的探针种类及工作原理第27-30页
     ·实时荧光定量的定量方法第30-31页
     ·实时荧光定量检测方法在畜牧生产中的应用第31-32页
   ·本研究的目的及意义第32-33页
2 材料与方法第33-45页
   ·材料第33页
     ·病料与试验动物第33页
     ·主要试剂第33页
     ·主要仪器第33页
   ·方法第33-45页
     ·主要溶剂的配置第33-35页
     ·坦布苏病毒的分离鉴定第35-40页
     ·SYBR GreenⅠ荧光定量 RT-PCR 检测坦布苏病毒 NS5 和 E 基因方法的建立第40-43页
     ·坦布苏病毒在雏鸭各组织中的分布情况第43-44页
     ·坦布苏病毒在蛋鸡各组织中的分布情况第44-45页
3 结果与分析第45-63页
   ·坦布苏病毒分离鉴定结果第45-51页
     ·坦布苏病毒 NS3 基因 RT-PCR 扩增结果第45页
     ·TMUV NS3 基因的克隆测序及序列分析第45-47页
     ·坦布苏病毒的培养特性第47-48页
     ·坦布苏病毒 SDLZ 株的毒力测定第48-49页
     ·动物回归试验第49-50页
     ·雏鸭人工感染 TMUV 后的病理组织学研究第50-51页
   ·坦布苏病毒荧光定量 PCR 检测方法的建立与应用第51-57页
     ·重组质粒的 PCR 鉴定及其测序鉴定第51页
     ·荧光定量 PCR 反应条件的优化第51-52页
     ·荧光定量 PCR 检测β-actin、NS5、E 基因标准曲线的建立第52-53页
     ·特异性试验结果第53-54页
     ·敏感性试验结果第54-55页
     ·重复性试验结果第55-56页
     ·临床样品检测第56-57页
   ·雏鸭各组织中坦布苏病毒表达水平的相对荧光定量 PCR 分析第57-61页
     ·攻毒后雏鸭的主要临床症状和剖检病变第57-58页
     ·荧光定量 RT-PCR 方法检测 TMUV 在感染雏鸭体内的分布情况第58-60页
     ·荧光定量 PCR 方法与地高辛探针检测方法的比较第60-61页
   ·蛋鸡各组织中坦布苏病毒表达水平的相对荧光定量 PCR 分析第61-63页
     ·荧光定量 RT-PCR 方法检测 TMUV 在感染蛋鸡体内的分布情况第61页
     ·荧光定量 PCR 方法与地高辛探针检测方法的比较第61-63页
4 讨论第63-67页
5 结论第67-68页
参考文献第68-80页
致谢第80-81页
攻读学位期间发表论文情况期间第81页

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