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白术和番茄病毒病病原鉴定及其全基因组序列分析

摘要第1-9页
第一章 文献综述第9-27页
 1. 白术的研究概况第9-10页
   ·白术概述第9页
   ·白术病毒病研究现状及难点第9-10页
 2. 番茄的研究概况第10-11页
   ·番茄概述第10页
   ·番茄病毒病研究现状及难点第10-11页
 3. 植物病毒的检测方法第11-15页
   ·生物学检测法第11页
   ·血清学测定第11-12页
   ·电子显微镜技术第12页
   ·分子生物学技术第12-15页
     ·核酸分子杂交技术第12-13页
     ·双链RNA技术第13页
     ·聚合酶链式反应技术第13-15页
     ·基因芯片技术第15页
 4. 植物病毒基因组第15-23页
   ·dsDNA病毒基因组第16-17页
     ·花椰菜花叶病毒属第16页
     ·杆状DNA病毒属第16-17页
     ·东格鲁病毒属第17页
   ·单链DNA病毒基因组第17-18页
     ·生病毒科第17页
     ·矮缩病毒科第17-18页
   ·正义单链RNA病毒基因组第18-21页
     ·烟草花叶病毒属第18-19页
     ·雀麦花叶病毒属第19页
     ·黄瓜花叶病毒属第19-20页
     ·烟草脆裂病毒属第20页
     ·芜菁黄化花叶病毒属第20-21页
     ·马铃薯X病毒属第21页
   ·负义单链RNA病毒基因组第21-22页
     ·弹状病毒科第21-22页
     ·尼布亚病毒科第22页
     ·纤细病毒属第22页
   ·链RNA病毒基因组第22-23页
     ·呼肠病毒科第23页
     ·双分病毒科第23页
 5. 黄瓜花叶病毒与烟草花叶病毒的研究进展第23-25页
   ·黄瓜花叶病毒(CMV)的研究进展第23-24页
   ·烟草花叶病毒(TMV)的研究进展第24-25页
 6. 本试验的研究意义第25-26页
 7. 总体设计与技术路线第26-27页
第二章 材料与方法第27-35页
 1. 材料第27页
   ·材料收集与保存第27页
   ·所用菌株与载体第27页
   ·试验试剂及仪器第27页
   ·缓冲液的配制第27页
 2. 方法第27-35页
   ·生物学检测(汁液摩擦接种法)第27页
   ·病毒基因克隆第27-33页
     ·dsRNA模板制备第27-28页
     ·引物设计第28-29页
     ·RT-PCR反应体系第29-30页
     ·PCR产物割胶回收第30-31页
     ·感受态细胞的制备第31页
     ·连接第31-32页
     ·重组质粒的转化第32页
     ·重组质粒DNA的制备第32-33页
   ·重组质粒PCR鉴定第33-34页
   ·测序及序列分析第34-35页
第三章 白术病毒病病原全基因组克隆与分析第35-59页
 1. 材料与方法第35-36页
   ·毒源第35页
   ·方法第35-36页
     ·生物学检测第35页
     ·植物病原双链RNA(dsRNA)的提取及引物选用第35页
     ·RT-PCR检测第35-36页
     ·PCR产物琼脂糖凝胶电泳和割胶回收第36页
     ·连接、重组质粒的转化第36页
     ·重组质粒的鉴定第36页
     ·测序及序列分析第36页
 2. 结果与分析第36-54页
   ·生物学检测第36-37页
   ·RT-PCR检测第37-54页
     ·部分CMV-Am RNA3片段的克隆及序列分析第37-38页
     ·CMV-Am RNA1全基因组序列的克隆及分析第38-44页
     ·CMV-Am RNA2全基因组序列的克隆及分析第44-49页
     ·CMV-Am RNA3全基因组序列的克隆及分析第49-54页
 3. 讨论第54-57页
 小结第57-59页
第四章 番茄病毒病病原全基因组序列克隆与分析第59-72页
 1. 材料与方法第59-60页
   ·毒源第59页
   ·方法第59-60页
     ·生物学检测第59页
     ·植物病原双链RNA(dsRNA)的提取及引物选用第59页
     ·RT-PCR检测第59页
     ·PCR产物琼脂糖凝胶电泳和割胶回收第59页
     ·连接、重组质粒的转化第59页
     ·重组质粒的鉴定第59-60页
     ·测序及序列分析第60页
 2. 结果与分析第60-69页
   ·生物学检测第60页
   ·RT-PCR检测第60-69页
     ·部分TMV-SXFQ基因组序列的克隆第60-61页
     ·TMV-SXFQ全基因组序列的克隆及分析第61-69页
 3. 讨论第69-70页
 小结第70-72页
第五章 全文讨论与结论第72-79页
 1. 全文讨论第72-77页
 2. 全文结论第77-79页
参考文献第79-86页
ABSTRACT第86-88页
附录A:本文所用的重要缩写词及中文对照第88-89页
附录B:本文所用的化学试剂和分子生物学试剂第89-90页
附录C:本文所用的缓冲液及培养基配方第90-92页
附录D:常用的抗生素及使用浓度第92-93页
附录E:主要实验仪器第93-94页
致谢第94页

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