摘要 | 第1-9页 |
第一章 文献综述 | 第9-27页 |
1. 白术的研究概况 | 第9-10页 |
·白术概述 | 第9页 |
·白术病毒病研究现状及难点 | 第9-10页 |
2. 番茄的研究概况 | 第10-11页 |
·番茄概述 | 第10页 |
·番茄病毒病研究现状及难点 | 第10-11页 |
3. 植物病毒的检测方法 | 第11-15页 |
·生物学检测法 | 第11页 |
·血清学测定 | 第11-12页 |
·电子显微镜技术 | 第12页 |
·分子生物学技术 | 第12-15页 |
·核酸分子杂交技术 | 第12-13页 |
·双链RNA技术 | 第13页 |
·聚合酶链式反应技术 | 第13-15页 |
·基因芯片技术 | 第15页 |
4. 植物病毒基因组 | 第15-23页 |
·dsDNA病毒基因组 | 第16-17页 |
·花椰菜花叶病毒属 | 第16页 |
·杆状DNA病毒属 | 第16-17页 |
·东格鲁病毒属 | 第17页 |
·单链DNA病毒基因组 | 第17-18页 |
·生病毒科 | 第17页 |
·矮缩病毒科 | 第17-18页 |
·正义单链RNA病毒基因组 | 第18-21页 |
·烟草花叶病毒属 | 第18-19页 |
·雀麦花叶病毒属 | 第19页 |
·黄瓜花叶病毒属 | 第19-20页 |
·烟草脆裂病毒属 | 第20页 |
·芜菁黄化花叶病毒属 | 第20-21页 |
·马铃薯X病毒属 | 第21页 |
·负义单链RNA病毒基因组 | 第21-22页 |
·弹状病毒科 | 第21-22页 |
·尼布亚病毒科 | 第22页 |
·纤细病毒属 | 第22页 |
·链RNA病毒基因组 | 第22-23页 |
·呼肠病毒科 | 第23页 |
·双分病毒科 | 第23页 |
5. 黄瓜花叶病毒与烟草花叶病毒的研究进展 | 第23-25页 |
·黄瓜花叶病毒(CMV)的研究进展 | 第23-24页 |
·烟草花叶病毒(TMV)的研究进展 | 第24-25页 |
6. 本试验的研究意义 | 第25-26页 |
7. 总体设计与技术路线 | 第26-27页 |
第二章 材料与方法 | 第27-35页 |
1. 材料 | 第27页 |
·材料收集与保存 | 第27页 |
·所用菌株与载体 | 第27页 |
·试验试剂及仪器 | 第27页 |
·缓冲液的配制 | 第27页 |
2. 方法 | 第27-35页 |
·生物学检测(汁液摩擦接种法) | 第27页 |
·病毒基因克隆 | 第27-33页 |
·dsRNA模板制备 | 第27-28页 |
·引物设计 | 第28-29页 |
·RT-PCR反应体系 | 第29-30页 |
·PCR产物割胶回收 | 第30-31页 |
·感受态细胞的制备 | 第31页 |
·连接 | 第31-32页 |
·重组质粒的转化 | 第32页 |
·重组质粒DNA的制备 | 第32-33页 |
·重组质粒PCR鉴定 | 第33-34页 |
·测序及序列分析 | 第34-35页 |
第三章 白术病毒病病原全基因组克隆与分析 | 第35-59页 |
1. 材料与方法 | 第35-36页 |
·毒源 | 第35页 |
·方法 | 第35-36页 |
·生物学检测 | 第35页 |
·植物病原双链RNA(dsRNA)的提取及引物选用 | 第35页 |
·RT-PCR检测 | 第35-36页 |
·PCR产物琼脂糖凝胶电泳和割胶回收 | 第36页 |
·连接、重组质粒的转化 | 第36页 |
·重组质粒的鉴定 | 第36页 |
·测序及序列分析 | 第36页 |
2. 结果与分析 | 第36-54页 |
·生物学检测 | 第36-37页 |
·RT-PCR检测 | 第37-54页 |
·部分CMV-Am RNA3片段的克隆及序列分析 | 第37-38页 |
·CMV-Am RNA1全基因组序列的克隆及分析 | 第38-44页 |
·CMV-Am RNA2全基因组序列的克隆及分析 | 第44-49页 |
·CMV-Am RNA3全基因组序列的克隆及分析 | 第49-54页 |
3. 讨论 | 第54-57页 |
小结 | 第57-59页 |
第四章 番茄病毒病病原全基因组序列克隆与分析 | 第59-72页 |
1. 材料与方法 | 第59-60页 |
·毒源 | 第59页 |
·方法 | 第59-60页 |
·生物学检测 | 第59页 |
·植物病原双链RNA(dsRNA)的提取及引物选用 | 第59页 |
·RT-PCR检测 | 第59页 |
·PCR产物琼脂糖凝胶电泳和割胶回收 | 第59页 |
·连接、重组质粒的转化 | 第59页 |
·重组质粒的鉴定 | 第59-60页 |
·测序及序列分析 | 第60页 |
2. 结果与分析 | 第60-69页 |
·生物学检测 | 第60页 |
·RT-PCR检测 | 第60-69页 |
·部分TMV-SXFQ基因组序列的克隆 | 第60-61页 |
·TMV-SXFQ全基因组序列的克隆及分析 | 第61-69页 |
3. 讨论 | 第69-70页 |
小结 | 第70-72页 |
第五章 全文讨论与结论 | 第72-79页 |
1. 全文讨论 | 第72-77页 |
2. 全文结论 | 第77-79页 |
参考文献 | 第79-86页 |
ABSTRACT | 第86-88页 |
附录A:本文所用的重要缩写词及中文对照 | 第88-89页 |
附录B:本文所用的化学试剂和分子生物学试剂 | 第89-90页 |
附录C:本文所用的缓冲液及培养基配方 | 第90-92页 |
附录D:常用的抗生素及使用浓度 | 第92-93页 |
附录E:主要实验仪器 | 第93-94页 |
致谢 | 第94页 |