| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-20页 |
| ·渍害特点 | 第10页 |
| ·作物耐渍的相关机制 | 第10-13页 |
| ·生理代谢适应性 | 第11-12页 |
| ·形态适应性 | 第12-13页 |
| ·木质素研究进展 | 第13-17页 |
| ·木质素的结构与功能 | 第13-14页 |
| ·木质素生物合成调控 | 第14-17页 |
| ·咖啡酸-O-甲基转移酶研究进展 | 第17-18页 |
| ·玉米抗涝基因的发掘 | 第18-20页 |
| 2 研究目的与意义 | 第20-21页 |
| 3 实验材料及方法 | 第21-33页 |
| ·实验材料 | 第21-22页 |
| ·植株材料 | 第21页 |
| ·载体与菌株 | 第21页 |
| ·常用培养基与试剂 | 第21-22页 |
| ·引物设计 | 第22页 |
| ·尼加拉瓜大刍草RNA提取 | 第22-23页 |
| ·目的基因扩增 | 第23-26页 |
| ·cDNA合成 | 第23-24页 |
| ·PCR扩增 | 第24-25页 |
| ·目的片段的回收与纯化 | 第25页 |
| ·目的片段与T载体的连接 | 第25页 |
| ·连接产物的转化 | 第25-26页 |
| ·转化产物的涂板、摇菌与测序 | 第26页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第26-28页 |
| ·材料处理与RNA提取 | 第26-27页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第27-28页 |
| ·表达载体构建 | 第28-30页 |
| ·序列分析与引物设计 | 第28页 |
| ·PCR扩增与质粒提取 | 第28-29页 |
| ·CPB空载质粒转化与质粒提取 | 第29页 |
| ·表达载体构建、鉴定 | 第29-30页 |
| ·表达载体转化与鉴定 | 第30页 |
| ·农杆菌转化烟草 | 第30-31页 |
| ·农杆菌扩大培养 | 第30-31页 |
| ·农杆菌浸染烟草与筛选分化 | 第31页 |
| ·转基因烟草鉴定 | 第31-33页 |
| ·转基因植株DNA提取 | 第31-32页 |
| ·转基因植株PCR检测 | 第32-33页 |
| 4 结果与分析 | 第33-44页 |
| ·咖啡酸-O-甲基转移酶基因ZnCDMT克隆与分析 | 第33-35页 |
| ·根系ZnCOMT相对定量表达 | 第35-38页 |
| ·不同处理时间下的根系 | 第35-36页 |
| ·GAPDH与ZnCOMT引物特异性与标准曲线 | 第36-37页 |
| ·根系ZnCOMT相对表达量 | 第37-38页 |
| ·表达载体构建 | 第38-40页 |
| ·转基因侵染 | 第40-41页 |
| ·转基因植株 | 第41-44页 |
| ·转基因T_0代植株检测 | 第41页 |
| ·转基因T_0代植株表型观察 | 第41-43页 |
| ·转基因种子T_0与T_1代种子收获 | 第43-44页 |
| 5 讨论与结论 | 第44-47页 |
| ·农杆菌抑制问题 | 第44-45页 |
| ·ZnCOMT的多态性 | 第45页 |
| ·ZnCOMT甲基化可能参与作物的耐渍 | 第45-46页 |
| ·转基因植株检测问题 | 第46页 |
| ·后期应进行的相关实验 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 附录 | 第56-57页 |