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三唑磷降解菌的筛选与降解相关基因的克隆

摘要第1-5页
Abstract第5-7页
目录第7-10页
1 文献综述第10-20页
   ·有机磷农药简介第10-11页
     ·有机磷农药发展现状第10页
     ·三唑磷农药简介第10-11页
   ·有机磷农药使用引起的环境问题第11-14页
     ·有机磷农药对自然环境的污染第11-12页
     ·有机磷农药对农作物的污染及危害第12-13页
     ·有机磷农药对其他生物的污染及危害第13页
     ·有机磷农药对人体的危害第13-14页
   ·有机磷农药在环境中的降解第14-18页
     ·影响农药降解的因素第14-15页
     ·微生物在有机磷农药降解中的应用第15-16页
     ·有机磷农药降解菌的获得与鉴定第16页
     ·降解菌降解有机磷农药的特性第16-17页
     ·有机磷农药降解基因克隆与表达第17-18页
     ·三唑磷农药生物降解的研究进展第18页
   ·农药的微生物降解在本实验室的研究第18-19页
   ·本研究的目的和意义第19-20页
2 材料与方法第20-21页
   ·样品采集第20页
   ·主要培养基及溶液第20页
   ·主要药品试剂第20-21页
     ·主要药品第20页
     ·主要试剂第20页
     ·主要仪器第20-21页
3 试验方法第21-28页
   ·降解菌的富集与分离第21页
   ·降解菌的鉴定第21-23页
     ·菌落形态及菌体形态观察第21页
     ·生理生化实验第21页
     ·CTAB法提取基因组DNA第21-22页
     ·16S rDNA序列分析第22页
     ·基因注册与遗传分析第22-23页
   ·环境因素对降解菌生长的影响第23-24页
     ·pH对菌株生长的影响第23页
     ·培养温度对菌株生长的影响第23页
     ·TAP初始浓度对菌株生长的影响第23页
     ·接种量对菌株生长的影响第23-24页
   ·降解能力相关测定第24-25页
     ·菌株对TAP降解的一级反应动力学研究第24页
     ·细胞表面亲疏水性试验第24-25页
   ·降解相关基因的克隆及其侧翼序列的扩增第25-28页
     ·降解相关基因的克隆第25页
     ·降解相关基因侧翼序列的扩增第25-28页
4 结果与分析第28-42页
   ·降解菌的富集与分离第28-29页
   ·降解菌的鉴定第29-30页
   ·降解菌16S rDNA序列分析第30-32页
   ·环境因素对降解菌生长的影响第32-35页
     ·pH值对降解菌生长的影响第32-33页
     ·温度对降解菌生长的影响第33-34页
     ·TAP初始浓度对降解菌生长的影响第34页
     ·不同接种量对降解菌生长的影响第34-35页
   ·菌株对TAP降解速率的测定第35-36页
     ·pnp浓度与OD_(405)之间关系的标准曲线第35页
     ·菌株对TAP降解的一级反应动力学研究第35-36页
   ·细胞表面亲疏水性试验第36-37页
   ·降解相关基因的克隆与侧翼序列的扩增第37-42页
     ·降解相关基因的扩增第37-38页
     ·降解相关基因侧翼序列的扩增第38-42页
5 结论与讨论第42-45页
   ·结论第42页
   ·讨论第42-45页
     ·降解菌分离的意义第42-43页
     ·野生型降解菌与降解工程菌第43-44页
     ·SEFA PCR侧翼序列扩增的可靠性第44-45页
6 不足与展望第45-46页
参考文献第46-51页
附录1 培养基的配方第51-53页
附录2 缓冲液配方第53-56页
附录3 主要试剂和仪器第56-58页
附录4 降解菌TDB-1 16S rDNA序列第58-59页
附录5 扩增得到降解相关基因序列第59-60页
附录6 步移结果进行拼接后获得序列第60-61页
附录7 符号与缩略语说明第61-62页
硕士期间主要的研究成果第62-63页
致谢第63-64页
作者简介第64页

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