| 致谢 | 第1-9页 |
| 中文摘要 | 第9-10页 |
| 第一部分 文献综述 | 第10-21页 |
| 1 病原学 | 第10-11页 |
| 2 PCV 的分子生物学特性 | 第11-12页 |
| ·PCV 基因组特征 | 第11-12页 |
| 3 PCV 基因组编码蛋白 | 第12-13页 |
| ·REP 蛋白 | 第12页 |
| ·CAP 蛋白 | 第12-13页 |
| ·ORF3 蛋白 | 第13页 |
| 4 流行病学 | 第13-14页 |
| 5 PCV2 的致病机理 | 第14-15页 |
| 6 PCV2 及相关疾病 | 第15-16页 |
| ·断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS) | 第15页 |
| ·猪皮炎肾炎综合征(PDNS) | 第15页 |
| ·猪呼吸道疾病综合征(PRDC) | 第15-16页 |
| ·猪增生性和坏死性肺炎(PNP) | 第16页 |
| ·猪 A2 先天性震颤(CT) | 第16页 |
| ·繁殖障碍 | 第16页 |
| 7 PCV2 检测方法的研究 | 第16-18页 |
| ·电子显微镜检测 | 第16页 |
| ·病毒抗原检测 | 第16-18页 |
| ·聚合酶链式反应（POLYMERASE CHAIN REACTION，PCR） | 第16-17页 |
| ·原位核酸分子杂交技术(IN SITU HYBRIDIZATION,ISH) | 第17页 |
| ·免疫组织化学反应（IMMUNOHISTOCHEMISTRY,IHC） | 第17-18页 |
| ·病毒抗体检测 | 第18页 |
| ·间接免疫荧光(IMMUNOFLUORESCENCE ASSAY, IFA) | 第18页 |
| ·免疫过氧化物酶单层细胞试验(IMMUNOPEROXIDASE MONOLAYER ASSAY,IPMA) | 第18页 |
| ·免疫胶体金技术(IMMUNE COLLOIDAL GOLD TECHNIQUE,ICGT) | 第18页 |
| ·酶联免疫吸附试验(ENZYME-LINKED IMMUNOSORBENT ASSAY, ELISA) | 第18页 |
| 8 PCV2 疫苗的研究进展 | 第18-20页 |
| 9 PCV2 的防制 | 第20页 |
| 10 本研究的目的和意义 | 第20-21页 |
| 第二部分 PCV2-ORF2 蛋的表达与纯化 | 第21-33页 |
| 1 引言 | 第21-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-26页 |
| ·主要仪器和设备 | 第22-23页 |
| ·菌株、血清 | 第23页 |
| ·主要试剂 | 第23页 |
| ·主要试剂的配制 | 第23-24页 |
| ·表达重组蛋白相关试剂 | 第23页 |
| ·纯化蛋白相关试剂 | 第23页 |
| ·SDS-PAGE 电泳相关试剂 | 第23-24页 |
| ·WESTERN-BLOT 相关试剂 | 第24页 |
| ·其他相关试剂 | 第24页 |
| ·重组 CAP 蛋白可溶性表达体系的建立 | 第24-25页 |
| ·菌液 OD600值的选择 | 第24页 |
| ·诱导表达温度的选择 | 第24页 |
| ·IPTG 浓度的选择 | 第24-25页 |
| ·诱导表达时间的选择 | 第25页 |
| ·重组 CAP 蛋白的 SDS-PAGE 的可溶性分析 | 第25页 |
| ·重组 CAP 蛋白的纯化 | 第25-26页 |
| ·菌体裂解 | 第25页 |
| ·镍离子亲和层析 | 第25-26页 |
| ·非还原 SDS-PAGE 电泳 | 第26页 |
| ·纯化 CAP 蛋白的 WESTERN-BLOT | 第26页 |
| 3 结果与分析 | 第26-31页 |
| ·重组 CAP 蛋白可溶性表达体系的建立 | 第26-29页 |
| ·菌液 OD600值的选择 | 第26-27页 |
| ·诱导表达温度的选择 | 第27页 |
| ·IPTG 浓度的选择 | 第27-28页 |
| ·诱导表达时间的选择 | 第28-29页 |
| ·重组 CAP 蛋白的获得 | 第29-30页 |
| ·菌体裂解 | 第29-30页 |
| ·CAP 表达蛋白的纯化 | 第30页 |
| ·非还原 SDS-PAGE 电泳 | 第30-31页 |
| ·纯化 CAP 蛋白的 WESTERN-BLOT 结果 | 第31页 |
| 4 讨论 | 第31-33页 |
| 第三部分 PCV2 抗体间接 ELISA 检测方法的建立 | 第33-41页 |
| 1 引言 | 第33页 |
| 2 材料与方法 | 第33-35页 |
| ·IFA 筛选临床血清 | 第33页 |
| ·常规 ELISA 操作流程 | 第33-34页 |
| ·间接 ELISA 检测方法各个条件的优化 | 第34-35页 |
| ·抗原最佳包被浓度和血清稀释度的确定 | 第34页 |
| ·酶标二抗最佳工作浓度的确定 | 第34页 |
| ·血清最佳反应时间的确定 | 第34页 |
| ·酶标二抗最佳作用时间的确定 | 第34-35页 |
| ·显色时间的确定 | 第35页 |
| ·间接 ELISA 临界值的确定 | 第35页 |
| ·特异性试验 | 第35页 |
| ·重复性试验 | 第35页 |
| ·临床血清样品检测 | 第35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-40页 |
| ·IFA | 第35-36页 |
| ·抗原最佳包被浓度和血清稀释度的确定 | 第36页 |
| ·酶标二抗工作浓度的确定 | 第36页 |
| ·抗原包被液的确定 | 第36-37页 |
| ·最佳血清反应时间和二抗作用时间的确定 | 第37页 |
| ·TMB 底物反应时间的确定 | 第37-38页 |
| ·ELISA 临界值的判定结果 | 第38页 |
| ·特异性实验 | 第38-39页 |
| ·重复性实验 | 第39页 |
| ·临床血清样品检测 | 第39-40页 |
| 4 讨论 | 第40-41页 |
| 第五部分 全文总结 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-47页 |
| Abstract | 第47页 |
