| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 缩略语 | 第9-10页 |
| 目录 | 第10-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-20页 |
| 1 氧化应激与活性氧 | 第13-14页 |
| 2 Keap1-Nrf2-ARE 信号通路 | 第14-18页 |
| ·抗氧化反应元件 ARE 的结构与功能 | 第14页 |
| ·Nrf2 的结构与功能 | 第14-15页 |
| ·Keap1 的结构与功能 | 第15-16页 |
| ·Keap1-Nrf2-ARE 信号通路激活机制 | 第16-17页 |
| ·Keap1-Nrf2-ARE 信号通路的作用 | 第17-18页 |
| 3 药物筛选 | 第18-19页 |
| 4 总结 | 第19-20页 |
| 第二章 实验设计方案 | 第20-22页 |
| 1 研究目的与意义 | 第20页 |
| 2 研究内容 | 第20-21页 |
| 3 实验流程图 | 第21-22页 |
| 第三章 抗氧化药物筛选细胞模型的建立 | 第22-40页 |
| 1 材料与试剂 | 第22-24页 |
| ·材料 | 第22页 |
| ·试剂 | 第22页 |
| ·主要试剂配制 | 第22-24页 |
| 2 方法 | 第24-32页 |
| ·重组质粒载体 pARE-Luc-Neo 的构建 | 第24-27页 |
| ·ARE 序列片段与转移载体的双酶切 | 第25页 |
| ·双酶切产物割胶回收纯化 | 第25页 |
| ·连接反应 | 第25-26页 |
| ·E.coli TG1 感受态细胞的制备 | 第26页 |
| ·连接产物转化 | 第26页 |
| ·重组质粒载体的筛选与鉴定 | 第26-27页 |
| ·质粒中提 | 第27页 |
| ·质粒浓度确定 | 第27页 |
| ·Hek293 细胞的培养 | 第27页 |
| ·G418 最佳筛选浓度的确定 | 第27-28页 |
| ·抗氧化药物筛选细胞模型的建立 | 第28-32页 |
| ·重组质粒载体 pARE-Luc-Neo 转染 Hek293 细胞 | 第28页 |
| ·G418 初筛 | 第28页 |
| ·有限稀释法挑选阳性单克隆细胞 | 第28-29页 |
| ·TBHQ 诱导筛选稳定细胞株 Hek293-ARE | 第29-30页 |
| ·Hek293-ARE 细胞的保存 | 第30页 |
| ·细胞模型的实验验证 | 第30页 |
| ·细胞模型的稳定性验证 | 第30-32页 |
| ·数据分析 | 第32页 |
| 3 结果 | 第32-37页 |
| ·重组质粒载体 pARE-Luc-Neo 的鉴定 | 第32-33页 |
| ·抗氧化药物筛选细胞模型的建立 | 第33-37页 |
| ·G418 最佳筛选浓度的确定 | 第33页 |
| ·抗氧化筛选细胞模型的建立 | 第33-34页 |
| ·细胞模型的实验验证 | 第34-36页 |
| ·细胞模型的稳定性验证 | 第36-37页 |
| 4 讨论 | 第37-40页 |
| 第四章 抗氧化药物筛选细胞模型的应用 | 第40-52页 |
| 1 材料与试剂 | 第40页 |
| ·材料 | 第40页 |
| ·试剂 | 第40页 |
| ·主要试剂配制 | 第40页 |
| 2 方法 | 第40-43页 |
| ·Hek293-ARE 细胞的复苏和培养 | 第40-41页 |
| ·中药单体的筛选 | 第41页 |
| ·蛹虫草抗氧化有效部位的筛选 | 第41-43页 |
| ·蛹虫草粗多糖的制备 | 第41-42页 |
| ·蛹虫草水提组分的制备 | 第42页 |
| ·蛹虫草粗多糖的筛选 | 第42页 |
| ·蛹虫草水提组分的筛选 | 第42-43页 |
| ·数据分析 | 第43页 |
| 3 结果 | 第43-51页 |
| ·中药单体的筛选 | 第43-46页 |
| ·蛹虫草组多糖的制备 | 第46-47页 |
| ·蛹虫草粗多糖的筛选 | 第47-48页 |
| ·蛹虫草水提组分的筛选 | 第48-51页 |
| 4 讨论 | 第51-52页 |
| 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-57页 |
| 致谢 | 第57页 |