| 中文摘要 | 第1-13页 |
| Abstract | 第13-15页 |
| 缩略词表 | 第15-18页 |
| 前言 | 第18-24页 |
| 第一章 CD39+调节性T细胞的表型及功能 | 第24-38页 |
| 一、材料 | 第24-27页 |
| (一) 检测对象 | 第24-25页 |
| (二) 主要试剂 | 第25-26页 |
| (三) 主要仪器 | 第26页 |
| (四) 主要溶液配制 | 第26-27页 |
| 二、方法和步骤 | 第27-32页 |
| (一) Ficoll密度梯度离心法分离外周血PBMC | 第27-28页 |
| (二) 流式细胞术测外周血调节性T细胞亚型 | 第28-29页 |
| (三) 调节性T细胞抑制功能实验 | 第29-31页 |
| (四) 放射性氢三测细胞增殖 | 第31页 |
| (五) 双抗夹心法检测培养上清细胞因子含量 | 第31-32页 |
| (六) 统计学分析方法 | 第32页 |
| 三、结果 | 第32-36页 |
| (一) 在CD4+T细胞中,CD39表达和CD25表达正相关 | 第32-34页 |
| (二) CD39+CD4+CD25++和CD39-CD4+CD25++体外抑制功能比较 | 第34-36页 |
| 四、讨论 | 第36-38页 |
| 第二章 CD4+CD25++T细胞的亚型分析 | 第38-57页 |
| 一、材料 | 第39-40页 |
| (一) 检测对象 | 第39页 |
| (二) 主要试剂 | 第39-40页 |
| (三) 主要仪器 | 第40页 |
| 二、方法和步骤 | 第40-46页 |
| (一) Ficoll密度梯度离心法分离外周血PBMC | 第40页 |
| (二) 流式细胞术测外周血调节性T细胞亚型 | 第40-42页 |
| (三) 荧光定量PCR检测各亚群表达Foxp3型mRNA水平 | 第42-46页 |
| (四) 统计学分析 | 第46页 |
| 三、结果 | 第46-55页 |
| (一) CD4+CD25++T细胞含有3个不同的亚群 | 第46-47页 |
| (二) 3个亚群表型分析 | 第47-49页 |
| (三) 3个亚群Foxp3型表达分析 | 第49-52页 |
| (四) 3个亚群增殖及分泌细胞因子情况分析 | 第52-55页 |
| 四、讨论 | 第55-57页 |
| 第三章 CD4+CD25++T细胞各亚群抑制功能分析 | 第57-64页 |
| 一、材料 | 第57页 |
| (一) 检测对象 | 第57页 |
| (二) 主要试剂 | 第57页 |
| (三) 主要仪器 | 第57页 |
| 二、方法和步骤 | 第57-58页 |
| (一) 调节性T细胞抑制功能实验 | 第57-58页 |
| (二) 统计学分析方法 | 第58页 |
| 三、结果 | 第58-62页 |
| (一) 3个亚群对效应T细胞抑制作用 | 第58-60页 |
| (二) 调节性T细胞(G2,G3)在抑制细胞增殖和细胞因子分泌的关系 | 第60页 |
| (三) 比较效应性调节性T细胞(G2)和幼稚型调节性T细胞(G3) | 第60-62页 |
| 四、讨论 | 第62-64页 |
| 第四章 预活化Naive调节性T细胞可显著增强其抑制功能 | 第64-70页 |
| 一、材料 | 第64页 |
| (一) 检测对象 | 第64页 |
| (二) 主要试剂 | 第64页 |
| (三) 主要仪器 | 第64页 |
| 二、方法和步骤 | 第64-65页 |
| (一) 纯化细胞 | 第64页 |
| (二) 预活化G3细胞 | 第64-65页 |
| (三) 调节性T细胞抑制功能实验 | 第65页 |
| (四) 统计学分析方法 | 第65页 |
| 三、结果 | 第65-68页 |
| (一) 预活化后G3细胞表型变化 | 第65页 |
| (二) 活化后G3的抑制功能测定 | 第65-68页 |
| 四、讨论 | 第68-70页 |
| 第五章 将Naive调节性T细胞在体外扩增转化为效应调节性T细胞 | 第70-77页 |
| 一、材料 | 第70页 |
| (一) 检测对象 | 第70页 |
| (二) 主要试剂 | 第70页 |
| (三) 主要仪器 | 第70页 |
| 二、方法和步骤 | 第70-72页 |
