| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 第一部分 文献综述 | 第13-30页 |
| 1 JEV的病原特征 | 第14-15页 |
| ·JEV的分类及理化性质 | 第14页 |
| ·JEV的培养特性 | 第14-15页 |
| ·JEV的血凝性 | 第15页 |
| 2 JEV的分子生物学特性 | 第15-22页 |
| ·JEV的基因组结构 | 第15-16页 |
| ·JEV的主要抗原蛋白 | 第16-18页 |
| ·结构蛋白 | 第16-17页 |
| ·非结构蛋白 | 第17-18页 |
| ·JEV的流行特征 | 第18-19页 |
| ·JEV的诊断技术 | 第19-22页 |
| ·JEV病原的分离、鉴定 | 第19页 |
| ·血清学检测 | 第19-21页 |
| ·生物学诊断方法 | 第21-22页 |
| 3 免疫胶体金技术的研究进展 | 第22-28页 |
| ·免疫胶体金技术的特点 | 第22页 |
| ·免疫胶体金技术的原理 | 第22-23页 |
| ·胶体金的制备 | 第23-24页 |
| ·免疫胶体金试纸条的组成 | 第24页 |
| ·免疫胶体金技术的应用 | 第24-28页 |
| ·免疫胶体金技术在抗体检测上的应用 | 第24-26页 |
| ·免疫胶体金技术在抗原检测上的应用 | 第26-27页 |
| ·免疫胶体金技术在寄生虫方面的应用 | 第27页 |
| ·免疫胶体金技术在药物残留方面的应用 | 第27-28页 |
| ·免疫胶体金技术的发展趋势 | 第28页 |
| 4 本研究目的和意义 | 第28-30页 |
| 第二部分 抗乙型脑炎E蛋白单克隆抗体的制备与纯化 | 第30-41页 |
| 1 试验材料 | 第30-31页 |
| ·试验动物、细胞 | 第30页 |
| ·主要试剂、耗材 | 第30页 |
| ·主要仪器设备 | 第30-31页 |
| 2 试验方法 | 第31-36页 |
| ·抗乙型脑炎病毒E蛋白单克隆抗体制备技术路线流程 | 第31-32页 |
| ·乙型脑炎单克隆抗体的制备与纯化 | 第32-36页 |
| ·杂交瘤细胞的复苏与传代 | 第32页 |
| ·杂交瘤细胞的冻存 | 第32页 |
| ·BALB/C小鼠的预处理 | 第32-33页 |
| ·注射杂交瘤细胞 | 第33页 |
| ·小鼠腹水的收取与纯化 | 第33-34页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳检测纯化效果 | 第34页 |
| ·腹水中单抗效价的测定 | 第34-36页 |
| 3 试验结果 | 第36-39页 |
| ·乙型脑炎杂交瘤细胞的复苏与传代培养 | 第36页 |
| ·小鼠腹水的收取与纯化 | 第36-37页 |
| ·单克隆抗体效价的测定 | 第37-39页 |
| 4 讨论 | 第39-41页 |
| ·杂交瘤细胞的复苏与传代培养 | 第39页 |
| ·杂交瘤细胞的冻存 | 第39页 |
| ·小鼠腹水的制备与纯化 | 第39-41页 |
| 第三部分 乙型脑炎的免疫胶体金快速检测试纸条的制备 | 第41-64页 |
| 1 试验材料与设备 | 第41-42页 |
| ·免疫层析材料 | 第41页 |
| ·主要试剂 | 第41-42页 |
| ·主要仪器设备 | 第42页 |
| 2 试验方法 | 第42-50页 |
| ·免疫胶体金的制备及纯化 | 第42-46页 |
| ·玻璃器皿的清洁 | 第42页 |
| ·胶体金溶液的制备 | 第42-43页 |
| ·金颗粒质量的鉴定 | 第43页 |
| ·胶体金的稳定性 | 第43-44页 |
| ·免疫胶体金的制备 | 第44页 |
| ·胶体金颗粒与单克隆抗体标记最适pH的确定 | 第44-45页 |
| ·胶体金颗粒与单克隆抗体标记最低蛋白标记量的确定 | 第45页 |
| ·胶体金的标记及纯化 | 第45-46页 |
| ·试纸条反应条件的优化 | 第46-49页 |
| ·最适标记金颗粒大小的选择 | 第46页 |
| ·各种溶液的筛选 | 第46-47页 |
| ·各种膜材料的蹄选 | 第47-48页 |
| ·试纸条组装材料的处理 | 第48页 |
| ·试纸条的组装 | 第48-49页 |
| ·免疫层析试纸条结果的判定 | 第49页 |
| ·免疫层析试纸条的性能测定 | 第49-50页 |
| ·重复性 | 第49页 |
| ·敏感性 | 第49页 |
| ·特异性 | 第49-50页 |
| 3 结果 | 第50-60页 |
| ·玻璃器皿的清洁 | 第50页 |
| ·柠檬酸钠还原法制备胶体金溶液 | 第50页 |
| ·胶体金质量的鉴定 | 第50-52页 |
| ·单克隆抗体与胶体金颗粒标记最适PH的优化 | 第52页 |
| ·单克隆抗体与胶体金颗粒标记最低蛋白标记量的确定 | 第52页 |
| ·胶体金溶液的标记纯化 | 第52-53页 |
| ·最适金颗粒大小的选择 | 第53页 |
| ·封闭液和封闭时间的选择 | 第53-54页 |
| ·金标抗体稀释液的选择 | 第54-55页 |
| ·硝酸纤维素膜的筛选 | 第55-56页 |
| ·样品垫的筛选 | 第56页 |
| ·金标垫的筛选 | 第56-57页 |
| ·金标抗体浓度的优化 | 第57-58页 |
| ·T线和C线的浓度优化 | 第58页 |
| ·吸水纸的筛选 | 第58-59页 |
| ·PVC底板的选择 | 第59页 |
| ·重复性试验 | 第59页 |
| ·敏感性试验 | 第59页 |
| ·特异性试验 | 第59-60页 |
| 4 讨论 | 第60-64页 |
| ·胶体金溶液的制备与质量鉴定 | 第60-61页 |
| ·单克隆抗体与胶体金颗粒的标记 | 第61-62页 |
| ·层析膜材料的选择 | 第62页 |
| ·T检测线和C质控线浓度的优化 | 第62页 |
| ·封闭液的选择 | 第62-63页 |
| ·本研究存在的问题及进一步完善建议 | 第63-64页 |
| 第四部分 结论 | 第64-65页 |
| 参考文献(REFERENCES) | 第65-69页 |
| 致谢 | 第69页 |