三唑磷降解菌的筛选与降解相关基因的克隆
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-20页 |
| ·有机磷农药简介 | 第10-11页 |
| ·有机磷农药发展现状 | 第10页 |
| ·三唑磷农药简介 | 第10-11页 |
| ·有机磷农药使用引起的环境问题 | 第11-14页 |
| ·有机磷农药对自然环境的污染 | 第11-12页 |
| ·有机磷农药对农作物的污染及危害 | 第12-13页 |
| ·有机磷农药对其他生物的污染及危害 | 第13页 |
| ·有机磷农药对人体的危害 | 第13-14页 |
| ·有机磷农药在环境中的降解 | 第14-18页 |
| ·影响农药降解的因素 | 第14-15页 |
| ·微生物在有机磷农药降解中的应用 | 第15-16页 |
| ·有机磷农药降解菌的获得与鉴定 | 第16页 |
| ·降解菌降解有机磷农药的特性 | 第16-17页 |
| ·有机磷农药降解基因克隆与表达 | 第17-18页 |
| ·三唑磷农药生物降解的研究进展 | 第18页 |
| ·农药的微生物降解在本实验室的研究 | 第18-19页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-21页 |
| ·样品采集 | 第20页 |
| ·主要培养基及溶液 | 第20页 |
| ·主要药品试剂 | 第20-21页 |
| ·主要药品 | 第20页 |
| ·主要试剂 | 第20页 |
| ·主要仪器 | 第20-21页 |
| 3 试验方法 | 第21-28页 |
| ·降解菌的富集与分离 | 第21页 |
| ·降解菌的鉴定 | 第21-23页 |
| ·菌落形态及菌体形态观察 | 第21页 |
| ·生理生化实验 | 第21页 |
| ·CTAB法提取基因组DNA | 第21-22页 |
| ·16S rDNA序列分析 | 第22页 |
| ·基因注册与遗传分析 | 第22-23页 |
| ·环境因素对降解菌生长的影响 | 第23-24页 |
| ·pH对菌株生长的影响 | 第23页 |
| ·培养温度对菌株生长的影响 | 第23页 |
| ·TAP初始浓度对菌株生长的影响 | 第23页 |
| ·接种量对菌株生长的影响 | 第23-24页 |
| ·降解能力相关测定 | 第24-25页 |
| ·菌株对TAP降解的一级反应动力学研究 | 第24页 |
| ·细胞表面亲疏水性试验 | 第24-25页 |
| ·降解相关基因的克隆及其侧翼序列的扩增 | 第25-28页 |
| ·降解相关基因的克隆 | 第25页 |
| ·降解相关基因侧翼序列的扩增 | 第25-28页 |
| 4 结果与分析 | 第28-42页 |
| ·降解菌的富集与分离 | 第28-29页 |
| ·降解菌的鉴定 | 第29-30页 |
| ·降解菌16S rDNA序列分析 | 第30-32页 |
| ·环境因素对降解菌生长的影响 | 第32-35页 |
| ·pH值对降解菌生长的影响 | 第32-33页 |
| ·温度对降解菌生长的影响 | 第33-34页 |
| ·TAP初始浓度对降解菌生长的影响 | 第34页 |
| ·不同接种量对降解菌生长的影响 | 第34-35页 |
| ·菌株对TAP降解速率的测定 | 第35-36页 |
| ·pnp浓度与OD_(405)之间关系的标准曲线 | 第35页 |
| ·菌株对TAP降解的一级反应动力学研究 | 第35-36页 |
| ·细胞表面亲疏水性试验 | 第36-37页 |
| ·降解相关基因的克隆与侧翼序列的扩增 | 第37-42页 |
| ·降解相关基因的扩增 | 第37-38页 |
| ·降解相关基因侧翼序列的扩增 | 第38-42页 |
| 5 结论与讨论 | 第42-45页 |
| ·结论 | 第42页 |
| ·讨论 | 第42-45页 |
| ·降解菌分离的意义 | 第42-43页 |
| ·野生型降解菌与降解工程菌 | 第43-44页 |
| ·SEFA PCR侧翼序列扩增的可靠性 | 第44-45页 |
| 6 不足与展望 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-51页 |
| 附录1 培养基的配方 | 第51-53页 |
| 附录2 缓冲液配方 | 第53-56页 |
| 附录3 主要试剂和仪器 | 第56-58页 |
| 附录4 降解菌TDB-1 16S rDNA序列 | 第58-59页 |
| 附录5 扩增得到降解相关基因序列 | 第59-60页 |
| 附录6 步移结果进行拼接后获得序列 | 第60-61页 |
| 附录7 符号与缩略语说明 | 第61-62页 |
| 硕士期间主要的研究成果 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 作者简介 | 第64页 |