| (一) 纯化细胞 | 第70-71页 |
| (二) 体外诱导扩增调节性T细胞 | 第71-72页 |
| (三) 调节性T细胞抑制功能实验 | 第72页 |
| (四) 重复刺激括增后的G3细胞表型测定 | 第72页 |
| (五) 统计学分析方法 | 第72页 |
| 三、结果 | 第72-76页 |
| (一) 重复刺激后表型变化 | 第72-73页 |
| (二) 诱导扩增后的抑制功能 | 第73-76页 |
| 四、讨论 | 第76-77页 |
| 第六章 幼稚型和效应型调节性T细胞基因表达谱 | 第77-89页 |
| 一、材料 | 第77页 |
| (一) 检测对象 | 第77页 |
| (二) 主要试剂 | 第77页 |
| (三) 主要仪器 | 第77页 |
| 二、方法和步骤 | 第77-78页 |
| (一) 纯化细胞 | 第77页 |
| (二) 细胞总RNA抽提及质检 | 第77-78页 |
| (三) Affymetric GeneChip Analysis | 第78页 |
| (四) 分析方法 | 第78页 |
| 三、结果 | 第78-88页 |
| (一) G2、G3、Tresp细胞群PCA分析 | 第78-79页 |
| (二) G2、G3、Tresp细胞群基因表达谱热力图分析 | 第79-80页 |
| (三) G2、G3、Tresp细胞群主要差异基因热力图分析 | 第80页 |
| (四) G2、G3、Tresp细胞群主要差异基因分析 | 第80-83页 |
| (五) G2、G3细胞群主要差异基因信号通路分析 | 第83-88页 |
| 四、讨论 | 第88-89页 |
| 第七章 调节性T细胞TCR受体库高通量测序分析 | 第89-99页 |
| 一、材料 | 第89-90页 |
| (一) 检测对象 | 第89页 |
| (二) 主要试剂 | 第89页 |
| (三) 主要仪器 | 第89页 |
| (四) 主要溶液配置 | 第89-90页 |
| 二、方法和步骤 | 第90-92页 |
| (一) 纯化细胞 | 第90页 |
| (二) 细胞总RNA抽提及质检 | 第90页 |
| (三) cDNA合成及TCRbeta谱测序 | 第90-91页 |
| (四) 分析方法 | 第91-92页 |
| 三、结果 | 第92-97页 |
| (一) 比较同一样本克隆的重复性 | 第92-93页 |
| (二) G1、G2、G3和Tresp细胞TCR beta CDR3核酸序列表达及相互关系 | 第93-94页 |
| (三) G1、G2、G3和Tresp细胞TCR beta CDR3氨基酸表达及相互关系 | 第94-95页 |
| (四) G1、G2、G3和Tresp细胞TCR beta CDR3表达谱 | 第95-96页 |
| (五) G1、G2、G3和Tresp间克隆覆盖率比较 | 第96-97页 |
| 四、讨论 | 第97-99页 |
| 第八章 强直性脊柱炎患者调节性T细胞的比例和功能测定 | 第99-108页 |
| 一、材料 | 第100页 |
| (一) 检测对象 | 第100页 |
| (二) 主要试剂 | 第100页 |
| (三) 主要仪器 | 第100页 |
| 二、方法和步骤 | 第100-101页 |
| (一) 流式细胞术测定调节性T细胞比例 | 第100页 |
| (二) AS患者中CD4+CD25++各亚群功能测定 | 第100页 |
| (三) 统计学分析方法 | 第100-101页 |
| 三、结果 | 第101-106页 |
| (一) CD4+CD25++各亚群比例测定 | 第101-103页 |
| (二) G1细胞的在AS患者中的表型和功能测定 | 第103-104页 |
| (三) G2细胞在AS患者中的功能测定 | 第104-105页 |
| (四) G3细胞在AS患者中的功能测定 | 第105页 |
| (五) 比较G2、G3抑制功能的相关性 | 第105-106页 |
| 四、讨论 | 第106-108页 |
| 全文总结 | 第108-110页 |
| 参考文献 | 第110-112页 |
| 文献综述 | 第112-129页 |
| 参考文献 | 第122-129页 |
| 在读期间发表论文及参加科研情况 | 第129-130页 |
| 致谢 | 第130页 |
